王叶
- 作品数:7 被引量:15H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院植物保护研究所更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 一种定量检测棉花材料群体中MON757转化体含量的方法
- 本发明“一种定量检测棉花材料群体中MON757转化体含量的方法”,属于生物技术领域,包括如下步骤:(1)获取MON757转化体特异性片段序列的曲线方程,(2)获取棉花内标准基因ACP1基因的标准曲线方程,(3)随机选取待...
- 谢家建彭于发杨阳王叶
- 文献传递
- 用于检测转基因棉花中非功能性插入片段的PCR引物、试剂盒及方法
- 本发明提供一种用于检测转基因棉花中非功能性插入片段的PCR引物、试剂盒及方法,属于生物技术领域。所述PCR引物的上下游核苷酸序列分别如Seq ID No.1和Seq ID No.2所示;所述PCR引物扩增的转基因棉花非功...
- 谢家建彭于发王叶
- 文献传递
- 一种定量检测棉花材料群体中MON757转化体含量的方法
- 本发明“一种定量检测棉花材料群体中MON757转化体含量的方法”,属于生物技术领域,包括如下步骤:(1)获取MON757转化体特异性片段序列的曲线方程,(2)获取棉花内标准基因ACP1基因的标准曲线方程,(3)随机选取待...
- 谢家建彭于发杨阳王叶
- 文献传递
- 一种检测棉花材料中转基因抗虫棉MON757转化体状态的定性PCR检测试剂盒及方法
- 本发明“一种检测棉花材料中转基因抗虫棉MON757转化体状态的定性PCR检测试剂盒及方法,属于生物技术领域,试剂盒包括粉剂或溶液状的以下三条引物757‑GF:5‘‑CTAACCTCAATGAGAGCTACC‑3’,757...
- 谢家建彭于发杨阳王叶
- 文献传递
- 转cry1Aa基因抗虫棉整合结构解析及转化体特异性检测方法的建立被引量:8
- 2017年
- 【目的】cry1Aa基因是2011年本实验室在我国棉花商品种子中发现的1种未经批准的转基因成分,本研究旨在通过整合结构解析,建立特异性检测方法,对市售棉种进行初测,明确该外源基因在我国棉种中的存在情况。【方法】通过Genome walking、长链PCR分离获得了转cry1Aa基因棉花转化体(定名为NN6转化体,简称NN6)的外源基因整合结构,同时基于插入位点基因组及外源DNA连接区,建立了NN6转化体特异性的定性聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法和实时荧光定量PCR方法。【结果】NN6整合结构主要包括cry1Aa、aad和Npt II基因,插入棉花基因组7号染色体37 169 450位,产生91 bp基因组缺失;所构建的定性PCR检测方法能特异、快速地对棉花单株和种子单粒中NN6转化体的纯/杂合状态进行鉴定,实时荧光定量PCR检测限为44拷贝,能满足国内外对转基因标识的需要;对含有cry1Aa基因的3个市售棉种进行检测,其纯合度分别为1.51%,5.21%和21.09%。【结论】本研究解析了NN6的整合结构,并建立特异性检测方法,为我国转基因棉花新品种选育及转基因安全管理提供技术手段。
- 王叶谢家建黄春蒙彭于发
- 关键词:转基因棉花定量PCR
- 一种检测棉花材料中转基因抗虫棉MON757转化体状态的定性PCR检测试剂盒及方法
- 本发明“一种检测棉花材料中转基因抗虫棉MON757转化体状态的定性PCR检测试剂盒及方法,属于生物技术领域,试剂盒包括粉剂或溶液状的以下三条引物757?GF:5‘?CTAACCTCAATGAGAGCTACC?3’,757...
- 谢家建彭于发杨阳王叶
- 文献传递