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吴健: 作品数：10 被引量：33H指数：3; 供职机构：扬州大学生物科学与技术学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>

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利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术创建抗菌核病甘蓝型油菜新种质: 基因组编辑技术是指可以在基因组水平上对DNA序列进行定点改造的遗传操作技术,其在基因功能研究和作物遗传改良等方面都具有重大的应用价值。CRISPR(clustered,regularly interspaced,pali...; 吴健王幼平; 关键词：甘蓝型油菜 WRKY 菌核病 CRISPR; 文献传递

甘蓝型油菜和甘蓝CRISPR/Cas9编辑效果的快速检测被引量：2: 2018年; CRISPR/Cas9系统是目前最常用的基因组定点编辑工具,通过瞬时表达试验提前验证Cas9/sgRNA载体诱导的突变效率,可以提高基因组定点编辑的成功率,且显著节省费用及时间。本研究开发了一种利用农杆菌介导的操作简单、适用性好、成本低廉的叶片瞬时表达技术,可用于快速检测甘蓝型油菜和甘蓝中CRISPR/Cas9的编辑效果。针对甘蓝型油菜Bna C. WRKY11. a基因设计了2个靶位点Tgt1(Target 1)和Tgt2(Target 2),并构建了Cas9/sgRNA-Tgt1/2多重突变载体,在甘蓝型油菜叶片中瞬时表达后,2个靶位点都出现突变,突变效率达11. 2%～82. 2%。针对甘蓝Bol PDS3基因设计了1个靶位点Tgt3(Target3),并构建了Cas9/sgRNA-Tgt3敲除载体,在甘蓝叶片瞬时表达后,Tgt3发生了突变,且大部分为碱基缺失突变,缺失的数目为1～18bp不等,同时还存在少量碱基插入以及碱基替换等突变类型。结果表明这种甘蓝型油菜和甘蓝的叶片瞬时表达技术操作简单、适用性好、成本低廉,可用于CRISPR/Cas9的编辑效果快速检测。; 孙勤富刘东晓林俐吴德伟吴健王幼平; 关键词：甘蓝型油菜甘蓝突变检测

油菜与核盘菌互作分子机理研究进展被引量：11: 2018年; 菌核病是由核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary)引起的真菌性病害,每年导致油菜(Brassica napus L.)产量损失10%~20%,是制约我国油菜生产最主要的病害。培育抗(耐)病油菜品种是防治油菜菌核病最为经济有效的途径。本文主要综述了近五年油菜—核盘菌互作分子机制的研究进展。研究表明:(1)在核盘菌侵染寄主的早期存在活体营养型阶段;(2)草酸提供的p H酸性环境,而非草酸本身,是核盘菌的必需致病因子;(3)核盘菌有效利用效应蛋白抑制寄主的抗病反应或者诱导寄主细胞坏死以帮助其侵染;(4)油菜对菌核病的抗性具有中等遗传力,为数量抗性;(5)病原相关分子模式(pathogen-associated molecular pattern,PAMP)引发的免疫反应(PAMP-triggered immunity,PTI)是油菜对核盘菌产生数量抗性的主要根源;(6)功能基因组学研究表明抗(耐)病油菜材料防卫反应更加剧烈,能有效调控细胞内的氧化还原平衡状态,及时清除过量活性氧(reactive oxygen species,ROS)的积累,抑制细胞死亡。核盘菌—油菜互作分子机制的研究将有助于指导油菜抗菌核病育种。; 吴健周永明王幼平; 关键词：油菜菌核病数量抗性防卫反应

WRKY转录因子在植物抗逆反应中的功能研究进展被引量：6: 2020年; 转录因子是一类在生物生命活动过程中发挥重要作用的调控因子,在应对生物与非生物胁迫方面意义非凡。其中,作为高等植物中第七大转录因子家族的WRKY,普遍参与植物的生长发育以及生物和非生物胁迫响应在内的各种生物学过程。因此,对WRKY转录因子进行功能解析一直是植物基因功能研究的热点之一。本研究简要介绍WRKY转录因子的结构特征与分类;重点阐述近年来WRKY转录因子在非生物胁迫(如温度,盐胁迫,氧胁迫,干旱等)和生物胁迫(如病原菌侵染,植食性昆虫取食)响应中的功能研究进展;展望了WRKY转录因子的研究方向和前景。; 吴雨捷吴健王幼平孙勤富; 关键词：WRKY 转录因子生物胁迫非生物胁迫

研究导向型教学理念在细胞遗传学课程中的实践被引量：3: 2019年; 细胞遗传学是遗传学的重要分支学科,在人类健康、植物育种和基础研究等领域都具有巨大的应用前景。本文探讨了如何将以学生为中心的研究导向型教学理念应用于细胞遗传学教学中,最终改变以知识灌输为主导的传统教学模式,培养学生的自主学习能力,取得了更好的教学效果。; 吴健孙勤富王幼平; 关键词：细胞遗传学教学改革

植物细胞工程综合性实验设计与实践——以“大豆子叶节毛状根的诱导与培养”实验项目为例: 2023年; 为了适应国家对学生能力培养要求的变化,扬州大学植物细胞工程课程教学团队设计了以科研课题为依托的植物细胞工程综合性实验教学内容,以增强学生对未来职业生涯的适应性。将科研方法和内容设计为综合性实验,使学生在实验中获得成就感,提高了全体学生的实验参与度与积极性。完成本实验项目后,学生对科研的全景思维得到了极大的提高。; 孙勤富吴健卢盼盼陆盈盈张彪王幼平; 关键词：植物细胞工程教学改革毛状根

甘蓝型油菜抗菌核病的遗传基础及分子机制解析: 油菜菌核病是由核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary)引起的真菌性病害，每年导致油菜产量损失10％-20％，是制约我国油菜生产最主要的病害.培育抗(耐)病油菜品种是防治油菜...; 吴健许美玲林俐王幼平; 关键词：油菜菌核病核盘菌

甘蓝型油菜-白芥渐渗系材料农艺性状和种子品质分析被引量：2: 2020年; 远缘杂交能够有效拓宽物种的遗传背景,产生丰富的遗传变异。前期研究中利用体细胞融合技术获得了甘蓝型油菜扬油6号(Y6)与白芥的属间杂种,将杂种与Y6连续回交和自交得到了一系列稳定遗传的渐渗系株系。本研究以62个渐渗系株系为材料,对这些株系进行14个农艺性状的考察,并通过相关性分析、主成分分析、回归分析和聚类分析等方法,探究甘蓝型油菜单株产量与农艺性状之间的关系及影响单株产量的主要因素。结果显示,甘蓝型油菜-白芥渐渗系株系的农艺性状存在较大差异;单株产量与全株角果数、有效分枝数和每角粒数等性状呈极显著正相关,而与分枝点高度呈极显著负相关。主成分分析的结果表明,4个主成分可以概括14个农艺性状的大部分信息,这些主成分主要与角果数目、株高、角果长度和千粒重等性状指标相关。回归分析结果表明,千粒重、每角粒数、二次有效分枝数、株高和全株角果数对单株产量具有重要影响。综合各项指标,筛选出一些具有优异农艺性状的材料,如L8等株系角果数目明显增多;L3、L7等株系分枝数目明显增多;L42、L49等株系千粒重明显增加;L3、L8等株系单株产量明显提高。利用近红外光谱仪分析渐渗系材料种子品质性状,发现硫代葡萄糖甘、芥酸、亚麻酸等品质性状存在较大变异,可用于选育具有优良品质性状的材料。本研究表明远缘杂交对于甘蓝型油菜种质资源创新、提高油菜产量提供了一条有效途径,研究结果为利用这些种质资源进行育种实践提供了理论依据。; 张盼赵璇耿玉璐郑宇茜蒋金金吴健方玉洁王幼平; 关键词：甘蓝型油菜白芥体细胞杂交农艺性状种子品质

人工合成甘蓝型油菜及其亲本的甲基化变异模式分析被引量：3: 2016年; 甘蓝型油菜作为多倍体起源和发生的历史较短,遗传背景较为狭窄,人工合成甘蓝型油菜可作为植物多倍化研究的优选模型,本文以人工合成的甘蓝型油菜为材料,通过HPLC分析发现白菜型油菜和甘蓝的甲基化率分别为8.33%和15.88%,2个杂种株系的全基因组甲基化水平介于双亲之间,分别为10.29%和12.83%。MSAP分析发现杂种F_1代及其亲本的甲基化水平存在明显差异(白菜型油菜<杂种F_1<甘蓝),杂种F_1代的甲基化变异(23.71%)中来自A、C基因组的变异分别占6.60%和10.16%。MSAP差异性条带的序列分析发现多倍化过程中与甲基化变化相关的基因参与了多种生物学过程,且差异甲基化基因在人工合成甘蓝型油菜及其亲本间的表达差异与甲基化修饰模式是一致的。本研究为了解甘蓝型油菜多倍化过程中发生的表观变异奠定了基础。; 谢涛戎浩蒋金金孔月琴冉丽萍吴健王幼平; 关键词：甘蓝型油菜人工合成种多倍化甲基化

植物MAPK级联在逆境胁迫响应中的作用研究进展被引量：6: 2018年; 植物在生长发育过程中常遭受各种生物及非生物逆境胁迫。在抵御这些外界胁迫的过程中,植物进化出了一套精密、复杂且有效的防御机制。促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)级联途径可以被不同的逆境胁迫激活,在植物抗逆信号转导过程中起到枢纽作用。综述简要介绍了植物的MAPK级联组成及分类;然后重点综述了近年植物MAPK级联在生物胁迫(如病原菌侵染)和非生物胁迫(如温度,干旱,盐胁迫等)响应中的功能研究进展;最后展望了该信号级联在植物抗逆过程中的进一步研究和在抗逆育种中的利用。; 林俐吴健; 关键词：逆境胁迫防卫反应 MAPK 信号转导

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