- TXNIP对糖尿病视网膜病大鼠ROS/RNS应激及DNA损伤的影响及机制分析被引量：5
- 2020年
- 目的观察硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)对糖尿病视网膜病(DR)大鼠视网膜细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法将30只大鼠随机均分为三组:对照组、DM组和Azas组。DM组和Azas组用链脲佐菌素(STZ)诱发建立糖尿病模型,对照组大鼠注射同体积的枸橼酸缓冲液。Azas组大鼠给予玻璃体内注射10μmol/L的azaserine 2. 5μl,在建模成功后第23天和第27天各一次,均注射在右眼。对照组和DM组大鼠在相同时间点注射同体积的生理盐水。检测各组大鼠视网膜中己糖胺通路(HBP)活性和TXNIP的表达、活性氧(ROS)/活性氮(RNS)应激、线粒体功能、DNA损伤、DNA损伤修复和细胞凋亡等指标。结果与对照组相比,DM组中O-Glc NAc修饰、TXNIP表达、ROS含量和S-nitrosocysteine(SNO)表达显著增加(P <0. 05),Azas组中上述指标均显著低于DM组(P <0. 05)。与对照组相比,DM组中线粒体膜电位、复合物Ⅰ活性和复合物Ⅲ活性均显著降低(P <0. 05),Azas组中线粒体膜电位、复合物Ⅰ活性、复合物Ⅲ活性和复合物Ⅳ活性显著高于DM组(P <0. 05)。与对照组相比,DM组中彗星尾长、尾DNA含量百分比、尾距、Olive尾距、γH2AX和H3K9Me3的表达均显著增加(P <0. 05),Azas组中上述指标均显著低于DM组(P <0. 05)。与对照组相比,DM组中BRCA2的表达均显著降低(P <0. 05),Azas组中BRCA1、BRCA2、DNAPKcs、Ku70和Ku80的表达显著高于DM组(P <0. 05)。与对照组相比,DM组中细胞凋亡率和cleaved-caspase-3的表达显著增加(P <0. 05),Azas组中上述指标均显著高于DM组(P <0. 05)。结论 TXNIP抑制可缓解DM诱导的视网膜细胞凋亡,其机制可能与降低ROS/RNS应激和DNA损伤、增加线粒体功能和DNA损伤修复有关。
- 姚倩周歆田蕴霖
- 关键词：糖尿病视网膜病硫氧还蛋白相互作用蛋白DNA损伤
- 原发性闭角型青光眼患者的角膜共聚焦显微镜表现被引量：2
- 2020年
- 目的探讨原发性闭角型青光眼(PACG)患者的角膜共聚焦显微镜表现。方法本研究为横断面研究,分析41例(82只眼)急性PACG(APACG组)、34例(68只眼)慢性PACG(CPACG组)和30例(60只眼)白内障(对照组)患者的一般资料、共聚焦显微镜检查结果及角膜内皮镜检查结果。结果共聚焦显微镜下可见APACG急性发作期角膜上皮下神经纤维丛密度降低,基质层呈激活状态,基质细胞肿胀,反光增强,交联成网状;内皮细胞大小不均,细胞表面有点状高反光物质沉积[角膜后沉着物(KP)],病情严重者细胞体积增大变形、融合;内皮细胞密度平均(1 654±999)个/mm^2,与临床前期的(2 601±529)个/mm^2比较,差异具有统计学意义(t=5.588,P<0.001)。CPACG表现为部分角膜上皮细胞活化,上皮下神经纤维丛密度降低,内皮细胞异型性增加,内皮细胞密度平均(2 440±442)个/mm^2,与对照组的(2 582±372)个/mm^2无显著差异(t=1.945,P=0.054)。结论高眼压情况下可出现角膜上皮下神经纤维丛密度降低,内皮细胞异型性增加。急性高眼压比慢性高眼压对角膜损伤更重,表现为基质细胞活化,内皮细胞密度降低,角膜后出现KP。急性高眼压导致角膜水肿时,共聚焦显微镜观察角膜内皮细胞的效果优于角膜内皮镜。
- 王伟伟姚倩杨欣周歆孙娜刘建荣
- 关键词：原发性闭角型青光眼角膜眼压共聚焦显微镜
- 环孢素A滴眼液联合维生素A治疗大鼠干眼症的效果及作用机制被引量：15
- 2020年
- 目的观察环孢素A滴眼液联合维生素A治疗大鼠干眼症的效果,并探讨其作用机制。方法将50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、环孢素A组、维生素A组、联合用药组,每组10只。除对照组外,其他各组制备干眼症模型,于背部皮下注射氢溴酸东莨菪碱0.6 mg/100μL,4次/d,然后置于通风装置中连续吹风12 h。同时,环孢素A组给予0.05%的环孢素A滴眼,1滴/次,2次/d;维生素A组给予维生素A 200μg/kg灌胃;联合用药组每日同时给予环孢素A和维生素A干预,方法同以上两组。各组均干预10 d,造模期间观察大鼠眼部变化。分别于干预第3、7、10天使用泪液试纸检测泪液分泌量,用荧光素钠试纸检测泪膜破裂时间,用荧光素钠染色法评价角膜损伤程度。实验结束用颈椎脱臼法处死大鼠,取其角膜组织。用HE染色法观察角膜组织病理变化,用Western blotting法检测角膜组织中自杀相关因子(Fas)及其配体(FasL)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)蛋白表达。结果与模型组比较,环孢素A组、联合用药组泪液分泌量多,泪膜破裂时间长,荧光素钠染色评分高,角膜组织病理损伤轻,Fas、FasL蛋白表达低,Bcl-2蛋白表达高,比较差异均有统计学意义(P均<0.05);且联合用药组以上变化更明显(P均<0.05)。结论环孢素A滴眼液联合维生素A能够显著改善大鼠干眼症症状,其作用机制可能与降低Fas、FasL表达,提高Bcl-2表达有关。
- 姚倩田蕴霖周歆孙连义
- 关键词：干眼症环孢素A滴眼液维生素A
- 桑色素对视网膜母细胞瘤生长和凋亡的影响被引量：4
- 2016年
- 目的探讨桑色素对人视网膜母细胞瘤细胞增生抑制及诱导凋亡的作用。设计实验研究。研究对象人视网膜母细胞瘤细胞Y79细胞。方法不同浓度(0、50、100、150、250μM)桑色素对人视网膜母细胞瘤细胞Y79细胞作用24、48、72小时后,CCK8法检测肿瘤细胞生存率的变化;细胞周期检查法检测肿瘤细胞周期的变化;用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡的变化。主要指标细胞生存率、细胞周期分布、细胞凋亡率。结果桑色素浓度为150、250μM,与桑色素浓度为0、50、100μM作用于Y79细胞相比,检测时间分别在48、72小时时的细胞生存率显著下降(P<0.05),细胞周期G0-G1期显著增多(P<0.05),S期显著下降(P<0.05),细胞凋亡显著增多(P<0.05)。较高浓度的桑色素,随着作用时间的延长,引起Y79细胞生存率逐渐下降,细胞凋亡率逐渐增多,具有时间依赖性和剂量依赖性。结论桑色素能够抑制视网膜母细胞瘤增生并促进其凋亡,提示桑色素有望成为治疗视网膜母细胞瘤的有效药物。
- 白淑玮李凤至姚倩
- 关键词：桑色素视网膜母细胞瘤增生凋亡
- 奥卡西平改善NMDA诱导的视网膜病变及其机制研究
- 2019年
- 目的:研究奥卡西平对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)诱导的大鼠视网膜病变的改善作用,并探讨其可能的作用机制。方法:32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、奥卡西平组、美金刚组,每组各8只。除正常组外,各组均通过双眼玻璃体内注射NMDA的方法诱导视网膜病变模型。造模后开始干预,奥卡西平组灌胃给予80 mg·kg^(-1)奥卡西平,美金刚组灌胃给予10 mg·kg^(-1)美金刚,正常组和模型组给予等体积生理盐水。造模后第6天,采用视网膜电图评估每组大鼠视功能的差异。视网膜行苏木精-伊红(HE)染色以及Brn3免疫荧光染色观察其形态学和视网膜神经节细胞数的变化。采用蛋白免疫印迹法检测大鼠视网膜中Cleaved caspase-3、Caspase-3、 Bax、Bcl-2等蛋白的表达变化。结果:与模型组相比较,奥卡西平组及美金刚组大鼠明视负向反应(PhNR)振幅增加(P<0.05),视网膜厚度增加以及视网膜神经节细胞的数目增加(P<0.05),视网膜中的Cleaved caspase-3/Caspase-3、 Bax/Bcl-2的蛋白表达水平比值降低(P<0.05)。结论:奥卡西平能通过抑制凋亡通路改善NMDA诱导的视网膜病变。
- 杨欣张勇姚倩
- 关键词：奥卡西平视网膜神经节细胞视网膜病变
- 玻璃体腔注药联合微创玻璃体切除治疗糖尿病视网膜病变的临床疗效研究被引量：16
- 2017年
- 目的:探讨玻璃体腔注药联合微创玻璃体切除治疗糖尿病视网膜病变的临床疗效。方法:选择2014年1月至2016年1月在我院确诊并治疗的增生性糖尿病视网膜病变患者80例,共83只患眼,随机分为A、B两组。A组共42例患眼,接受25 G玻璃体微创手术;B组共41例患眼,在A组治疗的基础上给予玻璃体腔注射康柏西普。比较两组患者的手术情况、治疗前后最佳视力的矫正(Best-corrected visual acuity,BCVA)情况、视网膜厚度以及术后1个月不良反应的发生情况。结果:B组患者的手术时间较A组显著缩短(P<0.05),且术中使用电凝的患眼、术中出血以及术中发生医源性裂隙的患眼比例显著低于A组(P<0.05),新生血管消失的患眼比例显著高于A组(P<0.05)。B组患者术后1个月和3个月的BVCA显著高于A组(P<0.05),且术后视网膜的厚度显著薄于A组(P<0.05),术后发生玻璃体积血和前方出血的患眼比例显著低于A组(P<0.05)。结论:玻璃体腔注射康柏西普联合25G玻璃体微创切除术治疗增生性糖尿病视网膜病变的临床疗效显著,有利于患者术后视力以及视网膜恢复。
- 孙连义赵梅生李凤至姚倩朱忠桥杨新光
- 关键词：糖尿病视网膜病变疗效
- miR-23a通过靶向GLS1调控H_(2)O_(2)诱导的视网膜色素上皮细胞增殖、迁移被引量：1
- 2021年
- 目的探究氧化应激条件下miR-23a对视网膜色素上皮细胞增殖、迁移的影响及其机制。方法以不同浓度的H_(2)O_(2)诱导ARPE-19细胞氧化应激,qPCR检测诱导后ARPE-19细胞miR-23a的表达水平以及增殖和迁移能力的变化;ARPE-19细胞转染miR-23a mimic、NC(negative control) mimic后,采用MTT和Transwell分别检测各组细胞的增殖和迁移能力;双荧光素酶报告实验验证miR-23a和GLS1的靶向关系;检测GLS1表达对氧化应激下ARPE-19细胞增殖和迁移能力的影响;检测转染miR-23a mimic及调节GLS1表达后ARPE-19细胞谷氨酰胺摄取能力,Western blot检测转染miR-23a mimic及调节GLS1表达后ARPE-19细胞p42/p44 MAPK、JNK磷酸化水平。结果 H_(2)O_(2)诱导后ARPE-19细胞miR-23a表达水平显著上调,细胞增殖和迁移能力显著下降;转染miR-23a mimic后ARPE-19细胞增殖和迁移能力显著抑制。荧光素酶报告实验显示GLS1为miR-23a的靶基因,下调GLS1表达后,显著抑制H_(2)O_(2)诱导的ARPE-19细胞增殖和迁移能力;上调miR-23a及下调GLS1的表达则抑制H_(2)O_(2)诱导ARPE-19细胞的谷氨酰胺的摄取及p42/p44 MAPK、JNK磷酸化水平。结论氧化应激通过上调视网膜色素上皮细胞miR-23a而抑制GLS1的表达进而抑制MAPK信号通路影响细胞的增殖和迁移。
- 田蕴霖周歆白淑玮姚倩
- 关键词：氧化应激视网膜色素上皮细胞增殖迁移
- 替米沙坦延缓大鼠视网膜衰老的作用及机制
- 2017年
- 目的研究替米沙坦延缓大鼠生理性视网膜衰老的作用及潜在机制。方法健康无眼疾SD大鼠40只,3个月龄大小,随机分为替米沙坦组和对照组,每组20只,饲养至9个月龄时开始给予干预,替米沙坦组用8 mg/(kg·d)替米沙坦灌胃,对照组大鼠用等容量生理盐水灌胃,至17个月龄。HE染色检测两组大鼠视网膜厚度及病理学改变;免疫组织化学染色检测视网膜氧化应激相关蛋白Cu-Zn-SOD、NOX2和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达;采用Western blot法检测视网膜中p38 MAPK、NF-κB及其磷酸化水平(p-p38 MAPK、p-NF-κB)的表达。结果视网膜HE染色显示:与对照组相比,替米沙坦组视网膜各层结构排列整齐,细胞形态基本一致,细胞丢失减少,视网膜厚度增加,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化结果显示:与对照组相比,替米沙坦组超氧化物歧化酶Cu-Zn-SOD的表达增强,过氧化物酶NOX2的表达减弱;凋亡相关蛋白Bcl-2的表达无明显变化(P>0.05),Bax的表达增强,Bcl-2/Bax的比值较对照组降低(P<0.05)。Western blot结果显示:与对照组相比,替米沙坦组p-p38 MAPK、p-NF-κB的水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论替米沙坦可能通过降低p38 MAPK及NF-κB磷酸化水平,减轻视网膜氧化应激反应,增加细胞凋亡,进而延缓大鼠生理性视网膜衰老。
- 朱江施叶雯周歆姚倩谢臣康前雁
- 关键词：替米沙坦视网膜氧化应激凋亡衰老
- HIF-1α在缺氧培养条件下新生大鼠视网膜祖细胞及脑干细胞中的表达
- :比较缺氧条件下新生大鼠视网膜祖细胞和脑神经干细胞的生长状态及HIF-1α 的表达差异性.方法:分离SD 新生大鼠视网膜祖细胞及脑神经干细胞,采用无血清悬浮细胞培养,传代后两种细胞的缺氧组及常氧组分别在3％和20％氧浓度...
- 姚倩
- HIF-1α在缺氧后新生大鼠视网膜祖细胞及脑神经干细胞中的表达差异
- :比较缺氧条件下新生大鼠视网膜祖细胞(RPCs)和脑神经干细胞(NSCs)的生长状态及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达差异性.方法:分离SD 新生大鼠RPCs 及NSCs,采用无血清悬浮细胞培养,行Pax6、Ne...
- 姚倩
