张俊
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 2i/LIF对维持小鼠胚胎干细胞多能性的研究
- 2016年
- 为了研究小分子化合物对维持小鼠胚胎干细胞(Embryo Stem Cell,ES细胞)体外培养的影响,试验使用2i/LIF培养基,包括基础培养基N2B27(Knockout DMEM/F12+N2+Neurobasal+B27+20%SR)添加1μmol/L PD0325901(FGF-MAPK通路抑制剂)和3μmol/L CHIR99021(GSK通路抑制剂)两个小分子化合物以及10 ng/m L小鼠白血病抑制因子(m LIF),以丝裂霉素C处理过的小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)为饲养层培养小鼠胚胎干细胞,进而探讨该培养基对维持ES细胞多能性的影响,并进行PCR和免疫荧光检测以及体内外分化试验,为应用该培养基到大家畜多能干细胞体外培养奠定基础。结果表明:该培养条件能有效维持ES细胞的多能性。细胞具有典型小鼠胚胎干细胞的形态特征,呈碱性磷酸酶阳性,表达OCT4、KLF4、NANOG、SOX2、REX1、DNMT3B、DAPP4和CDH1多能性干细胞标志基因,表达多能性相关蛋白OCT4、SOX2、NANOG、TRA-1-60、E-cadherin和表面特异性抗原SSEA-1,具有分化成3个胚层的能力。说明已经建立了利用2i/LIF培养基维持多能干细胞体外培养的实验平台。
- 李兰玉张俊朱露露朱秀生石德顺黄奔
- 关键词：小分子化合物多能性体外培养
- BGJ398对猪孤雌胚胎早期发育的影响
- 2016年
- 为了研究FGF信号通路对猪胚胎早期胚层分化的影响,试验采用QRT-PCR方法检测FGF信号通路抑制剂BGJ398处理后猪孤雌囊胚多能性及胚层标志基因SOX2、OCT4、KLF4、CDX2、NANOG和GATA4的表达变化。结果表明:BGJ398促进了多能性和滋养层标志基因的表达,SOX2、OCT4、KLF4和CDX2的相对表达量分别是对照组的4.13,3.25,33.06,2.59倍,但未显著影响原始外胚层标志基因NANOG和内胚层标志基因GATA4的表达。说明BGJ398并未显著影响内外胚层的分化,因此推断FGF信号通路对于猪胚胎早期胚层分化可能并不是必需的。
- 李兰玉张俊李志鹏朱露露朱秀生石德顺黄奔
- 关键词：孤雌胚胎QRT-PCR
