赵慧敏
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 供职机构：复旦大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 结核分枝杆菌肝素结合血凝黏附素的原核表达及其在结核病血清学诊断中的应用被引量：4
- 2016年
- 目的原核表达与纯化结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)肝素结合血凝黏附素(heparin-binding haemagglutinin adhesion,HBHA),并初步评估其在结核病血清学诊断中的价值。方法采用PCR法从M.tb H37Rv基因组中扩增hbha基因,克隆至原核表达载体p ET-28a(+),构建重组表达质粒p ET-28ah,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组HBHA(r HBHA)蛋白经Ni2+亲和层析柱纯化后,Western blot法分析其抗原特异性。收集71例确诊的结核病患者和30名健康体检者血清,采用ELISA法检测血清中的抗HBHA Ig A、Ig G抗体水平,并以ESAT-6、Ag85A作为对照抗原,评估r HBHA在结核病血清学诊断中的价值。结果重组表达质粒p ET-28ah经酶切及测序证实构建正确;表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在,经Ni2+亲和层析柱纯化,可得到高纯度的r HBHA蛋白;纯化的r HBHA蛋白可与小鼠抗His-tag单克隆抗体特异性结合;结核病患者(TB)组血清中抗r HBHA、ESAT-6、Ag85A抗原特异性Ig G水平均显著高于健康对照(HC)组(P<0.05),且TB组的r HBHA抗原特异性Ig A水平也显著高于HC组(P<0.05),而两组间ESAT-6、Ag85A抗原特异性Ig A水平差异无统计学意义(P>0.05);ROC曲线分析显示,r HBHA抗原检测Ig A的诊断效能较好,曲线下面积为0.711,其他两种对照抗原ESAT-6、Ag85A的Ig A诊断效能一般,曲线下面积分别为0.512和0.531。结论 r HBHA抗原用于结核病的诊断效能较好,可作为结核病血清学诊断的备选抗原之一。
- 问寒利李海聪李根赵慧敏施理敏韩伟靖吴康范小勇
- 关键词：结核分枝杆菌免疫学诊断
- 结核分枝杆菌效应T细胞检测在诊断活动性结核病中的价值被引量：4
- 2017年
- 目的分析结核分枝杆菌效应T细胞检测法在诊断活动性结核病中的价值。方法选取2015年1-12月来自上海市公共卫生临床中心、上海市肺科医院和沈阳市胸科医院的708例活动性结核病患者、289例非结核肺部疾病患者和55名健康志愿者作为研究对象。将55名健康志愿者和289例非结核肺部疾病患者作为非活动性结核组。活动性结核组包括68例肺外结核患者和640例肺结核患者，肺结核并发肺外结核者归属为肺结核患者；在肺结核患者中有230例患者痰标本的细菌学检查呈阳性，410例痰标本细菌学检查阴性。分离研究对象外周血单核细胞，应用结核分枝杆菌效应T细胞检测试剂盒进行检测，评价该检测方法的诊断效能。结果结核分枝杆菌效应T细胞检测试剂盒检测活动性结核组的敏感度为81．78％（579／708）；检测非活动性结核组的特异度为79．36％（273／344）；检测健康志愿者的特异度为89．09％（49／55）。在经检测结果为阳性的650例研究对象中，正确检出阳性579例，阳性预测值为89．08％；在所有检查结果为阴性的402例研究对象中，正确检出阴性273例，阴性预测值为67．91％（273／402）；阳性似然比、阴性似然比和正确诊断效率依次为3．96、0．23和80．99％（852／1052）。检测痰检阳性患者的阳性检出率相对更高，为84．78％（195／230）；检测肺结核并发肺外结核患者的阳性检出率为91．49％（43／47）。结论结核分枝杆菌效应T细胞检测试剂盒对于活动性结核病的诊断具有较高的敏感度和特异度，尤其在肺结核并发肺外结核的患者以及痰检阳性的肺结核患者中效果较好，可用于辅助诊断活动性结核病。
- 李根李春玲李海聪赵慧敏李锋胡志东卢水华范小勇吕建新
- 关键词：结核T淋巴细胞酶联免疫斑点检测
