马方方
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：江苏省人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 干扰AURKA基因表达对人骨肉瘤细胞系U2-OS细胞增殖与细胞周期的影响被引量：1
- 2016年
- 目的 :探讨AURKA基因表达下调对骨肉瘤细胞增殖和细胞周期分布的影响。方法:脂质体瞬时转染法介导AURKA小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)处理骨肉瘤U2-OS细胞,采用实时荧光定量PCR及Western blot方法检测转染前后AURKA mRNA和蛋白表达,CCK8实验检测细胞活力变化,流式细胞术检测细胞周期分布变化,Western blot检测周期相关蛋白的表达,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)细胞增殖实验检测细胞增殖情况。结果:AURKA siRNA作用U2-OS细胞后,AURKA mRNA和蛋白的表达水平较正常对照组及阴性对照组显著降低,且差异有统计学意义(P<0.05),两对照组间AURKA表达无明显差异;下调AURKA表达后,细胞活力降低,且作用72 h后抑制率最高,约为(36.63±2.38)%;细胞周期中S期细胞比例下降,G2/M期细胞比例增加,与正常对照组及阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),提示存在G2/M期阻滞,S期细胞增殖率下降(P<0.05),周期相关蛋白D1(Cyclin D1)表达水平下降(P<0.05),周期相关蛋白B1(Cyclin B1)表达水平明显增加(P<0.05)。结论:下调AURKA表达可抑制骨肉瘤细胞U2-OS的增殖,同时导致细胞阻滞于G2/M期。
- 马方方陆超
- 关键词：AURKA骨肉瘤RNA干扰细胞增殖细胞周期
- mir-124-3p/SPOCK2在急性呼吸窘迫综合征早产儿血浆中表达的临床研究被引量：3
- 2016年
- 目的 :探讨测定急性呼吸窘迫综合征早产儿血浆中mir-124-3p和SPOCK2蛋白的临床意义,为早产儿严重肺损伤寻找新的高危因子和治疗靶标。方法:根据早产儿呼吸窘迫综合征(respiratory distress syndrome,RDS)诊断标准,早产儿分成RDS组17例及对照组(无RDS等并发症的普通早产儿)21例。采用ELISA和Western blot法测定外周血浆中和体外培养的人肺成纤维细胞中的SPOCK2蛋白。采用Target Scan分析与SPOCK2基因3′末端非编码区结合的可能mi RNA,并用荧光实时定量RTPCR扩增候选mi RNA。采用Pearson统计方法对血浆中SPOCK2蛋白和mi RNA进行相关分析。构建mir-124-3p慢病毒载体,并转染人肺成纤维细胞,研究mir-124-3p过表达对SPOCK2蛋白表达的影响。结果:对照组早产儿血浆中SPOCK2蛋白浓度为(7.24±0.43)μg/L,而RDS组升高为(16.43±0.54)μg/L,两组间比较差异有统计学意义(t=12.81,P<0.01)。SPOCK2基因3′末端存在mir-124-3p、mir-25-3p、mir-122-5p等候选的mi RNA结合位点。荧光定量RT-PCR证实外周血中不能测到mir-25-3p、mir-122-5p。mir-124-3p表达在对照组中较高,在RDS组中显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。并且mir-124-3p的表达量与SPOCK2蛋白血浆水平呈负相关(r=-0.645 9,P=0.012 6)。mir-124-3p慢病毒载体转染可以显著抑制人肺成纤维细胞中SPOCK2蛋白的表达。结论:测定早产儿血浆中SPOCK2蛋白,可能对RDS等肺疾病的病情评估有一定临床意义。利用mir-124-3p调控SPOCK2蛋白表达,可能对早产儿RDS等严重肺损伤的治疗有潜在应用价值。
- 凌岚管亚飞马方方陆超胡毓华
- 关键词：早产儿肺损伤
