武国利
- 作品数：9 被引量：57H指数：3
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- miR-499-5p上调对动脉粥样硬化大鼠心肌细胞凋亡的影响及作用机制被引量：4
- 2021年
- 目的研究微小核糖核酸(micoroRNA,miR)-499-5p上调对动脉粥样硬化大鼠心肌细胞凋亡影响及作用机制。方法选取30只健康Wistar大鼠,经腹腔注射维生素D3和高脂饲料喂养方法建立动脉粥样硬化模型,分为模型组、竞争性短核糖核苷酸阴性对照序列(scramble-NC)组和miR-499-5p上调组各10只,另选10只健康Wistar大鼠为正常组。构建miR-499-5p表达载体,检测血清氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肌酸激酶(CK)、髓过氧化物酶(MPO)]、炎症因子[白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-10]水平。HE染色观察心肌细胞凋亡,Western blot法检测心肌细胞凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤/白血病-xl(Bcl-xl)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)]的表达。结果模型组、scramble-NC组、miR-499-5p上调组较正常组血清CK、MDA、MPO、IL-1β、TNF-α水平和心肌细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,SOD、IL-10水平和Bcl-xl蛋白表达降低(P均<0.05);miR-499-5p上调组较模型组及scramble-NC组血清CK、MDA、MPO、IL-1β、TNF-α水平和心肌细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,SOD、IL-10水平和Bcl-xl蛋白表达升高(P均<0.05)。结论miR-499-5p上调可逆转动脉粥样硬化所致氧化应激、血管炎症反应,抑制大鼠动脉粥样硬化发展,可能通过调控Bax、Bcl-xl蛋白表达,抑制心肌细胞凋亡。
- 田蜜武国利
- 关键词：动脉粥样硬化心肌细胞凋亡
- 姬松茸多糖对过氧化氢诱导的心肌细胞损伤的保护作用被引量：2
- 2022年
- 目的考察姬松茸多糖(Agaricus blazei polysaccharide,ABPS)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的心肌细胞(H9C2)损伤的影响及潜在机制。方法分别用H_(2)O_(2)(200μmol·L^(-1))、ABPS(0.5、1.0、2.0 g·L^(-1))、LY294002(10μmol·L^(-1))处理心肌细胞H9C2,将H9C2细胞分为NC组、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+ABPS 0.5 g·L^(-1)组、H_(2)O_(2)+ABPS 1.0 g·L^(-1)组、H_(2)O_(2)+ABPS 2.0 g·L^(-1)组、H_(2)O_(2)+ABPS+PBS组及H_(2)O_(2)+ABPS+LY294002组,CCK8实验和流式细胞术分别检测细胞存活率和凋亡率;Western blot分别检测细胞相关蛋白P21、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、Cleaved含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cysteinyl aspartate specific proteinase 3,caspase-3)、Cleaved含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Cysteinyl aspartate specific proteinase 9,Caspase-9)、p-蛋白激酶B(Protein kinase B,AKT)和AKT的表达水平,试剂盒检测H9C2细胞中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的水平。结果与对照NC组相比,H_(2)O_(2)组心肌细胞H9C2的凋亡率、P21、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9、p-AKT蛋白、ROS和MDA含量均升高,Cyclin D1、GSH-Px含量和细胞存活率均降低,差异具有统计学意义(P<0.05);0.5、1.0、2.0 g·L^(-1)ABPS均可逆转H_(2)O_(2)对心肌细胞H9C2的作用,呈剂量依赖趋势,且2.0 g·L^(-1)ABPS效果最好;经LY294002阻断AKT信号后,与H_(2)O_(2)+ABPS+PBS组相比,H_(2)O_(2)+ABPS+LY294002组细胞凋亡率、P21、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9、p-AKT蛋白、ROS和MDA含量均升高,Cyclin D1、GSH-Px含量和细胞存活率均降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论姬松茸多糖通过AKT信号通路保护心肌细胞H9C2免受H_(2)O_(2)诱导的氧化应激损伤和凋亡。
- 马竞武国利王潇伟许金鹏
- 关键词：心肌细胞姬松茸多糖AKT
- miR-499a-5p通过靶向APC减轻氧化应激对心肌细胞的损伤被引量：3
- 2020年
- 目的研究miR-499a-5p对过氧化氢(H2O2)诱导的心肌细胞H9c2增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测不同浓度H2O2(100、200、400、800μmol/L)处理6 h的H9c2细胞的存活率,筛选400μmol/L H2O2处理的H9c2细胞作为模型组。将模型组细胞分为miR-NC组、miR-499a-5p组、si-NC组、si-APC组、miR-499a-5p+pcDNA组、miR-499a-5p+pcDNA-APC组,用流式细胞术、免疫印迹(Western blot)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞的存活率、凋亡率、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及增殖凋亡相关蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白依靠性激酶抑制剂(P21)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关的X基因(Bax)的表达。结果 H2O2(100、200、400、800μmol/L)呈浓度依赖性抑制H9c2细胞的存活,最适浓度为400μmol/L。模型组细胞中miR-499a-5p表达显著降低,APC表达显著升高;过表达miR-499a-5p、抑制APC均可明显减轻H2O2诱导的H9c2细胞的增殖抑制、凋亡促进和氧化应激作用,并且miR-499a-5p还可靶向抑制APC。过表达APC逆转了miR-499a-5p对H2O2诱导的心肌细胞损伤。结论 miR-499a-5p可调控H2O2诱导的心肌细胞增殖、凋亡和氧化应激,其机制与靶向抑制APC有关,将可为氧化应激引起的心肌细胞损伤的治疗提供新靶点。
- 武国利马竞
- 关键词：APC心肌细胞损伤
- 心肌梗死患者血清miR-208b、miR-302b表达水平及预后研究被引量：1
- 2020年
- 目的探讨心肌梗死患者血清微小核糖核酸(miR)-208b、miR-302b表达水平,分析其与患者预后的相关性。方法选取自2017年11月至2019年11月收治的132例心肌梗死患者为研究对象。比较不同Killip分级、梗死部位患者血清miR-208b、miR-302b表达水平,分析血清miR-208b、miR-302b表达水平与心肌梗死患者临床特征的相关性。根据患者30 d预后情况将患者分为预后良好组(n=75)与预后不良组(n=57)。比较不同预后患者血清miR-208b、miR-302b表达水平。绘制受试者工作特征曲线,分析血清miR-208b、miR-302b表达水平预测心肌梗死患者30 d预后价值。以血清miR-208b、miR-302b表达量均数将患者划分为高表达者与低表达者,通过Kaplan-Meier曲线进行高低危生存分析。结果不同Killip分级患者血清miR-208b、miR-302b表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。不同梗死部位患者血清miR-208b、miR-302b表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Spearman相关性分析显示,血清miR-208b、miR-302b表达水平与心肌梗死患者Killip分级呈明显正相关(r=0.498,r=0.512,P<0.05)。预后不良组患者血清miR-208b、miR-302b表达水平高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-208b预测心肌梗死患者30 d预后的受试者工作特征曲线下面积为0.759(95%可信区间0.677~0.829),当截断值>2.10时,敏感度为59.65%,特异度为88.00%。血清miR-302b预测心肌梗死患者30 d预后的受试者工作特征曲线下面积为0.793(95%可信区间0.714~0.859),当截断值>3.21时,敏感度为45.61%,特异度为97.33%。血清miR-208b、miR-302b联合预测心肌梗死患者30 d预后的受试者工作特征曲线下面积为0.864(95%可信区间0.793~0.917),敏感度为78.95%,特异度为80.00%。miR-208b、miR-302b高表达患者与低表达患者生存曲线比较,差异有统计学意义(χ^2=2.203,χ^2=3.405,P<0.01)。结论不同预后患者血清miR-208b、miR-302b水平存在明显差异,二者联�
- 张宁马竞武国利
- 关键词：心肌梗死预后
- 连翘苷通过调控miR-483-3p对oxLDL诱导的血管平滑肌细胞损伤的影响被引量：2
- 2022年
- 目的:探讨连翘苷(PHN)对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管平滑肌细胞炎症损伤的影响及分子机制。方法:人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)随机分为对照组、oxLDL组(50 mg·ml^(-1))、oxLDL(50 mg·ml^(-1))+PHN低(1μmol·L^(-1))、中(10μmol·L^(-1))、高(100μmol·L^(-1))剂量组、oxLDL(50 mg·ml^(-1))+anti-miR-483-3p组、oxLDL(50 mg·ml^(-1))+anti-miR-NC组、oxLDL(50 mg·ml^(-1))+PHN(100μmol·L^(-1))+miR-483-3p组、oxLDL(50 mg·ml^(-1))+PHN(100μmol·L^(-1))+miR-NC组。采用流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot法检测活化的半胱胺酸蛋白酶(Cleaved-Caspase)3和Cleaved-Caspase9蛋白表达;ELISA法检测白细胞介素1β(IL^(-1)β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;RT-qPCR检测miR-483-3p表达水平。结果:低、中、高浓度连翘苷处理后,oxLDL诱导的HA-VSMC细胞凋亡率、Cleaved-Caspase3和Cleaved-Caspase9蛋白表达水平、IL^(-1)β和TNF-α水平、miR-483-3p表达水平显著降低(P<0.05),且呈浓度依赖性。抑制miR-483-3p降低oxLDL诱导的HA-VSMC细胞凋亡率、Cleaved-Caspase3、Cleaved-Caspase9、IL^(-1)β、TNF-α水平(P<0.05)。过表达miR-483-3p逆转了连翘苷对oxLDL诱导的HA-VSMC炎症损伤的作用。结论:连翘苷通过下调miR-483-3p表达从而抑制oxLDL诱导的HA-VSMC炎症损伤。
- 武国利张宁马竞
- 关键词：连翘苷血管平滑肌细胞凋亡炎症反应
- 孟鲁司特钠对咳嗽变异性哮喘患者IL-4、IL-10及肺功能的影响被引量：40
- 2016年
- 目的探讨孟鲁司特钠对咳嗽变异型哮喘(CVA)患者血清白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)及肺功能的影响。方法 100例患者按照随机数字表法随机分为对照组50例,给予茶碱缓释片、酮替芬口服治疗;观察组50例,在对照组基础上加服孟鲁司特钠。观察治疗前、治疗8周后两组患者血清IL-4、IL-10及肺功能的变化。结果治疗前两组患者血清IL-4、IL-10及肺功能比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗8周后,观察组与对照组比较,血清IL-4表达水平明显降低,IL-10明显升高。肺功能明显改善(P<0.05)。总有效率比较,观察组明显高于对照组(P<0.05)。结论孟鲁司特钠能明显降低咳嗽变异性哮喘患者血清IL-4表达水平、升高IL-10表达水平,明显改善肺功能,临床疗效显著。
- 李倩李立维刘君武国利
- 关键词：孟鲁司特钠咳嗽变异型哮喘
- 风轮菜总黄酮联合miR-702-5p抑制物对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的影响被引量：3
- 2021年
- 目的研究风轮菜总黄酮联合miR-702-5p抑制物对缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤的影响。方法实验设置对照组(Con,不作任何处理)、缺氧/复氧组(H/R,缺氧6 h,复氧3 h),H/R+药物-1组、H/R+药物-2组、H/R+药物-3组(6.25μg/ml、12.5μg/ml、25μg/ml的风轮菜总黄酮+缺氧/复氧处理)、H/R+anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC+缺氧/复氧处理)、H/R+anti-miR-702-5p组(转染anti-miR-702-5p+缺氧/复氧处理)、H/R+药物-3+anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC+25μg/ml风轮菜总黄酮+缺氧/复氧处理)、H/R+药物-3+anti-miR-702-5p组(转染anti-miR-702-5p+25μg/ml风轮菜总黄酮+缺氧/复氧处理)。蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1A(P21)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达;细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;试剂盒检测丙二醛(MDA)含量及乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-702-5p表达水平。结果缺氧/复氧诱导的心肌细胞中P21、Caspase-3表达水平升高,细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,MDA含量升高,LDH活性升高,CAT、SOD活性降低。不同浓度风轮菜总黄酮处理后P21、Caspase-3表达水平降低,细胞存活率升高,细胞凋亡率降低,MDA含量降低,LDH活性降低,CAT、SOD活性升高。抑制miR-702-5p表达可抑制缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤。风轮菜总黄酮联合miR-702-5p抑制剂可显著提高细胞存活率,抑制细胞凋亡和氧化应激反应。结论风轮菜总黄酮联合miR-702-5p抑制物可保护心肌细胞免受缺氧/复氧引起的损伤。
- 张宁马竞武国利
- 关键词：心肌细胞
- miR-376b-3p通过靶向FGF21加重缺氧复氧心肌细胞的损伤
- 2020年
- 目的探讨miR-376b-3p对缺氧复氧(H/R)心肌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法培养心肌细胞H9c2,缺氧复氧法体外模拟H/R细胞损伤,建立心肌细胞损伤模型。用流式细胞术、免疫印迹(Western blot)、酶联免疫吸附(ELISA)检测正常对照组、H/R组、anti-miR-NC组、anti-miR-376b-3p组、anti-miR-376b-3p+si-NC组、anti-miR-376b-3p+si-成纤维细胞生长因子21(FGF21)组细胞凋亡率、凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达和肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)情况。双荧光素酶报告基因实验检测细胞的荧光活性。结果成功建立缺氧复氧损伤的细胞模型;模型组细胞中miR-376b-3p表达显著升高,FGF21表达显著降低,并且抑制miR-376b-3p可以减轻损伤细胞的凋亡和TNF-α、IL-6、IL-17的含量,以及上调Bcl-2,下调Bax。此外,miR-376b-3p还可靶向FGF21 mRNA。抑制FGF21后,抑制miR-376b-3p对缺氧复氧损伤的H9c2细胞的保护作用被减弱。结论 miR-376b-3p可促进缺氧复氧心肌细胞的凋亡和炎性反应,其机制与靶向FGF21 mRNA相关。
- 武国利马竞
- 关键词：成纤维细胞生长因子21缺氧复氧心肌细胞
- 甘草查尔酮A调控miR-142-3p/FOXO1表达抑制H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞凋亡被引量：3
- 2021年
- 目的探讨甘草查尔酮A(licochalcone A,LA)对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法将体外培养的大鼠心肌H9C2细胞分为Control组、H_(2)O_(2)组(100μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)刺激24 h)和H_(2)O_(2)+low dose LA组、H_(2)O_(2)+middle dose LA组、H_(2)O_(2)+high dose LA组(10、20和40μmol·L^(-1)LA孵育4 h后,给予H_(2)O_(2)刺激24 h),采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,比色法检测细胞Caspase-3活性,RT-PCR检测细胞中miR-142-3p表达,Western blotting检测细胞中FOXO1蛋白表达;采用双荧光素酶报告基因实验和Western blotting检测miR-142-3p与FOXO1靶向调控关系;将miR-142-3p inhibitor或pcDNA3.1-FOXO1过表达载体质粒转染至H9C2细胞后,观察miR-142-3p低表达或FOXO1过表达对40μmol·L^(-1)LA作用下的H9C2细胞凋亡的影响。结果与对照组比较,H_(2)O_(2)组H9C2细胞凋亡率、Caspase-3活性和细胞中FOXO1蛋白表达水平均明显升高,而细胞中miR-142-3p表达水平明显降低(P<0.05);与H_(2)O_(2)组比较,中、高剂量LA可呈剂量依赖性抑制H_(2)O_(2)诱导的H9C2细胞凋亡和Caspase-3活性,并上调miR-142-3p和下调FOXO1蛋白表达(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验和Western blotting实验证实FOXO1是miR-142-3p的靶基因,miR-142-3p可负向调控FOXO1蛋白表达。miR-142-3p低表达或FOXO1过表达可逆转LA对H9C2细胞凋亡的抑制作用。结论LA可通过调控miR-142-3p/FOXO1表达抑制H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞凋亡。
- 马竞武国利王潇伟许金鹏
- 关键词：心肌细胞细胞凋亡FOXO1
