于露
- 作品数：5 被引量：21H指数：3
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- 人参皂苷Rg1通过miR-138-5p/SIRT1轴诱导骨髓间充质干细胞向髓核样细胞增殖分化被引量：3
- 2022年
- 目的探讨人参皂苷Rg1诱导大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向髓核样细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)分化的机制。方法从成年SD大鼠中分离培养BMSCs。通过CCK-8法检测不同浓度人参皂苷Rg1(0,2.5,5,10,20μmol·L^(–1))对BMSCs生存活性的影响。将细胞分为空白组,5μmol·L^(–1)人参皂苷Rg1干预组和10μmol·L^(–1)人参皂苷Rg1干预组。培养48 h后通过流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blotting检测NPCs标志蛋白胶原蛋白2型(collagen type 2,COL2)、Aggrecan和配对盒基因(paired box gene 1,Pax1)的表达;将细胞分为空白组、人参皂苷Rg1干预组、人参皂苷Rg1干预+NC mimic组和人参皂苷Rg1干预+miR-138-5p mimic组;通过以上方法进行进一步检测miR-138-5p对人参皂苷Rg1诱导BMSCs分化的影响;双荧光素酶报告基因和RNA结合蛋白免疫沉淀法检测miR-138-5p和sirtuin-1(SIRT1)的靶向关系;转染pcDNA-SIRT1检测其对miR-138-5p诱导BMSCs分化的影响。结果2.5,5,10μmol·L^(–1)人参皂苷Rg1呈剂量依赖性增强BMSCs活力(P<0.05);与空白组比较,5μmol·L^(–1)和10μmol·L^(–1)人参皂苷Rg1干预组呈剂量依赖性抑制细胞凋亡(P<0.05),促进NPCs标志蛋白表达(P<0.05);与人参皂苷Rg1干预组相比,人参皂苷Rg1+miR-138-5p组BMSCs凋亡率增加(P<0.01),NPCs标志蛋白表达减少(P<0.01);此外,SIRT1是miR-138-5p的靶基因;与miR-138-5p mimic+pcDNA-3.1组相比,miR-138-5p mimic+pcDNA-SIRT1组细胞凋亡率降低(P<0.01),NPCs标志蛋白表达增加(P<0.01)。结论人参皂苷Rg1可通过调控miR-138-5p/SIRT1轴诱导BMSCs向NPCs增殖和分化。
- 岳宗进刘汝银于露王新立冯仲锴李云朋
- 关键词：骨髓间充质干细胞SIRT1
- 58例胸腰椎骨折术后内固定取出围手术期护理体会
- 2016年
- 目的：探讨胸腰椎骨折术后内固定取出围手术期护理效果。方法：对我科2013年9月-2015年6月58例胸腰椎骨折术后患者内固定取出围手术期护理记录并进行1年随访。结果．58例患者平均住院16．2天，1年内内固定取出术后无1例发生再次骨折，平均术后3个月恢复正常生活，脊柱生理曲度逐渐恢复，均无任何并发症。结论：胸腰椎内固定取出是消除椎体对内固定的受力依赖，恢复椎体功能及防止钉棒松动、断裂的有效手段，加强重视心理支持教育、术前术后安全护理则是保证手术成功达到患者满意的有力条件。
- 李艳玲于露
- 关键词：胸腰椎骨折内固定取出围手术期护理
- 牛膝总皂苷调控Nampt/NAD/Sirt1轴诱导骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化被引量：8
- 2019年
- 背景:研究表明,骨髓间充质干细胞可向髓核样细胞分化,但分化机制尚不明确。目的:利用牛膝总皂苷诱导大鼠骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化,并探讨Nampt/NAD/Sirt1轴在其中的作用。方法:取第3代SD大鼠骨髓间充质干细胞,随机分成4组:(1)骨髓间充质干细胞组;(2)骨髓间充质干细胞+牛膝总皂苷组;(3)骨髓间充质干细胞+牛膝总皂苷+烟酰胺单核苷酸组(烟酰胺单核苷酸为促NAD合成的外源性小分子物质);(4)骨髓间充质干细胞+牛膝总皂苷+FK866组(FK866为烟酰胺磷酸核糖转移酶抑制剂)。连续诱导培养14d,阿尔新蓝染色法检测细胞内糖胺多糖含量,RT-PCR检测髓核样细胞相关基因COL2、Aggrecan、KRT19和PAX1 mRNA表达,Western blot检测COL2的蛋白表达,Sirt1测定试剂盒检测Sirt1活性,NAD^+/NADH试剂盒检测NAD+含量。结果与结论:(1)与骨髓间充质干细胞组相比,骨髓间充质干细胞+牛膝总皂苷组能够使糖胺多糖、髓核样细胞相关基因表达、COL2蛋白表达、Sirt1活性、NAD^+含量明显增加(P <0.05);(2)与骨髓间充质干细胞+牛膝总皂苷组相比,骨髓间充质干细胞+牛膝总皂苷+烟酰胺单核苷酸组糖胺多糖、髓核样细胞相关基因表达、COL2蛋白表达、Sirt1活性和NAD^+含量增加(P<0.05);相反,骨髓间充质干细胞+牛膝总皂苷+FK866组上述指标均降低(P <0.05);(3)结果表明,牛膝总皂苷可诱导大鼠骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化,Nampt/NAD/Sirt1轴在其中发挥促进作用。
- 岳宗进刘汝银于露彭晓艳鲁花
- 关键词：骨髓间充质干细胞牛膝总皂苷间质干细胞唇形科
- 补骨脂素调控SKP2/PTHrP/SIRT1轴缓解炎症环境下髓核细胞退变的作用被引量：4
- 2021年
- 目的探讨补骨脂素对白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人髓核细胞(HNPCs)退变的影响及机制。方法体外培养HNPCs,用10 ng/ml IL-1β和50 ng/ml TNF-α诱导HNPCs 24 h使其发生退变,设置对照组、IL-1β+TNF-α组、补骨脂素(10 μmol/L、25 μmol/L和50 μmol/L)组、补骨脂素(25 μmol/L)+S期激酶相关蛋白2(SKP2)干扰或过表达组、补骨脂素+甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)重组蛋白(100 nmol/L)组、补骨脂素+PTHrP重组蛋白(100 nmol/L)+沉默信号调节子1(SIRT1)激活剂SRT1720(1 μmol/L)组。采用流式细胞术检测髓核细胞凋亡情况;ELISA法检测髓核细胞中IL-6、基质金属蛋白酶3(MMP-3)和MMP-13的表达水平;DCFDA探针法检测髓核细胞中活性氧(ROS)的水平;Western blotting检测髓核细胞中SKP2、PTHrP、SIRT1、细胞外基质(ECM)相关蛋白[二型胶原蛋白(COL Ⅱ)和蛋白聚糖蛋白]的表达水平;蛋白质免疫共沉淀(Co-IP)实验检测SKP2与PTHrP蛋白的相互作用;泛素化实验检测补骨脂素对SKP2介导的PTHrP泛素化水平的影响。结果补骨脂素以剂量依赖的方式抑制炎症环境下髓核细胞凋亡以及IL-6、MMP-3、MMP-13和ROS的生成(P<0.05或P<0.01),促进SKP2和ECM相关蛋白的表达(P<0.05)。与补骨脂素+杂乱干扰组比较,补骨脂素+SKP2干扰组SKP2和ECM相关蛋白的表达水平明显降低(P<0.05),髓核细胞凋亡率、IL-6、MMP-3、MMP-13和ROS水平明显增高(P<0.05或P<0.01)。Co-IP实验结果显示,SKP2与PTHrP蛋白存在相互作用。泛素化实验结果显示,与补骨脂素+空载体组比较,补骨脂素+SKP2过表达组PTHrP蛋白表达水平明显降低,SKP2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与补骨脂素组比较,补骨脂素+PTHrP重组蛋白组SIRT1和ECM相关蛋白表达水平明显降低(P<0.05),髓核细胞凋亡率、IL-6、MMP-3、MMP-13和ROS水平明显升高(P<0.05);与补骨脂素+PTHrP重组蛋白组比较,补骨脂素+PTHrP重组蛋白+SRT1720组PTHrP蛋白表达水平�
- 岳宗进刘汝银于露王新立冯仲锴王西彬
- 关键词：补骨脂素S期激酶相关蛋白2泛素化
- 赤芍总苷对脊髓损伤大鼠脊髓细胞凋亡的影响及机制被引量：6
- 2020年
- 目的探讨赤芍总苷(TPG)对脊髓损伤(SCI)大鼠脊髓细胞凋亡的影响及机制。方法SD大鼠18只,随机分为对照组、SCI组与TPG组,每组6只。采用Allen法制备SCI大鼠模型。对照组大鼠切除椎板后,不予以脊髓打击直接缝合。TPG组在SCI模型建立成功后每24 h腹腔注射25 mg/kg TPG,SCI组和对照组腹腔注射同体积的生理盐水,共处理28 d。采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分法对大鼠进行行为学评分,流式细胞术检测脊髓细胞凋亡情况,Western blotting检测脊髓细胞凋亡蛋白cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的表达。采用试剂盒检测脊髓组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量。结果与对照组比较,SCI大鼠BBB评分明显降低,脊髓细胞凋亡率以及凋亡蛋白cleaved caspase-3、cleaved caspase-9表达明显增高,脊髓组织中MDA、LDH含量升高,SOD含量降低(P<0.05)。与SCI组比较,TPG组大鼠BBB评分明显增高,脊髓细胞凋亡率以及凋亡蛋白cleaved caspase-3、cleaved caspase-9表达明显降低,脊髓组织中MDA、LDH含量降低,SOD含量升高(P<0.05)。结论TPG对SCI大鼠脊髓细胞凋亡有抑制作用,其作用机制可能与TPG对氧化应激的调节有关。
- 岳宗进刘汝银于露王新立冯仲锴王西彬李云朋许大勇
- 关键词：赤芍总苷脊髓损伤脊髓细胞氧化应激细胞凋亡
