李晓辰
- 作品数：18 被引量：105H指数：6
- 供职机构：江苏省中医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省中医药领军人才培养项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 床边教学在中医骨伤教学过程中的实施困境与对策——以南京中医药大学为例被引量：1
- 2022年
- 床边教学是医学生临床实习中一项重要的教学模式,南京中医药大学中医骨伤专业开展床边教学长达十余年,已出现诸多与时代不相适应的问题。文章旨在分析目前床边教学在中医骨伤专业教学过程中的困境,并提出了部分切实可行的解决办法,以期使床边教学真正收到实效,为骨伤专业教学改革与创新提供新的发展方向。
- 茆军吴鹏李晓辰李晓辰殷松江
- 关键词：中医骨伤科学床边教学
- “易层”贴敷调控巨噬细胞M2型极化促进DRG神经元自噬缓解KOA冷痛敏的机制研究
- 2024年
- 目的研究“易层”贴敷(YC)改善膝骨关节炎(KOA)冷痛敏的作用及机制。方法用IL-4处理骨髓来源的巨噬细胞成功构建M2型巨噬细胞模型。将60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术(Sham)组、KOA组、M2型巨噬细胞鞘内注射(M2-II)组、M2型巨噬细胞鞘内注射+“易层”贴敷(M2-II+YC)组,每组15只。KOA模型通过内侧半月板失稳术(DMM)构建,造模成功后,M2-II组和M2-II+YC组予以鞘内注射M2型巨噬细胞,M2-II+YC组使用“易层”贴敷28天,给药完成后提取各组背根神经节(DRG)组织。采用冷板实验和丙酮低温实验进行冷痛行为学检测;免疫荧光法检测小鼠DRG组织中CGRP、PGP9.5、c-Fos和M2型巨噬细胞标志物荧光强度;Western blot和qPCR检测巨噬细胞CD206、Arg-1和DRG组织TRPA1、TRPM8、LC3B、Beclin1、P62蛋白和基因表达量。结果与KOA组比较,M2-II组和M2-II+YC组小鼠冷板实验和丙酮低温实验所测定的冷痛阈值均明显提高(P<0.05,P<0.01);DRG组织中疼痛标志物CGRP、PGP9.5和c-Fos平均荧光强度明显降低(P<0.001);冷痛伤害感受器TRPA1、TRPM8蛋白和基因表达明显降低(P<0.01,P<0.001);M2表型CD206和Arg-1蛋白荧光强度明显升高(P<0.01,P<0.001);DRG神经元自噬LC3B、Beclin1和P62蛋白和基因表达明显升高(P<0.05,P<0.01,P<0.001);与M2-II组比较,M2-II+YC组小鼠上述各指标均明显改善(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论“易层”贴敷可能通过调控巨噬细胞M2型极化促进DRG神经元自噬,发挥对KOA小鼠冷痛敏的抑制作用。
- 廖太阳马振源杨楠李晓辰吴鹏茆军徐波张力王培民
- 关键词：巨噬细胞
- 衰老表型肝细胞外泌体对脂多糖致炎软骨细胞的影响及白芍的干预效应被引量：7
- 2021年
- 目的研究衰老表型的肝细胞外泌体对脂多糖(LPS)刺激软骨细胞的影响及白芍的干预效应。方法提取小鼠肝原代细胞,CCK-8法筛选白芍水煎液干预肝细胞的最佳浓度。随后,肝细胞随机分为空白组、衰老组和白芍组,0.3 mmol·L^(-1)过氧化氢诱导肝细胞衰老,检测肝细胞p16、p21、p53的基因和蛋白表达,观察肝细胞衰老及白芍的干预效应。分别提取各组肝细胞上清中的外泌体,通过电镜、粒径分析、四旋蛋白CD9、CD63、CD81鉴定外泌体。培养小鼠软骨细胞,LPS刺激以模拟KOA炎症环境,检测细胞上清液中TNF-α和IL-1β含量以验证造模成功。PHK67染色标记肝细胞外泌体并观察软骨细胞的摄入情况。将收集的各组肝细胞外泌体用于干预LPS致炎软骨细胞,检测软骨细胞基质降解合成标记物MMP3、MMP13、SOX9、ADAMTS5的基因和蛋白表达水平。结果经CCK-8法筛选,100μg·mL^(-1)为白芍水煎液干预肝细胞的最佳浓度。过氧化氢干预后,衰老组中细胞衰老标记物p16、p21、p53的基因和蛋白表达均高于正常组(P<0.05),而在白芍组则较衰老组降低(P<0.05)。各组肝细胞所收集外泌体均呈现双层膜结构,形态大小无差异,粒径富集均满足40~120 nm区间,代表性粒径富集于116.8 nm,丰度98%,外泌体标记物四旋蛋白CD9、CD63、CD81均为阳性表达。软骨细胞上清液中,促炎因子TNF-α、IL-1β的含量均在LPS刺激后较刺激前升高(P<0.01),PHK67染色试剂确认软骨细胞对各组肝细胞外泌体的摄入。衰老组肝细胞外泌体的干预下,软骨细胞基质降解合成标记物MMP3、MMP13、SOX9、ADAMTS5的基因和蛋白表达水平均较空白组肝细胞外泌体干预升高(P<0.05),而白芍组肝细胞外泌体干预则较衰老组肝细胞外泌体干预降低(P<0.05)。结论衰老表型肝细胞外泌体可加剧LPS致炎软骨细胞的退变进程,白芍水煎剂对此环节存在良性干预。
- 张力李晓辰廖太阳王培民邢润麟
- 关键词：软骨细胞肝细胞细胞衰老外泌体
- 骨关节炎疼痛相关危险因素研究进展被引量：5
- 2021年
- 疼痛是骨关节炎最突出的症状,也是一种复杂、多因素的生理现象。该综述主要从影响疼痛的相关危险因素进行简要概述。疼痛不仅与关节结构损伤有关,遗传、环境(肥胖)、心理和神经等因素均具有重要作用。每一个因素可单独发挥其作用,也能与其他因素混合,从而导致复杂性疼痛,这可以部分解释目前现有治疗方法疗效均不佳的现象。确定骨关节炎疼痛的危险因素,有助于准确鉴定疼痛表型,为骨关节炎疼痛患者的个体化干预提供可能。该文对骨关节疼痛的相关危险因素的研究报道做一综述。
- 徐波邢润麟茆军张农山李晓辰张力肖延成吴鹏王培民
- 关键词：骨关节炎疼痛
- 机械敏感性通道蛋白对膝骨关节炎滑膜巨噬细胞焦亡的调控效应分析被引量：1
- 2021年
- 目的:探讨机械敏感性通道蛋白Piezo1对膝骨关节炎细胞焦亡的调控效应。方法:选取5只SPF级雄性SD大鼠,提取腹腔巨噬细胞,分为空白对照组、应力拉伸组及应力拉伸+Piezo1抑制剂组。使用FX-5000T细胞牵张拉伸应力加载系统以6个循环/min的周期性频率对BioFlex板内巨噬细胞进行表面干预。Western Blot检测Caspase-1,Caspase-1 p10,GSDMD蛋白表达;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清IL-1β及IL-18含量;Hoechst33342/PI细胞双染免疫荧光检测巨噬细胞膜的完整性;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测巨噬细胞培养上清乳酸脱氢酶含量;荧光倒置显微镜观察线粒体活性氧(ROS)荧光强度。结果:应力拉伸组Caspase-1,Caspase-1 p10及GSDMD蛋白表达水平较空白对照组增加(P<0.05),而应力拉伸+Piezo1抑制剂组较应力拉伸组有所降低,差异有统计学意义(P<0.05);此外,应力拉伸组较空白对照组培养上清中IL-1β和IL-18含量显著上升,差异有统计学意义(P<0.05),应力拉伸+Piezo1抑制剂组较应力拉伸组含量显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);Ho/PI双染发现应力拉伸组细胞膜遭到破坏,碘化丙啶(PI)染色呈现红色荧光,应力拉伸+Piezo1抑制剂组细胞膜较为完整,PI不能染色或者染色较少;同时,应力拉伸组上清液中LDH含量显著上升,差异有统计学意义(P<0.05);应力拉伸+抑制剂LDH含量较应力拉伸组则显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);最后ROS荧光检测发现应力拉伸组产生大量红色荧光,而应力拉伸+抑制剂组荧光强度较低。结论:异常机械应力可通过Piezo1离子通道,加剧滑膜巨噬细胞焦亡及推动膝骨关节炎的进程。
- 廖太阳王培民徐波张力李晓辰吴鹏邢润麟黄正泉张农山
- 关键词：膝骨关节炎
- 三色散干预滑膜巨噬细胞焦亡影响背根神经节TRPA1治疗KOA疼痛的离体研究被引量：3
- 2022年
- 目的探讨滑膜巨噬细胞焦亡对背根神经节神经元细胞(DRG)膜上瞬时受体电位TRPA1的影响及三色散的干预作用。方法提取ICR小鼠滑膜巨噬细胞,用1μg/mL的脂多糖(LPS)以模拟KOA的炎症微环境;采用CCK-8法检测三色散水提物冻干粉对滑膜巨噬细胞的增殖活性,确定对细胞无毒性的干预浓度;滑膜巨噬细胞分组为正常组、LPS组、三色散组,Western blot法检测滑膜巨噬细胞焦亡相关NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达;qRT-PCR检测滑膜巨噬细胞NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18基因表达;ELISA检测炎症细胞因子(IL-1β和IL-18)水平;提取ICR小鼠DRG细胞,将上述三组细胞上清加入DRG细胞中,另增设一组加入LPS及TRPA1抑制剂,DRG分组为正常上清干预组(A组)、LPS上清干预组(B组)、三色散上清干预组(C组),LPS+TRPA1抑制剂组(D组);βⅢ-tubulin及GFAP免疫荧光鉴定提取的DRG神经元细胞;Western blot法及qRT-PCR检测TRPA1蛋白及基因表达;ELISA检测疼痛因子(CGRP和SP)水平;实时荧光钙成像观察各组DRG神经元细胞钙离子内流情况。结果确定100μg/mL三色散水提冻干粉对滑膜巨噬细胞无明显细胞毒性;LPS组NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达显著高于正常组,低于三色散组(P<0.05);LPS组NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18基因表达显著高于正常组,低于三色散组(P<0.05);LPS组细胞上清中IL-1β和IL-18表达量显著高于正常组,低于三色散组(P<0.05);βⅢ-tubulin及GFAP免疫荧光显示提取的DRG神经元细胞胞体呈圆形或椭圆形,可见神经元之间的轴突呈大量增加,形成稀疏网络状结构;三色散水提冻干粉干预后可抑制B组瞬时受体电位TRPA1蛋白及基因表达水平的上升(P<0.05),降低B组细胞上清中CGRP和SP表达量;实时荧光钙成像分别观察20、40和60 s的荧光强度发现:B组荧光强度较A组增加(P<0.05),C组及D组荧光强度较B组降低(P<0.05)。结论滑膜巨噬细胞焦亡激活DRG膜上TRPA1离子通道
- 杨楠廖太阳张力张皞晟李晓辰王培民张农山
- 关键词：背根神经节疼痛
- 基于thermoTRP离子通道所介导冷刺激痛敏对膝骨关节炎寒性痹痛机制的研究
- 目的：基于膝骨关节炎大鼠冷缩足潜伏期和冷刺激敏感通道蛋白TRPA1和TRPM8在患膝滑膜组织的表达变化,阐述膝骨关节炎虚寒冷痛的形成原理.
方法：健康4月龄SD雄性大鼠45只,体重440-470g,随机分成模型...
- 邢润麟王培民茆军张农山赵凌睿李晓辰
- 关键词：膝骨关节炎
- 基于UPLC-Q-Orbitrap MS/MS技术研究膝痹宁对KOA模型大鼠的软骨保护效应被引量：2
- 2023年
- 目的运用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(UPLC-Q-Orbitrap MS/MS)技术分析膝痹宁的药物活性成分,通过干预膝骨关节炎(KOA)模型大鼠代谢因素探讨膝痹宁软骨保护效应的作用机制。方法制备膝痹宁水提物,UPLC-Q-Orbitrap MS/MS技术分析膝痹宁的活性成分。将大鼠分为空白组、KOA组、膝痹宁组,提取大鼠软骨组织,HE染色、番红O-固绿染色观察组织结构形态;qPCR和Western blot法检测过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)、PPARγ辅助激活因子1α(PGC1α)及基质金属蛋白酶(MMP)3、MMP13的mRNA和蛋白表达水平;取各组大鼠血清完成代谢组学分析。结果经鉴定,膝痹宁含活性成分56种;组织学切片提示膝痹宁具有软骨保护作用,并能上调KOA大鼠软骨组织PPARγ、PGC1α的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01),降低MMP3、MMP13的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01);此外,代谢组学研究发现,膝痹宁对13种KOA差异代谢物存在干预作用,涉及10条代谢通路。结论膝痹宁具有多种药物活性成分,其KOA软骨保护效应与药物活性成分对KOA的代谢调控有关。
- 张力刘子修廖太阳吴鹏李晓辰梅伟茆军王培民张立
- 关键词：膝骨关节炎
- 异常代谢网络调控膝骨关节炎的研究进展被引量：6
- 2019年
- 膝骨关节炎(Osteoarthritis,KOA)是一种以膝关节软骨退变及软骨下骨质增生为特征的慢性炎症性关节病,发病率与致残率逐年增加。有研究发现[1,2],高血压、糖尿病、血脂异常等代谢因素与膝骨关节炎显著相关,存在代谢因素异常的膝骨关节炎患者比单纯的膝骨关节炎患者的病情更加严重。表明代谢网络异常在某种程度上可以形成与膝骨关节炎类似的炎症内环境促进膝骨关节炎的发病进程,因此有研究者将膝骨关节炎归入代谢综合征(Metabolic Svndrome,MS)的范畴。所以研究代谢网络调控异常的内环境和膝骨关节炎内环境的相似点,并以此发掘膝骨关节炎的治疗切入点是治疗膝骨关节炎的一个有潜力的研究方向。
- 肖延成王培民徐波殷松江张力李晓辰张立丁亮梅伟黄正泉
- 关键词：代谢网络代谢综合征膝骨关节炎
- 碘乙酸钠诱导的大鼠膝骨关节炎模型肠道菌群变化及其潜在影响被引量：5
- 2020年
- 目的:研究碘乙酸钠诱导的大鼠膝骨关节炎(KOA)模型肠道菌群变化情况,探究肠道菌群与KOA的潜在联系。方法:将SPF级大鼠分为空白对照组和KOA组,通过膝关节局部注射碘乙酸钠制造大鼠KOA模型。通过16SrDNA检测大鼠粪便中的肠道菌群变化情况,蛋白印记法检测结肠组织中NF-κB和TNF-α蛋白表达,RT-qPCR检测结肠组织中Caspase-1和IL-1β基因表达情况,苏木精-伊红染色观察结肠黏膜通透性变化,苏木精-伊红染色观察关节滑膜和软骨组织的病理变化情况。ELISA检测血液上清中LBP,IL-1β,TNF-α及IL-10炎症因子水平。结果:与空白对照组相比,从KOA组中筛选出明显变化的肠道菌群,以Akkermansia和疣微菌门变化最为显著,结肠黏膜通透性增加,结肠组织中NF-κB p65及TNF-α蛋白表达升高,结肠组织中Caspase-1和IL-1β基因表达升高,血液中促炎因子LBP,IL-1β及TNF-α蛋白含量升高,抗炎因子IL-10蛋白含量降低。结论:KOA病理状态下肠道菌群发生变化,结肠炎症反应增强,结肠炎症反应或许在提高全身炎症反应水平、促进与肠道菌群相关的KOA的病理进程中起到重要的桥梁作用。
- 肖延成徐波张力李晓辰吴鹏张立丁亮梅伟黄正泉茆军王培民
- 关键词：膝骨关节炎肠道菌群结肠炎症
