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稳定表达Caveolin-3基因突变型P104L和P47L的C2C12骨骼肌细胞株的构建被引量：1: 2016年; 目的构建稳定表达Caveolin-3(CAV3)基因突变型P104L和P47L的C2C12骨骼肌细胞株。方法将野生型CAV3(CAV3-WT)、CAV3-P104L、CAV3-P47L装在带有GFP标签的质粒中,构建目的基因与GFP基因融合的表达质粒,以只含GFP的载体为对照。将C2C12细胞随机分为A、B、C、D组,分别转染对照空载体(NC)、CAV3-WT、CAV3-P47L及CAV3-P104L。以遗传霉素(G418)进行阳性克隆筛选,荧光显微镜下挑选稳定转染的细胞系,Western blotting法检测各组细胞中的CAV3-GFP融合蛋白,免疫荧光法检测各组细胞中的CAV3蛋白,以荧光强度代表目的蛋白相对表达量。结果经酶切和测序验证,证实4种表达质粒构建成功。B、C、D组细胞中测得CAV3-GFP融合蛋白,A组未测得融合蛋白。A、B、C、D组CAV3蛋白相对表达量分别为23.0±2.25、32.3±0.35、25.6±0.92、24.3±1.42,B组CAV3蛋白表达增强,与A组相比,P<0.01;A、C、D组CAV3蛋白表达下调,与B组相比,P均<0.01。结论成功构建了稳定表达CAV3-P47L和CAV3-P104L的C2C12细胞,两种细胞中CAV3蛋白表达下调。; 邓玉风黄亿元尚丽娜杨立会黄勤; 关键词：基因突变 2型糖尿病肢带型肌营养不良

Caveolin-3基因在骨骼肌细胞的生理功能及其突变基因致病机制的初步研究: 目的:Caveolin-3(CAV3)蛋白特异性表达在各类肌细胞膜上,但它在肌细胞中的生理功能尚未清楚。骨骼肌消耗全身大多数的葡萄糖为能源物质来维持细胞的正常代谢及功能,位于细胞膜上的CAV3可能促进了与葡萄糖代谢和细胞...; 尚丽娜; 关键词：骨骼肌细胞糖代谢肌营养不良症; 文献传递

心肌病相关变异基因的细胞结构及功能效应被引量：1: 2018年; 心肌相关基因变异会导致细胞结构和功能的异常,通过不同机制引发心肌病。不同种类或同一大类的原发性心肌病,其心肌细胞均可能存在不同的分子和结构异常,如肌小节结构异常、细胞骨架结构异常、离子通道蛋白异常、能量供给和调控异常、粗细肌丝改变、肌小节和桥粒蛋白异常、细胞信号调控异常等。本文就常见心肌病相关变异基因的细胞结构及功能效应综述如下。; 黄先燕刘展鹏唐翠萍尚丽娜陈婷婷黄勤; 关键词：心肌疾病变异基因细胞结构

脂质体介导的C2C12肌细胞瞬时转基因技术被引量：1: 2016年; C2C12细胞是常用于研究的肌细胞,广泛适用于肌肉再生、肌肉疾病、糖脂代谢以及药物研究实验。由于肌细胞结构较特殊,基因转染不容易成功。本文介绍脂质体介导的肌细胞瞬时转基因技术,国内外未见详细报道。我们实验室经优化细胞密度、质粒DNA纯度以及转染最佳时间等条件,并改变底物和稀释液的成份,将细胞分成几组:1底物Opti-MEM+稀释物DMEM组;2底物Opti-MEM+稀释物Opti-MEM组;3底物无血清DMEM+稀释物无血清DMEM组;4底物无血清DMEM+稀释物Opti-MEM组;5底物含10%FBS的DMEM+稀释物DMEM组进行转染。24 h后荧光倒置显微镜观察各组荧光表达情况,48 h Western Blot检测GFP蛋白表达。结果 C2C12细胞瞬时转染的细胞数量和荧光强度达到理想效果。其中第3组GFP蛋白表达水平明显高于第5组(p<0.05)。这是一种方便有效的脂质体介导C2C12细胞转基因技术。; 黄亿元邓玉风尚丽娜杨立会马静黄娟娟黄勤; 关键词：C2C12 脂质体转基因

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尚丽娜