王巍巍
- 作品数：14 被引量：40H指数：4
- 供职机构：暨南大学附属珠海医院检验科更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CLU基因干扰质粒的构建及其对鼻咽癌细胞生物学功能的影响被引量：1
- 2016年
- 目的构建CLU基因干扰重组质粒及建立CLU基因干扰转染鼻咽癌细胞及动物模型,检测CLU对鼻咽癌细胞生物学功能的影响。方法首先以real-time PCR和Western blot法验证CLU在鼻咽癌细胞系5-8F,6-10B中的表达,以高表达CLU的5-8F细胞作为干扰转染的目标细胞;设计及构建sh RNA表达载体p SR-GFP/Neo-CLU-sh RNA,将其转染至5-8F鼻咽癌细胞系中,通过Transwell小室迁移及侵袭实验来检测对其迁移和侵袭功能的影响。结果与6-10B细胞比较,CLU基因在5-8F中的表达显著上调(P<0.05);干扰鼻咽癌细胞5-8F中的CLU可使细胞迁移和侵袭功能明显减弱(P<0.05),使其体外成瘤能力显著降低(P<0.05)。结论 CLU基因在鼻咽癌细胞系5-8F中明显高表达;p SR-GFP/Neo-CLUsh RNA可成功干扰5-8F中CLU的表达;CLU可抑制5-8F细胞的迁移、侵袭及体内成瘤能力。
- 王巍巍卢金平李跃进
- 关键词：鼻咽癌丛生蛋白肿瘤转移
- 黄连素通过抑制磷酸化埃兹蛋白表达阻断鼻咽癌细胞侵袭和转移的机制研究(英文)被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨黄连素(berberine,BBR)抑制鼻咽癌细胞侵袭及移动的分子机制,明确BBR是否通过抑制Ezrin蛋白抑制鼻咽癌侵袭转移。方法:采用细胞增殖实验(MTT)测定BBR非毒性浓度(non-cytotoxicconcentration,NCC),扫描电子显微镜观察BBR在NCC对鼻咽癌细胞5-8F细胞伪足形成的影响,Trans-well实验检测BBR处理后鼻咽癌细胞运动侵袭能力;Western印迹检测BBR对鼻咽癌细胞Ezrin蛋白表达及其磷酸化(phos-Ezrin)的影响;基因转染技术将pcDNA3.1-Ezrin和pcDNA3.1-Ezrin M转染至6-10B细胞,分析BBR对上述细胞运动能力的影响。结果:BBR的NCC为0～40μmol/L;BBR在此浓度范围能有效地抑制细胞伪足形成,抑制鼻咽癌细胞5-8F穿过人工基底膜,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),并具有浓度依赖性和时间依赖性;BBR抑制5-8F细胞phos-Ezrin表达且呈浓度依赖性和时间依赖性,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);BBR对6-10B-pcDNA3.1-Ezrin M侵袭移动抑制作用弱于6-10B-pcDNA3.1-Ezrin。结论:BBR可以通过抑制Ezrin磷酸化表达和细胞伪足形成阻断鼻咽癌细胞的转移。
- 黄大毛王巍巍Feng Zhu王雷陈宇谢春蕾孟菁菁唐发清
- 关键词：黄连素鼻咽癌
- 黄芩素对人皮肤癌细胞A431生长和运动的影响被引量：3
- 2009年
- 目的研究黄芩素(BAI)对人表皮癌细胞A431生长和运动能力的影响。方法选取人表皮癌A431细胞株作为研究材料,运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)分析黄芩素对A431细胞生长的作用,选用BAI细胞无毒性浓度(noncytotoxic concentration,NCC)进行实验;划痕实验测定BAI对A431细胞爬行能力的影响。结果黄芩素使A431细胞增殖能力减弱,爬行能力下降。结论黄芩素在NCC抑制A431细胞运动能力。
- 陈宇王巍巍唐发清
- 关键词：黄芩素NCC
- SH2-B与结肠癌细胞运动和迁移相关性的研究被引量：4
- 2011年
- 目的:分析SH2-B对结肠癌细胞侵袭迁移的影响,探讨结肠癌转移的分子机制。方法:免疫荧光筛选SH2-B低表达结肠癌细胞,用Lipofectamine 2000TM将pcDNA3.1-SH2-B质粒转染至HT-29细胞,细胞划痕实验分析SH2-B对结肠癌细胞HT-29爬行迁移运动的影响,用Boden Chamber分析SH2-B对结肠癌细胞HT-29侵袭运动的影响。结果:HT-29为SH2-B低表达结肠癌系,基因转染后HT-29细胞表达SH2-B显著增高;细胞划痕研究结果表明,SH2-B转染组、空载体转染组和未转染母细胞组迁移细胞数倒置显微镜10个视野分别为867±187、349±121和279±158,SH2-B转染组爬行细胞数显著高于空载体组和未转染细胞组,P均<0.05;Trans-well研究结果显示,转染SH2-B组、空载体转染组和未转染细胞组穿过滤膜细胞数分别为278±107、129±88和112±81,转染SH2-B组透过细胞数显著高于未转染组和空载体转染组,P<0.05。结论:SH2-B可能通过增强结肠癌细胞运动和迁移能力参与结肠癌细胞的侵袭和转移。
- 唐发清李建国陈宇王巍巍吴苑段朝军
- 关键词：结肠肿瘤肿瘤转移衔接蛋白质类蛋白质酪氨酸激酶
- 血浆EB病毒DNA数量与鼻咽癌细胞凋亡的相关性分析被引量：4
- 2011年
- 目的探讨血浆EBV-DNA数量与鼻咽癌细胞凋亡的关系。方法采用巢式荧光定量PCR,检测鼻咽癌患者血清EBV-DNA的拷贝数,TUNEL法检测鼻咽癌组织中癌细胞凋亡情况,分析EBV-DNA拷贝数与凋亡癌细胞的相关性。结果鼻咽癌患者血浆EBV-DNA检出率为96.4%(27/28),中位数为1 800 copies/μl(0～22 100 copies/μl)。28例鼻咽癌活检组织中癌细胞平均凋亡指数为30.0±18.0。EBV-DNA拷贝数与鼻咽癌细胞凋亡呈正相关(γ=0.927,P<0.05)。结论血浆EBV-DNA水平与鼻咽癌细胞凋亡呈正相关,鼻咽癌患者血浆EBV-DNA可能部分来源于凋亡的癌细胞。
- 王巍巍黄大毛王雷谢春蕾唐发清
- 关键词：细胞凋亡鼻咽癌
- 二亚硝基哌嗪上调AGR2促进鼻咽癌细胞转移被引量：4
- 2016年
- 目的：探讨二亚硝基哌嗪（DNP）通过调控AGR2表达参与鼻咽癌转移的分子机制。方法：以具有低转移潜能的鼻咽癌细胞6-10B作为研究材科,应用四甲基噻唑蓝（MTT）法检测DNP对6-10B细胞的非毒性浓度;分别采用间接免疫荧光法、Western blot和实时荧光定量PCR法检测DNP对6-10B细胞中AGR2蛋白及m RNA表达的影响;采用针对AGR2基因的特异性小干扰RNA（si RNA）沉默6-10B细胞AGR2的表达,并用Transwell小室法检测其对细胞侵袭和迁移能力的影响。结果：MTT法检测DNP对6-10B细胞的非毒性浓度为0-10.0μmol/L;8.0μmol/L DNP处理6-10B细胞后,间接免疫荧光法检测发现AGR2蛋白表达明显上调,且以在细胞质中表达为主;不同浓度的DNP处理6-10B细胞24 h或用8.0μmol/L的DNP处理6-10B细胞不同时间后,Western blot结果发现AGR2蛋白的表达水平增加且呈浓度和时间依赖性（P〈0.05）;siRNA-AGR2沉默6-10B细胞屮AGR2基因的表达后,DNP诱导6-10B细胞的侵袭及迁移能力较干扰前明显降低（P〈0.05）。结论：DNP可能通过在转录水平上调AGR2的表达,影响鼻咽癌细胞的侵袭和转移能力。
- 王巍巍唐发清李跃进
- 关键词：鼻咽癌二亚硝基哌嗪肿瘤转移
- 代谢组学及其在疾病诊断中的应用被引量：1
- 2008年
- 代谢组学是研究体内代谢产物以及其在不同疾病状态下的改变,是继蛋白质组学之后的又一新的研究手段。现已广泛地应用于生命科学的各个领域,且取得了重要进展,尤其是在疾病的临床诊断方面显示出了潜在的临床应用价值。现就代谢组学的研究技术以及其在疾病诊断研究中取得的进展作一系统综述。
- 谢春蕾王巍巍唐发清
- 关键词：代谢疾病生物科学
- HSP70在鼻咽癌中的表达及其临床意义被引量：5
- 2008年
- 目的探讨热休克蛋白70(HSP70)在正常鼻咽组织、鼻咽异型增生和鼻咽癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测16例正常鼻咽组织、11例鼻咽异型增生组织和47例鼻咽癌组织HSP70蛋白表达,分析鼻咽癌组织HSP70表达与鼻咽癌组织类型、恶性程度(鼻咽癌的病理分级)相关性。结果HSP70在正常鼻咽组织阳性率为18.8%(3/16)、表达弱(+);鼻咽异型增生组织阳性率为54.6%(6/11)、强度为中等(+～++);鼻咽癌组织阳性表达率分别为70.2%(33/47)、表达强(+++),各组之间比较差异有显著性(P<0.01)。在47例鼻咽癌组织标本中,19例为高分化,阳性率为31.5%(6/19)、强度为中等(+～++)。28例为低分化,阳性率为96.4%(27/28),表达为强阳性(+++)。结论HSP70表达强度以及阳性率与在鼻咽癌癌变进程呈相关,HSP70表达水平与鼻咽癌的类型、恶性程度(鼻咽癌的病理分级)密切相关。
- 华建江黄大毛吴苑王巍巍蒋海鹰曾亮唐发清
- 关键词：HSP70鼻咽癌癌变机理
- Cdk3在结肠癌变过程中的表达及其意义被引量：3
- 2007年
- 目的:研究Cdk3在结肠息肉、结肠腺瘤、结肠癌组织中的表达,探讨Cdk3在结肠癌变过程中的演变规律及其意义.方法:用免疫组织化学和原位杂交的方法检测22例结肠癌组织、22例结肠腺瘤组织、24例结肠息肉组织中Cdk3蛋白和mRNA的表达.结果:Cdk3蛋白和mRNA在结肠息肉、结肠腺瘤、结肠癌组织中的表达呈核.质型,以质为主.图像分析结果显示,结肠癌组织中Cdk3蛋白表达平均光密度值(0.80±0.36)明显高于结肠腺瘤组织(0.48±0.22)和结肠息肉组织(0.25±0.13)(P<0.05),结肠腺瘤组织中Cdk3蛋白表达平均光密度值明显高于结肠息肉组织(P<0.05),结肠癌组织中的阳性细胞数(266.5±40.2)明显高于结肠腺瘤组织(132.0±37.4)和结肠息肉组织(129.3±26.7).结论:Cdk3在结肠癌变过程中表达逐步增强,在结肠癌组织中异常高表达,可能在结肠癌变过程中发挥重要作用.
- 黄大毛王巍巍莫莉冯德元颜亚晖蒋海鹰唐发清
- 关键词：结肠癌免疫组织化学原位杂交
- 前梯度蛋白2干扰质粒的构建及其对鼻咽癌细胞生物学功能的影响被引量：8
- 2016年
- 目的:构建前梯度蛋白2(AGR2)基因干扰重组质粒及建立AGR2基因沉默的鼻咽癌细胞及动物模型,检测AGR2对鼻咽癌细胞的生物学功能的影响。方法:首先以real-time PCR和Western blot验证AGR2在鼻咽癌细胞系5-8F和6-10B中的表达,以高表达AGR2的5-8F细胞作为干扰转染的目标细胞;设计及构建shRNA表达载体pSR-GFP/Neo-AGR2-shRNA,将其转染至5-8F鼻咽癌细胞系中,通过Transwell小室迁移及侵袭实验来检测其迁移和侵袭功能的变化。结果:与6-10B细胞比较,AGR2在5-8F中的表达显著上调(P<0.05);干扰鼻咽癌细胞5-8F中的AGR2可使细胞迁移和侵袭功能明显减弱(P<0.05),使其体外成瘤能力显著降低(P<0.05)。结论:AGR2在鼻咽癌细胞系5-8F中明显高表达;pSR-GFP/Neo-AGR2-shRNA可成功干扰5-8F中AGR2的表达;AGR2可抑制5-8F细胞的迁移、侵袭及体内成瘤能力。
- 李跃进王巍巍卢金平唐发清
- 关键词：鼻咽癌肿瘤转移
