张文倩
- 作品数:6 被引量:3H指数:1
- 供职机构:天津大学更多>>
- 相关领域:生物学化学工程更多>>
- 多片段DNA的酵母快速组装方法
- 本发明公开了一种多片段DNA的酵母快速组装方法,包括以下步骤:(1)将多个含有同源臂的DNA分子与线性化的酵母穿梭载体共转化酵母;(2)将整个筛选培养板上的全部转化后的酵母菌落洗脱下来,离心,弃上清,得到转化后的酵母菌细...
- 元英进贾斌林秋卉张文倩张金来李炳志其他发明人请求不公开姓名
- 文献传递
- 多片段DNA的酵母快速组装方法
- 本发明公开了一种多片段DNA的酵母快速组装方法,包括以下步骤:(1)将多个含有同源臂的DNA分子与线性化的酵母穿梭载体共转化酵母;(2)将整个筛选培养板上的全部转化后的酵母菌落洗脱下来,离心,弃上清,得到转化后的酵母菌细...
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- 7-脱氢胆固醇生物合成酿酒酵母的构建和后鲨烯路径的研究
- 7-脱氢胆固醇(7-DHC)作为合成维生素D3的重要前体,有着广泛的医药和临床应用。本研究将外源基因C-24还原酶(DHCR24)导入酿酒酵母中,成功实现了7-脱氢胆固醇的异源合成。 将功能外源基因C24位双键还原酶D...
- 张文倩
- 关键词:生物合成酿酒酵母
- 一种酿酒酵母模块共转化组合筛选方法
- 本发明公开了一种酿酒酵母模块共转化组合筛选方法,步骤为:(1)每次从待筛选的启动子元件库、基因元件库和终止子元件库中各选一个元件组装到带有不同筛选标记的质粒上得到模块,不同的模块中,相同基因元件所选筛选标记相同,由模块组...
- 元英进林秋卉贾斌杜昊星张文倩李炳志
- 文献传递
- 人工酵母后鲨烯路径基因对7-脱氢胆固醇合成的影响被引量:3
- 2016年
- 酵母内源后鲨烯路径中的固醇类物质,是异源甾体类药物合成的重要前体。为了通过微调后鲨烯路径,与异源模块进行适配,以期达到提高异源甾体类化合物表达的目的,以维生素D3的直接前体—7-脱氢胆固醇(7-DHC)的合成为例,首先在固醇C-24甲基转移酶(ERG6)缺失的酿酒酵母BY4742中,通过导入人源固醇C-24还原酶DHCR24,并过表达截短的羟甲基戊二酰辅酶A还原酶t HMGR,获得可以合成7-DHC的人工酵母。在此基础上,将后鲨烯路径分割并构建成ERG1、ERG7、ERG11、ERG24-25-26-27和ERG2-3这5个模块,分别在所构建的7-DHC合成菌株中过表达。通过GC-TOF/MS分析7-DHC以及后鲨烯路径中相关代谢中间体的含量,并结合主成分分析发现,过表达不同后鲨烯模块会引起后鲨烯路径上固醇组分的变化而最终影响7-DHC的产量:与出发菌株相比,过表达ERG11模块会显著强化其他固醇物质到酵母固醇的转化;而过表达ERG2-3模块则会减少鲨烯的积累,同时显著增加羊毛固醇及其之后的固醇组分的含量,并获得迄今为止7-DHC在微生物中摇瓶水平的最高产量。因此,对ERG11和ERG2-3的表达优化对7-DHC的合成以及后鲨烯路径代谢流的强化起到了显著的作用,是后续优化人工7-DHC合成酵母的潜在靶点。为研究后鲨烯路径与其他异源甾体合成模块间的适配,提供了可供参考的案例。
- 张文倩周晓肖文海王颖
- 关键词:合成生物学酿酒酵母
- 一种酿酒酵母模块共转化组合筛选方法
- 本发明公开了一种酿酒酵母模块共转化组合筛选方法,步骤为:(1)每次从待筛选的启动子元件库、基因元件库和终止子元件库中各选一个元件组装到带有不同筛选标记的质粒上得到模块,不同的模块中,相同基因元件所选筛选标记相同,由模块组...
- 元英进林秋卉贾斌杜昊星张文倩李炳志
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