周海燕
- 作品数:6 被引量:7H指数:2
- 供职机构:贵州医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- IGF2BP1基因在制备心肌梗死诊断试剂中的应用
- 本发明提供了IGF2BP1基因在制备心肌梗死诊断试剂中的应用,首先设计出人IGF2BP1基因上下游引物,再制备qRT‑PCR混合反应液,应用实时荧光定量PCR系统扩增,反应结束后确认Real Time PCR的扩增曲线和...
- 周海燕李伟韦波王冰胡柏龙罗振华陈章荣司晓云张彦燕林慕之
- 基于Akt-FoxO1通路研究T1AM在心肌缺血再灌注损伤中抑制细胞代谢和凋亡的作用机制
- 缺血性心脏病是危害人类健康的重要疾病。早期血运重建是目前治疗缺血性心脏病最有效的治疗手段,但是血运重建常伴发心肌缺血/再灌注损伤,后者常导致心肌顿抑、心律失常及细胞死亡,因此深入探讨缺血再灌注损伤的机制对保护心肌有重要的...
- 周海燕
- 关键词:心肌缺血再灌注损伤凋亡
- 文献传递
- FcγRIIB缺失促进顺铂诱导的急性肾损伤小鼠肾组织巨噬细胞浸润
- 2019年
- 目的:探究巨噬细胞表面免疫球蛋白Fc gamma IIB受体(FcγRIIB)缺失对顺铂诱导的急性肾损伤(AKI)小鼠巨噬细胞浸润及肾组织损伤的影响。方法:8~10周龄雄性野生型(WT) C57 BL/6及FcγRIIB基因敲除(FcγRIIB-/-)小鼠随机分成WT对照组(WC),WT AKI模型组(WM),FcγRIIB-/-对照组(FC)和FcγRIIB-/-AKI模型组(FM),两个模型组予20 mg/kg体质量腹腔注射顺铂,两个对照组予等量的生理盐水;造模后3 d取血检测血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)、处死小鼠取肾组织HE染色,免疫组织化学检测观察肾组织巨噬细胞(CD68)浸润情况,ELISA检测组肾组织匀浆单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,流式细胞术检测巨噬细胞CD86(M1)和CD206(M2)亚型,荧光定量聚合酶链反应(q-PCR)测肾组织MCP-1(CCL2)、MCP-1α(CCL3)及MCP-1β(CCL4) mRNA相对表达量。结果:与FC组及WC组比较,WM组及FM组血清BUN和Scr水平升高、HE染色显示肾损伤严重、肾组织MCP-1及TNF-α水平升高、CD68+巨噬细胞浸润增多、CCL2及CCL4 mRNA水平增加,差异均有统计学意义(P <0. 05),且FM组较WM组改变更明显(P <0. 05);流式细胞术结果显示各组小鼠肾组织巨噬细胞亚型差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论:FcγRIIB缺失可能引起肾组织巨噬细胞浸润增多而加重顺铂引起的AKI。
- 金筱茜吴通前马岚袁锐杨丹周玲高健王珺周海燕余芳
- 关键词:巨噬细胞顺铂急性肾损伤
- 大鼠Slfn3基因重组腺病毒载体的构建和包装被引量:1
- 2020年
- 目的:构建携带大鼠Slfn3基因的重组腺病毒表达载体,转染HEK293细胞产生病毒。方法:以p MSV-Slfn3-GFP为模板扩增Slfn3基因,再以质粒p Adeno-EF1a-MCS-MCMV-EGFP-3FLAG为载体,通过酶切、连接及转化获得p Adeno-EF1a-Slfn3-MCMV-EGFP-3FLAG重组腺病毒载体,采用内切酶Nhe I酶切及测序鉴定重组腺病毒载体,将该重组载体在HEK293细胞进行包装和放大培养,镜下观察荧光、Western blot鉴定重组质粒标签Flag蛋白在HEK293细胞中的表达。结果:构建重组腺病毒质粒p Adeno-EF1a-Slfn3-MCMV-EGFP-3FLAG,并在HEK293细胞中成功包装和扩增,经鉴定获得重组腺病毒r AD-Slfn3。结论:成功构建重组腺病毒载体p AdenoEF1-Slfn3-MCMV-EGFP-3FLAG,并在HEK293细胞成功获得重组腺病毒r AD-Slfn3。
- Nganguem Nzalle Yranney Brice毛善永莫丽莉林慕之张蓓周海燕王艺明况春燕刘兴德
- 关键词:心血管疾病重组腺病毒
- 大鼠骨髓源内皮祖细胞的分离与鉴定被引量:3
- 2020年
- 目的:建立大鼠骨髓源内皮祖细胞(EPCs)的分离与鉴定方法。方法:取大鼠双侧股骨和胫骨骨髓腔细胞,采用密度梯度离心法、组织淋巴细胞分离液分离单个核细胞,将细胞过滤离心后置于含20%FBS的DMEM低糖完全培养基中培养;采用流式细胞仪鉴定EPCs细胞表面标志物CD34、CD133及VEGFR2的表达。结果:细胞培养2 d后可观察到梭形的贴壁细胞,培养7 d后细胞呈克隆样集落,流式细胞仪鉴定为EPCs细胞的特征。结论:大鼠骨髓中可提取并分化出质量较好的EPCs细胞。
- Nganguem Nzalle Yranney Brice林慕之毛善永张蓓周海燕胡柏龙王艺明况春燕刘兴德
- 关键词:骨髓细胞内皮祖细胞
- 乳鼠脑小胶质细胞原代培养与鉴定被引量:3
- 2016年
- 目的:探索乳鼠小胶质细胞的原代培养和鉴定方法。方法:取新生SD乳鼠脑组织捣碎、消化及共培养,用振摇法分离纯化小胶质细胞并继续培养;在相差显微镜下观察共培养第3、9及14天时细胞形态,计数纯化培养后小胶质细胞数及存活率,采用免疫细胞化学染色方法在共聚焦显微镜下计数纯化培养后小胶质细胞特异性OX-42抗体表达阳性的细胞数及存活率,同时观察小胶质细胞活化形态;观察纯化培养12、24、48及72 h后小胶质细胞的静止型细胞数和静止率。结果:振摇法共培养第14天时可见胞体折光不均的星形胶质细胞最多,分离时可获得1.2×106个/瓶(75 cm2,250 m L)小胶质细胞,免疫细胞化学染色显示小胶质细胞特异性OX-42表达阳性细胞达95%,存活率>95%;在显微镜下小胶质细胞形态以阿米巴样、长梭形及马鞍形为主;纯化培养72 h后小胶质细胞的静止型细胞数和静止率最高。结论:振摇法分离小胶质细胞纯化培养72 h,可获得最高的静止型小胶质细胞数和静止率。
- 杭航伍国锋王丽琨周海燕
- 关键词:小胶质细胞纯化