- 毒蕈碱型胆碱受体拮抗剂抑制小细胞肺癌生长及血管生成的体内研究被引量：2
- 2017年
- 目的 :探讨毒蕈碱型胆碱受体3(muscarinic cholinergic receptor 3,M3R)拮抗剂4-二苯乙酰氧基-N-甲基-哌啶甲碘化物(4-diphenylacetoxy-Nmethylpiperidine methiodide,4-DAMP)对裸鼠体内小细胞肺癌生长和血管生成的影响。方法:RT-PCR及蛋白质印迹法检测人小细胞肺癌细胞株SBC3中M3R mRNA及蛋白的表达。建立人小细胞肺癌SBC3细胞的裸鼠移植瘤模型,随机分为4组,分别腹腔注射0.9%氯化钠溶液(对照组)和不同剂量(0.5、1和2 mg/kg)的4-DAMP,每天给药1次,连续15 d。每2 d测量1次肿瘤体积;给药结束后处死裸鼠,测量肿瘤质量并计算抑瘤率。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测各组肿瘤组织中M3R和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA和蛋白的表达水平。免疫组织化学法检测VEGF表达和微血管密度(microvessel density,MVD)。结果:人小细胞肺癌SBC3细胞表达M3R mRNA及其蛋白。成功建立人SBC3细胞的裸鼠移植瘤模型,并用不同剂量(0.5~2 mg/kg)的4-DAMP给药后,发现裸鼠体内移植瘤的体积均比对照组明显减小(P值均<0.05),剥离肿瘤的质量也明显减少(P值均<0.01),0.5、1和2 mg/kg 4-DAMP给药组的抑瘤率分别为15.82%、33.50%和55.06%。0.5~2 mg/kg 4-DAMP给药组肿瘤组织中M3R和VEGF的mRNA及蛋白表达水平均明显下调(P值均<0.05),MVD也明显下调(P值均<0.05)。结论 :M3R拮抗剂4-DAMP可以抑制裸鼠体内小细胞肺癌的生长和新生血管生成。
- 胡彩红张淑香
- 关键词：小细胞肺癌异种移植模型抗肿瘤试验
- M3R拮抗剂对人小细胞肺癌增殖、凋亡及粘附的影响
- 2016年
- 背景与目的研究表明毒蕈碱胆碱受体3(muscarinic receptor 3,M3R)在多种肿瘤的发生、发展中发挥重要的作用。本研究旨在探讨M3R在人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)细胞株SBC3的表达,M3R拮抗剂对细胞增殖、凋亡及粘附的影响。方法体外培养SBC3细胞,RT-PCR和Western blot检测M3R的表达。MTT法及流式细胞法检测M3R拮抗剂(4-diphenylacetoxy-N-methylpiperidine methiodide,4-DAMP)对细胞增殖和凋亡的影响。流式细胞法检测细胞整合素的表达及碘化乙酰胆碱(acetylcholine iodide,Ach)和4-DAMP对整合素表达的影响。纤维结合蛋白(Fn)包被的96孔板用以研究Ach、4-DAMP及整合素抗体对细胞粘附的作用。结果 SBC3细胞表达M3R,4-DAMP浓度依懒性抑制细胞增殖。与对照组比较,10-4 M 4-DAMP能够明显地增加SBC3细胞凋亡。SBC3细胞表达αvβ1和α5β1整合素,10-4 M Ach刺激细胞粘附(P<0.01)的作用几乎被10-5M 4-DAMP、5μg/m L抗-β1抗体或抗-αv和α5抗体完全阻断(P<0.01),但Ach及4-DAMP不影响αv、α5和β1的表达水平。结论 SBC3细胞表达M3R,M3R拮抗剂能抑制细胞的增殖并促进凋亡。其抑制粘附的作用是通过抑制细胞含β1的整合素(αvβ1和α5β1)的功能实现的。
- 吴文婷张淑香胡彩红
- 关键词：细胞粘附
