郝晓娟 作品数:7 被引量:16 H指数:3 供职机构: 山西农业大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 山西省科技攻关计划项目 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
miRNA-338-3p通过靶向抑制MC1R基因表达抑制羊驼黑色素细胞黑色素的生成 皮质素受体1(MC1R)是在黑色素细胞内表达的G蛋白耦合受体(G protein-coupled receptor,GPCR)家族成员,参与黑色素细胞中黑色素的生成.微RNAs(mi RNAs)是一类非编码RNA,通过与... 武良琦 范瑞文 曾庆宝 郝晓娟 任玉红关键词:羊驼 黑色素细胞 MC1R基因 miR-324-3p通过调控MC1R基因影响黑色素的形成 被引量:8 2016年 旨在证明miR-324-3p可以通过调控其预测的靶基因MC1R及其下游基因的表达从而对羊驼皮肤黑色素的合成产生影响。本研究在体外培养的羊驼皮肤黑色素细胞中转染miR-324-3p过表达载体,应用qRT-PCR与Western blotting分析比较各试验组中MC1R基因与毛色相关基因小眼畸形相关转录因子(Microphthalmia-associtated transcription factor,Mitf)、酪氨酸酶(Tyrosinase,Tyr)、酪氨酸相关蛋白2(Tyrosinase related protein 2,Tyrp2)的表达差异性,利用酶标仪检测黑色素产量的变化。结果显示:(1)miR-324-3p在棕色与白色羊驼皮肤中均有表达,且在棕色羊驼皮肤中极显著表达(P<0.01),其相对表达量是白色的1.64倍;(2)黑色素细胞被转染了miR-324-3p过表达载体后,处理组靶基因MC1R及其下游调控基因Mitf、Tyr和Tyrp2的表达量与黑色素产量较空白对照组均有下调,且以Mitf基因表达量极显著下调(P<0.01)。综上表明,羊驼皮肤中miR-324-3p可能通过调控MC1R基因的表达,顺势下调MC1R基因下游调控基因Mitf、Tyr与Tyrp2的表达,最终对羊驼皮肤黑色素细胞中黑色素的类型及合成量产生影响。 曾庆宝 范瑞文 张秋月 郝晓娟 武良琦 任玉红关键词:MC1R 黑色素 羊驼 不同浓度α-促黑素细胞激素对绵羊黑素细胞增殖和黑素生成的影响 <正>研究目的α-促黑素细胞激素(α-melanocyte stimulating hormone,α-MSH)与MC1R结合通过c AMP信号通路影响黑色素的生成,然而不同浓度α-MSH对绵羊黑色素生成有哪些影响,还没... 郝晓娟 任玉红 范瑞文 张秋月 曾庆宝 武良琦关键词:Α-促黑素细胞激素 黑素细胞 黑素生成 文献传递 不同浓度α-促黑素细胞激素对绵羊黑素细胞增殖和黑素生成的影响 郝晓娟 任玉红 范瑞文 张秋月 曾庆宝 武良琦miRNA-338-3p通过靶向抑制MC1R基因表达抑制羊驼黑色素细胞黑色素的生成 被引量:5 2017年 黑色素皮质素1受体(MC1R)是在黑色素细胞内表达的G蛋白耦合受体(G protein-coupled receptor,GPCR)家族成员,参与黑色素细胞中黑色素的生成。微RNAs(miRNAs)是一类非编码RNA,通过与靶基因3'-UTR结合抑制基因表达。已有研究证明,miR-338-3p在多种人类肿瘤细胞中(过)表达,可通过下调靶基因表达抑制肿瘤细胞的侵袭迁移能力。然而,有关miR-338-3p对羊驼皮肤黑色素细胞的黑色素合成影响却罕见报道。本研究证明,miRNA-338-3p通过靶向抑制MC1R基因表达,抑制羊驼黑色素细胞黑色素的生成。采用生物信息学预测MC1R基因是miRNA-338-3p的靶基因,其基因表达抑制羊驼黑色素细胞黑色素合成。随后构建miR-338-3p真核表达载体。其基因转染结合q PT-PCR和Western印迹结果揭示,与对照细胞比较,过表达miRNA-338-3p的羊驼黑色素细胞的MC1R基因,及其下游与黑色素生成相关的小眼相关性转录因子(MITF)、酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白1(TYRP1)、酪氨酸酶相关蛋白2(TYRP2)编码基因mRNA及蛋白质表达水平明显下调。酶联免疫吸附分析显示,过表达miRNA-338-3p的羊驼皮肤黑色素细胞的黑色素产量,较对照细胞显著下降(P<0.01)。综上结果,miR-338-3p可通过抑制靶基因MC1R表达,下调其下游基因MITF、TYR、TYRP1和TYRP2基因的表达,从而抑制羊驼皮肤黑色素细胞黑色素的合成。miRNA-338-3p在羊驼生长发育过程中,是否参与调控体内皮肤黑色素细胞的黑色素生成尚待进一步研究。 武良琦 范瑞文 曾庆宝 郝晓娟 任玉红关键词:羊驼 黑色素细胞 miR-324-3p通过调控MC1R基因影响黑色素的形成 <正>研究目的哺乳动物黑色素的形成主要受遗传物质(主控基因及调控基因)与环境因素的影响[1],黑素刺激素受体1(Melanocortin-1 receptors,MC1R)基因被视为影响动物黑色素形成的主控基因之一[2]... 曾庆宝 范瑞文 张秋月 郝晓娟 武良琦 任玉红关键词:黑色素细胞 文献传递 不同浓度α-促黑素细胞激素对绵羊黑素细胞增殖和黑素生成的影响 被引量:6 2016年 α-促黑素细胞激素(α-melanocyte-stimulating hormone,α-MSH)与黑皮质素1受体(melanocortin 1 receptor,MC1R)结合,通过c AMP信号通路影响黑色素的生成。然而,不同浓度α-MSH对绵羊黑色素生成的具体影响,还没有定论。本文旨在探讨不同浓度α-MSH对绵羊皮肤黑素细胞增殖和黑素合成的影响。实验组α-MSH(0、0.1、1、10、100、1 000 nmol/L)和空白对照组相比,荧光定量PCR和Western印迹检测出MC1R、小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)和酪氨酸酶(tyrosinase,TYR),在添加10 nmol/Lα-MSH时,基因mRNA水平和蛋白水平的表达量最高,之后则降低;ELISA方法检测出c AMP含量总体增加,c GMP含量总体降低,添加10 nmol/Lα-MSH时,c AMP的产量增加最多,c GMP的产量降低最多;酶标法检测出10 nmol/Lα-MSH时,黑色素生成最多,之后则降低。上述结果证明,不同浓度α-MSH通过调控黑色素形成的c AMP路径,影响MC1R、MITF和TYR的基因和蛋白表达,从而影响黑色素的合成,以添加10 nmol/Lα-MSH时,对黑色素细胞表型和黑色素含量影响最为显著。 郝晓娟 任玉红 范瑞文 张秋月 曾庆宝 武良琦