罗思羽
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 供职机构：西安交通大学医学部基础医学院更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Vsig4和免疫球蛋白Fc段融合蛋白的真核表达纯化被引量：1
- 2016年
- 目的:本项目将通过构建中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary,CHO)真核表达系统获取小鼠Vsig4膜外端和免疫球蛋白Ig G3a-Fc段的融合蛋白,鉴定Vsig4-Fc和Vsig4纳米抗体的相互作用。方法:采用重合延伸PCR法融合小鼠Ig G3a-Fc和Vsig4胞外段的基因序列,将该融合基因插入真核表达载体中并转染CHO细胞。Western blotting鉴定转染细胞上清中的目标蛋白,通过连续两次亚克隆筛选,获得高表达小鼠Vsig4-Fc融合蛋白的单克隆,之后大量培养增殖转染细胞并收集细胞培养上清,选择Protein A柱纯化方法纯化Vsig4-Fc蛋白,最后经ELISA法鉴定Vsig4-Fc和纳米抗体的结合能力。结果:在CHO细胞中成功构建了小鼠Vsig4-Fc真核表达稳转系,并且在真核表达体系中获得可表达15 mg/L的双分子结构Vsig4-Fc的稳定转染细胞系。经鉴定小鼠Vsig4-Fc融合蛋白能与Vsig4纳米抗体结合。结论:重合延伸PCR法使得Vsig4和Fc基因片段的融合更为高效,两次亚克隆筛选优势细胞系大幅提高了真核蛋白的表达量,为进一步研究Vsig4的生物学功能奠定重要基础。
- 郑芳罗思羽韩燕张富军温玉荣
- 关键词：融合蛋白蛋白质纯化
- FIGOⅠ-Ⅱ期宫颈癌患者住院期间生存质量及影响因素研究被引量：8
- 2016年
- 目的研究国际妇产科联合会(FIGO)Ⅰ-Ⅱ期的宫颈癌患者住院期间生存质量及其影响因素。方法采用横断面调查法,使用自制基本情况调查表和中文版宫颈癌生存质量测定量表(FACT-Cx)对2014年6月至2015年6月在陕西省肿瘤医院妇瘤科住院的201例FIGOⅠ-Ⅱ期宫颈癌患者进行问卷调查。单因素分析宫颈癌患者生存质量影响因素根据变量类型使用t检验或方差分析;多因素分析宫颈癌患者生存质量影响因素使用多重线性逐步回归分析并拟合最优方程。结果 1FACT-Cx量表总分(104.06±21.584);共性模块FACT-G总分(63.89±17.189);五个维度分数:生理状况得分(18.09±6.158);社会/家庭状况得分(19.63±4.988);情感状况得分(16.03±6.791);功能状况得分(10.13±5.071);附加关注得分(40.17±6.371);2单因素分析结果显示:不同工作情况(F=4.094,P=0.008)、家庭月收入(F=2.528,P=0.030)、家庭关系评价(F=14.072,P<0.001)、经济负担(F=12.680,P<0.001)之间的生存质量总分差异有统计学意义;3多重线性回归分析结果显示:对FIGOⅠ-Ⅱ期宫颈癌患者生存质量总分影响作用由大到小的因素依次为:经济负担、家庭关系评价、工作情况、医疗保险。结论 FIGOⅠ-Ⅱ期宫颈癌患者住院期间的生存质量水平不容乐观,尤其是功能领域处于中等偏下水平;对于经济负担重、家庭支持少、个人无稳定收入、无医疗保险的宫颈癌患者,值得医护人员加强关注,提供针对性地指导和帮助以提高其住院期间的生存质量。
- 刘丽珺王效罗思羽郑全庆
- 关键词：宫颈癌
- 靶向巨噬细胞膜蛋白Vsig4特异性纳米抗体的构建和筛选被引量：2
- 2017年
- 目的构建V-set and immunoglobulin domain containing 4(Vsig4)特异性纳米抗体,以期作为巨噬细胞的分子探针。方法用Vsig4重组蛋白对羊驼进行免疫,分离血液中的淋巴细胞,利用噬菌体展示技术,构建噬菌体展示文库,经过连续3次生物淘筛获得与Vsig4蛋白结合的噬菌体,经测序和基因比对所得VHH序列,用ELISA法筛选出抗Vsig4的高亲和力纳米抗体,并用Vsig4稳定表达细胞系验证纳米抗体的结合能力。结果成功构建了插入率为70%、库容量为7.27×107的噬菌体表达文库,经过克隆筛选获得136个Vsig4阳性单克隆,经测序获得15个不同的VHH基因,将这些基因克隆至原核表达体系,表达和纯化后获得了高纯度的Vsig4纳米抗体,其中Nb119的亲和力最高,并且可以与Vsig4稳定表达细胞系结合。结论成功构建并筛选了特异性、高亲和力的Vsig4纳米抗体,以期用于检测巨噬细胞表面Vsig4的表达和构建特异性分子探针。
- 郑芳罗思羽韩燕宁启兰温玉荣
