李跃进
- 作品数:3 被引量:9H指数:2
- 供职机构:暨南大学附属珠海医院检验科更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国博士后科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 二亚硝基哌嗪上调AGR2促进鼻咽癌细胞转移被引量:4
- 2016年
- 目的:探讨二亚硝基哌嗪(DNP)通过调控AGR2表达参与鼻咽癌转移的分子机制。方法:以具有低转移潜能的鼻咽癌细胞6-10B作为研究材科,应用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测DNP对6-10B细胞的非毒性浓度;分别采用间接免疫荧光法、Western blot和实时荧光定量PCR法检测DNP对6-10B细胞中AGR2蛋白及m RNA表达的影响;采用针对AGR2基因的特异性小干扰RNA(si RNA)沉默6-10B细胞AGR2的表达,并用Transwell小室法检测其对细胞侵袭和迁移能力的影响。结果:MTT法检测DNP对6-10B细胞的非毒性浓度为0-10.0μmol/L;8.0μmol/L DNP处理6-10B细胞后,间接免疫荧光法检测发现AGR2蛋白表达明显上调,且以在细胞质中表达为主;不同浓度的DNP处理6-10B细胞24 h或用8.0μmol/L的DNP处理6-10B细胞不同时间后,Western blot结果发现AGR2蛋白的表达水平增加且呈浓度和时间依赖性(P〈0.05);siRNA-AGR2沉默6-10B细胞屮AGR2基因的表达后,DNP诱导6-10B细胞的侵袭及迁移能力较干扰前明显降低(P〈0.05)。结论:DNP可能通过在转录水平上调AGR2的表达,影响鼻咽癌细胞的侵袭和转移能力。
- 王巍巍唐发清李跃进
- 关键词:鼻咽癌二亚硝基哌嗪肿瘤转移
- CLU基因干扰质粒的构建及其对鼻咽癌细胞生物学功能的影响被引量:1
- 2016年
- 目的构建CLU基因干扰重组质粒及建立CLU基因干扰转染鼻咽癌细胞及动物模型,检测CLU对鼻咽癌细胞生物学功能的影响。方法首先以real-time PCR和Western blot法验证CLU在鼻咽癌细胞系5-8F,6-10B中的表达,以高表达CLU的5-8F细胞作为干扰转染的目标细胞;设计及构建sh RNA表达载体p SR-GFP/Neo-CLU-sh RNA,将其转染至5-8F鼻咽癌细胞系中,通过Transwell小室迁移及侵袭实验来检测对其迁移和侵袭功能的影响。结果与6-10B细胞比较,CLU基因在5-8F中的表达显著上调(P<0.05);干扰鼻咽癌细胞5-8F中的CLU可使细胞迁移和侵袭功能明显减弱(P<0.05),使其体外成瘤能力显著降低(P<0.05)。结论 CLU基因在鼻咽癌细胞系5-8F中明显高表达;p SR-GFP/Neo-CLUsh RNA可成功干扰5-8F中CLU的表达;CLU可抑制5-8F细胞的迁移、侵袭及体内成瘤能力。
- 王巍巍卢金平李跃进
- 关键词:鼻咽癌丛生蛋白肿瘤转移
- 前梯度蛋白2干扰质粒的构建及其对鼻咽癌细胞生物学功能的影响被引量:8
- 2016年
- 目的:构建前梯度蛋白2(AGR2)基因干扰重组质粒及建立AGR2基因沉默的鼻咽癌细胞及动物模型,检测AGR2对鼻咽癌细胞的生物学功能的影响。方法:首先以real-time PCR和Western blot验证AGR2在鼻咽癌细胞系5-8F和6-10B中的表达,以高表达AGR2的5-8F细胞作为干扰转染的目标细胞;设计及构建shRNA表达载体pSR-GFP/Neo-AGR2-shRNA,将其转染至5-8F鼻咽癌细胞系中,通过Transwell小室迁移及侵袭实验来检测其迁移和侵袭功能的变化。结果:与6-10B细胞比较,AGR2在5-8F中的表达显著上调(P<0.05);干扰鼻咽癌细胞5-8F中的AGR2可使细胞迁移和侵袭功能明显减弱(P<0.05),使其体外成瘤能力显著降低(P<0.05)。结论:AGR2在鼻咽癌细胞系5-8F中明显高表达;pSR-GFP/Neo-AGR2-shRNA可成功干扰5-8F中AGR2的表达;AGR2可抑制5-8F细胞的迁移、侵袭及体内成瘤能力。
- 李跃进王巍巍卢金平唐发清
- 关键词:鼻咽癌肿瘤转移