尹娟
- 作品数:15 被引量:34H指数:4
- 供职机构:南京医科大学附属苏州医院更多>>
- 发文基金:南京医科大学科技发展基金江苏省自然科学基金江苏省基础研究计划更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 低强度脉冲式超声波在脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞分化中的抗炎和抗氧化作用被引量:1
- 2023年
- 目的研究低强度脉冲式超声波(LIPUS)对RAW264.7巨噬细胞极化的影响及相关分子机制。方法100 ng/mL脂多糖(LPS)和10 ng/mL白细胞介素(IL)-4诱导巨噬细胞RAW264.7分别向M1和M2型极化,45 mW/cm2强度LIPUS对巨噬细胞处理25 min。采用流式细胞术检测巨噬细胞氧化应激活性氧(ROS)水平、M1分化标志物CD80和CD11b,以及M2分化标志物CD163的表达水平。采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测CD80、CD11b、核转录因子κB(NF-κB)p65、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6的mRNA水平。采用Western blot技术检测细胞p65、p-p65、TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平。采用流式细胞术检测细胞培养上清TNF和IL-6表达水平。结果LIPUS可明显减少LPS诱导的RAW264.7细胞ROS水平。LPS诱导后,RAW264.7细胞M1分化标志物CD80和CD11b表达和转录水平均上调;LIPUS可抑制LPS对RAW264.7细胞向M1的诱导,差异具有统计学意义。并且,LIPUS可促进IL-4诱导的巨噬细胞M2分化标志物CD163表达。LPS诱导的RAW264.7细胞炎症因子NF-κB p65、TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA水平上调,LIPUS可下调这些炎症因子的mRNA水平,差异均具有统计学意义。LIPUS抑制了LPS对RAW264.7细胞因子蛋白p65和p-p65、IL-1β、TNF-α和IL-6蛋白表达上调的作用。胰酶可以通过激活ROS-NF-κB通路,回复LIPUS促进巨噬细胞M1分化的作用。结论LIPUS可通过ROS-NF-κB抑制RAW264.7向巨噬细胞M1型分化,促进RAW264.7向巨噬细胞M2型分化。氧化应激和炎症因子表达水平被抑制。LIPUS可能在牙周疾病中起到抑制氧化和炎症的作用,从而发挥对牙周疾病的治疗功能。
- 尹娟杨兴李平徐旻馨鲍玉张志鹏薛慧
- 关键词:牙周疾病
- 克罗恩病患者粪便具核梭杆菌与钙卫蛋白相关性研究被引量:4
- 2020年
- 背景:具核梭杆菌(Fn)是一种常见的肠道细菌,其可能作为条件致病菌参与了炎症性肠病(IBD)的发生。目前尚缺乏IBD患者肠道Fn的定量数据。目的:建立绝对定量real-time PCR方法,检测克罗恩病(CD)患者的粪便Fn,分析其与CD炎症指标的相关性。方法:收集苏州市立医院57例CD患者和41例健康体检者的粪便样本,提取基因组DNA。构建Fn菌株ATCC 25586特异的nusG(transcription antitermination protein)基因至pUC57质粒,作为标准品,以SYBR Green real-time PCR法检测梯度稀释的标准品质粒,建立绝对定量标准曲线。评价该检测方法的敏感性、特异性和稳定性,并以之检测CD患者和健康对照者的粪便Fn丰度,分析Fn丰度与粪便钙卫蛋白(FC)、C反应蛋白(CRP)和红细胞沉降率(ESR)的相关性。结果:本研究建立的粪便Fn绝对定量real-time PCR方法敏感性高、特异性强、稳定性好。CD患者粪便Fn检出率和丰度均显著高于健康对照者(P=0.034;P=0.039),且Fn丰度与FC水平呈显著正相关(r=0.459,P=0.011)。结论:本研究建立的绝对定量real-time PCR方法可用于人粪便样本Fn丰度检测。苏州地区CD患者粪便Fn检出率和丰度显著升高,Fn丰度与炎症活动度指标FC相关。
- 邢晔陈胡彤徐丽娟张丽平叶玉兰庞智尹娟
- 关键词:CROHN病具核梭杆菌粪便钙卫蛋白实时聚合酶链反应
- 烧伤患者亚胺培南耐药铜绿假单胞菌耐药情况和耐药基因研究被引量:6
- 2018年
- 目的探讨烧伤患者亚胺培南耐药铜绿假单胞菌耐药情况和耐药基因。方法选取2015年2月至2017年2月该院烧伤科收集的31株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌,采用纸片扩散法进行药敏试验,聚合酶链反应(PCR)检测铜绿假单胞菌亚胺培南耐药相关基因及外膜蛋白基因OprD2,琼脂稀释法检测氰氯苯腙对亚胺培南最小抑菌浓度(MIC)的影响。结果亚胺培南耐药铜绿假单胞菌对庆大霉素、头孢哌酮、头孢吡肟、氨曲南耐药率较高,耐药率均大于60.00%;31株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌中,IMP基因阳性6株,阳性率为19.35%;VIM基因阳性3株,阳性率为9.68%;OprD2基因缺失5株,阳性率为16.13%。OXA-10和GES耐药基因未检测到;16.13%的菌株存在主动外排的耐药机制。结论亚胺培南耐药铜绿假单胞菌对大部分抗菌药物耐药率较高,其耐药机制与细菌膜微孔蛋白基因OprD2缺失、细菌产IMP型金属-内酰胺酶及细胞主动外排机制有关;临床上应加强细菌耐药的监测以及抗菌药物的合理应用,减少耐药菌株的产生。
- 眭阳王滢于文王莹超尹娟
- 关键词:铜绿假单胞菌耐亚胺培南
- 低强度脉冲超声对人牙周膜细胞Hippo信号通路的影响
- 2022年
- 目的:观察低强度脉冲超声(low intensity pulsed ultrasound,LIPUS)对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)Hippo信号通路相关基因表达的影响。方法:原代培养hPDLCs,对第3代hPDLCs进行30 mW/cm^(2)、45 mW/cm^(2)、60 mW/cm^(2)3个辐照强度的LIPUS刺激25 min,连续刺激3 d。Western blot及定量聚合酶链反应(Q-PCR)法检测Hippo信号通路成骨相关基因的表达,观察细胞形态变化,筛选最佳的刺激条件。对刺激21 d的细胞进行茜素红染色,与对照组相比分析LIPUS对成骨的影响。结果:本研究通过鉴定成功培养出原代hPDLCs,LIPUS刺激hPDLCs后Hippo信号通路YAP、TAZ及RUNX2基因与蛋白表达增强,磷酸化的TAZ(p-TAZ)及YAP(p-YAP)蛋白表达下调,并且45 mW/cm^(2)与60 mW/cm^(2)成骨效果较30 mW/cm^(2)更加明显。hPDLCs经LIPUS(60 mW/cm^(2))刺激21 d后,钙结节明显较对照组增多。结论:适宜强度的低脉冲超声能够促进hPDLCs Hippo信号通路成骨相关基因的表达,这为优化牙齿正畸环境提供一定的理论基础。
- 李平尹娟徐旻馨薛慧
- 关键词:牙齿正畸人牙周膜细胞
- 苏州地区初发克罗恩病患者粪便真菌菌群结构研究被引量:2
- 2020年
- 背景:克罗恩病(CD)的发病机制目前尚不明确,研究表明肠道微生物在其中起重要作用。目的:研究苏州地区CD患者粪便真菌菌群结构变化及其与疾病间的关联。方法:纳入苏州地区初发CD患者23例和健康对照者18例,采集粪便样本提取基因组DNA,PCR扩增ITS1片段构建克隆文库,HiSeq平台测序,基于OTU行样本物种多样性分析和组间物种差异分析,并进一步分析在CD患者中丰度上调的真菌与炎性指标CRP、ESR、粪便钙卫蛋白和CD活动指数(CDAI)的相关性。结果:CD患者粪便样本中的真菌物种多样性显著小于健康人。从门、纲、目、科、属、种各水平分析,CD患者粪便中丰度显著上调的真菌为酵母纲(Saccharomycetes)、酵母目(Saccharomycetales)、位置未定科(Incertae_sedis)、念珠菌属(Candida)、白念珠菌(Candida albicans),新增真菌为丝孢酵母目(Trichosporonales)、丝孢酵母科(Trichosporonaceae),丰度显著下调的真菌为节担菌纲(Wallemiomycetes),缺失真菌为球囊菌门(Glomeromycota)、球囊菌纲(Glomeromycetes)、球囊霉科(Glomeraceae)、路德酵母属(Lodderomyces)、中间念珠菌(Candida intermedia)、念珠菌(Candida sp)。CD患者粪便白念珠菌丰度与粪便钙卫蛋白呈显著正相关(r=0.557,P=0.031)。结论:CD患者肠道真菌菌群与健康人相比发生显著结构变化,真菌物种多样性减小,条件致病真菌如白念珠菌丰度增加,可能参与了疾病进程。
- 尹娟胡彤徐丽娟张丽平叶玉兰庞智
- 关键词:CROHN病白念珠菌ITS1粪便钙卫蛋白
- 碳青霉烯中介肠杆菌科细菌耐药性及相关基因检测
- 2017年
- 目的分析碳青霉烯类药物敏感性中介肠杆菌科细菌(Carbapenem-intermediate Enterobacteriaceae,CIE)的耐药特性及其携带碳青霉烯酶基因情况。方法收集2015年3月~2017年1月南京医科大学附属苏州医院北区分离的26株CIE,分析菌株对抗菌药物的敏感性,并通过聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)筛选碳青霉烯酶基因KPC、NDM、IMP、VIM和OXA48基因。结果 26株临床分离的CIE菌株中,对氨苄西林、头孢唑林、头孢他啶等药物耐受均达到80%以上,PCR法检测到6株细菌携带碳青霉烯酶基因,包括KPC 4株、NDM 1株、IMP 1株。结论碳青霉烯中介肠杆菌科细菌多重耐药率较高,且检出碳青霉烯酶基因的菌株也占一定比例,需进一步加强临床多重耐药细菌的监测。
- 张霞朱超望王莹超眭阳尹娟
- 关键词:肠杆菌科细菌碳青霉烯酶基因
- mCIM与eCIM在产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌表型筛查中的价值被引量:5
- 2021年
- 目的分析改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)与乙二胺四乙酸碳青霉烯灭活试验(eCIM)对产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌表型筛查的效能及应用价值。方法收集碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)117株(实验组)、碳青霉烯类敏感肠杆菌科细菌50株(对照组)。分别采用改良Hodge试验(MHT)、mCIM和eCIM进行表型筛查,采用聚合酶链反应(PCR)检测常见碳青霉烯耐药基因,统计表型筛查试验结果与基因检测结果的一致性。结果以PCR检测出碳青霉烯酶基因为金标准,MHT筛查碳青霉烯酶的敏感性为87.0%、特异性为100.0%,mCIM筛查碳青霉烯酶的敏感性、特异性均为100.0%,eCIM筛查金属酶的敏感性为82.4%、特异性为100.0%。结论mCIM筛查碳青霉烯酶的敏感性比MHT高,mCIM与eCIM联合检测能更有效地筛查碳青霉烯酶,且可区分碳青霉烯酶类型,从而有效指导临床用药。
- 尹娟王莹超眭阳江春时蕴琦朱超望
- 关键词:碳青霉烯酶改良HODGE试验
- 高通量测序分析冠心病患者外周血LncRNA表达差异被引量:2
- 2018年
- 目的:发现外周血中与冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)相关的未知长链非编码RNA(LncRNA)。方法:选取临床冠心病组及对照组各3例外周血血浆样本进行LncRNA高通量测序表达谱分析,使用cuffdiff软件获得LncRNA表达谱,计算两组样本间的倍数变化和P-value值,筛选差异表达LncRNA。Q-PCR法验证36对冠心病和正常组外周血浆及外周血单核细胞中的基因表达水平。结果:测序结果分析发现差异表达明显的45个上调表达及29个下调表达的LncRNA。Q-PCR法筛选出3个在冠心病患者外周血单核细胞中上调表达明显的LncRNA:uc003pxg.1,ENST00000565257,ENST00000568324。ROC曲线下面积分别为0.812 5,0.742 4,0.742 4。以上基因在冠心病患者中上调表达均差异显著,与测序结果一致。结论:初步从冠心病患者外周血样本中筛选出上调表达的LncRNA,这为后续深入研究奠定基础,为LncRNA用于冠心病临床早期筛查提供理论依据。
- 李平徐桂冬庞智翁嘉懿尹娟孙康云
- 关键词:长链非编码RNA高通量测序外周血单核细胞
- 耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌毒力基因检测及同源性分析被引量:4
- 2019年
- 目的了解临床分离耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa,CR-PA)毒力基因exoU与exoS携带情况、耐药特征及同源性。方法收集2016—2017年临床分离CR-PA 54株,PCR扩增exoU和exoS毒力基因,比较exoS^+exoU^-株和exoS^-exoU^+株间耐药率差异及其分离患者临床特征,随机扩增多态性DNA(RAPD)分析菌株间亲缘关系。结果 54株CR-PA中,exoS和exoU基因阳性株数分别为38株和13株,其中exoS^+exoU^-、exoS^-exoU^+、exoS^+exoU^+和exoS^-exoU^-型分别为37株、12株、1株和4株。exoS^-exoU^+株对庆大霉素和环丙沙星耐药率高于exoS^+exoU^-株(χ~2=7.734,P<0.05;χ~2=4.274,P<0.05)。30株CR-PA可聚类,exoS^+exoU^-型株居多(32.4%),集中分布于ICU和神经内科。结论本院exoS^+exoU^-型CR-PA临床分离率高。与exoS^+exoU^-型相比,exoS^-exoU^+型CR-PA对庆大霉素和环丙沙星的耐药率较高。
- 尹娟王莹超眭阳周莉靖江春朱超望
- 关键词:铜绿假单胞菌碳青霉烯类随机扩增多态性DNA
- 血浆白细胞介素9对生物制剂治疗后炎性肠病患者黏膜愈合的诊断及评估价值被引量:3
- 2023年
- 目的探讨血浆白细胞介素9(IL9)对生物制剂治疗后的炎性肠病(IBD)患者黏膜愈合的诊断及评估价值。方法随访研究。前瞻性选取2019年9月至2022年1月在南京医科大学附属苏州医院(苏州市立医院)就诊的137例IBD患者,分别使用生物制剂英夫利昔单抗(IFX,56例)、阿达木单抗(ADA,20例)、乌司奴单抗(UST,18例)和维得利珠单抗(VDZ,43例)治疗;根据治疗药物不同,分为IFX组、ADA组、UST组和VDZ组。每8周评估1次(包括临床症状、炎症指标、影像学检查等),第54周时行内镜评估黏膜愈合程度。ELISA法检测入组时(W 0)和生物制剂治疗8周(W 8)后血浆IL9的表达量。受试者工作特征(ROC)曲线评估IL9对黏膜愈合的诊断效能。根据约登指数的最高值选择最佳ROC曲线阈值的截止值。Spearman等级相关分析IL9与克罗恩病简化内镜评分(SES⁃CD评分)、梅奥内镜评分(MES评分)间的相关性,以评估W 0和W 8时IL9对生物制剂治疗54周时的IBD患者黏膜愈合的预测价值。结果137例患者中,有97例克罗恩病(CD)患者,男53例,女44例,年龄(31.6±10.3)岁(18~60岁);有40例溃疡性结肠炎(UC)患者,男22例,女18例,年龄(37.5±14.7)岁(18~67岁)。CD患者中,42例患者(43.3%)第54周内镜检查提示黏膜愈合;60例(61.9%)获得临床缓解。UC患者中,22例(55.0%)达到黏膜愈合;30例(75.0%)获得临床缓解。W 0时,黏膜愈合的CD和UC患者的IL9相对表达量均低于未愈合的患者[x±s,分别为(127.42±34.43)比(146.82±45.64)ng/L,(113.01±44.88)比(146.12±48.66)ng/L,均P<0.05]。W 8时,黏膜愈合的CD和UC患者的IL9相对表达量均低于未愈合的患者(均P<0.05)。IFX治疗后黏膜愈合的患者的IL9相对表达量低于未达到黏膜愈合的患者(P<0.05);其他治疗组患者黏膜愈合与未愈合间的差异均无统计学意义(均P>0.05)。W 8时IL9对预测IBD黏膜愈合具有较高的预测价值[CD患者:ROC曲线下面积(AUC)=0.716(95%CI:0.616~0.817,P<0.001),灵敏度和�
- 叶玉兰胡彤徐丽娟张丽平尹娟余强庞智
- 关键词:炎性肠病克罗恩病生物制剂白细胞介素9黏膜愈合