夏利
- 作品数：14 被引量：16H指数：2
- 供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸡FOXL2基因慢病毒过表达载体的构建和功能研究
- 哺乳动物 FOXL2(forkhead transcription factor gene 2)在卵巢分化和卵巢功能维持上具有重要的作用。FOXL2是鸡卵巢分化的重要候选基因,但目前其功能还不清楚。为了探讨FOXL2在鸡...
- 夏利
- 关键词：性腺分化性别决定过表达
- 文献传递
- 利用微卫星标记分析广西六画山鸡群体遗传结构被引量：2
- 2016年
- 为探讨广西六画山鸡的群体遗传结构,利用微卫星标记技术分析18个微卫星位点的多态信息含量(PIC)、有效等位基因数(Ne)、期望杂合度(He)和观察杂合度(Ho),利用卡方检测群体在18个位点的平衡状态。结果显示,广西六画山鸡群体的平均PIC为0.4945;平均Ne为2.4787个;平均He为0.5537;平均Ho为0.5182。18个微卫星位点有4个位点处于Hardy-weinberg不平衡状态(P>0.05)。说明广西六画山鸡具有较丰富的遗传多样性,具有继续保种价值和开发潜力。
- 邓继贤夏利刘贵贤陈家贵苏家联梁彩梅邓晓恬薛青松杨祝良蒋和生杨秀荣
- 关键词：微卫星标记群体遗传结构保种
- 广西巴马小型猪miR-122慢病毒表达载体的构建及胚胎水平表达
- 2016年
- 本实验的目的在于构建PLV-miR-122慢病毒载体并在293T细胞和猪胚胎细胞中进行验证。以广西巴马小型猪基因组DNA为模板,克隆miR-122前体及部分侧翼序列,利用T4连接酶将其连入PLV-CMV-MCS-EF1载体,构建PLV-miR-122慢病毒载体。在293T细胞中过表达PLV-miR-122,通过胞质注射生产转PLV-miR-122的猪胚胎。双酶切和测序结果证明成功构建了PLV-miR-122重组载体,将重组载体转染293T细胞,经胞质注射后观察到其在猪胚胎早期和囊胚期均有绿色荧光表达。本实验成功构建了猪miR-122慢病毒表达载体,在293T细胞中过表达同时生产出转miR-122的阳性胚胎,为后续研究miR-122的功能奠定基础。
- 司景磊李龙郭晓萍陈秋明夏利申玉建蒋钦杨兰干球梁晶郭亚芬
- 关键词：广西巴马小型猪慢病毒表达载体
- 广西麻鸡FOXL2基因的克隆、序列分析及在高低产蛋量卵巢中的表达
- 2021年
- 为了研究鸡FOXL2基因的结构和功能,本研究克隆了广西麻鸡FOXL2基因编码区序列,分析了其突变位点及与其他物种的同源性和进化距离,以及在高产组和低产组母鸡卵巢组织中的表达水平。结果表明:广西麻鸡FOXL2基因的编码区长度为918 bp,共编码305个氨基酸,存在一处错义突变和两处同义突变。通过物种间的同源性分析显示,广西麻鸡FOXL2基因与原鸡(Gallus gallus)、雉鸡(Phasianus colchicus)、绿头鸭(Anas platyrhynchos)、野鸽(Columba livia)、人(Homo sapiens)、小鼠(Mus musculus)的同源性分别为99.7%、98.8%、95.1%、92.0%、75.7%、75.5%。通过种间进化树分析表明,广西麻鸡与原鸡(Gallus gallus)的亲缘关系最近,与小鼠(Mus musculus)的亲缘关系最远。FOXL2在高低产蛋量鸡卵巢中的表达水平结果显示:FOXL2基因在高产蛋组中的表达量显著高于低产蛋组中的表达量(P<0.05)。该研究结果提示鸡FOXL2的序列相对较保守,对卵巢功能的维持和提高产蛋量具有功能性作用。
- 杜文娅夏利孙甜甜邓继贤杨祝良唐燕飞李淑霞霍献强杨秀荣
- 关键词：产蛋性能FOXL2基因克隆
- 陆川猪与杜洛克猪正反交F1代UCP3基因表达差异研究被引量：5
- 2016年
- 为培育优质猪品系,提高猪肉品质,本试验探索了陆川猪与杜洛克猪正反交F1代及其亲本陆川猪肌内脂肪含量和UCP3基因表达差异。试验分别选取陆川猪、陆川猪与杜洛克猪正反交F1代各8头,采用实时荧光定量RT-PCR方法测定肌肉中UCP3基因mRNA在不同品种猪中的表达量,并测定眼肌面积和肌内脂肪含量,以分析UCP3基因的表达量与脂肪和眼肌面积的相关性。结果显示,3组猪在眼肌面积、肌内脂肪含量和UCP3基因mRNA表达量上均差异显著(P<0.05),且正反交F1代均遗传了杜洛克猪体型大、陆川猪肌内脂肪含量高的优势,UCP3基因的表达量与猪眼肌面积呈极显著负相关,与肌内脂肪含量呈极显著正相关。初步推断UCP3基因可作为影响猪脂肪性状的主效基因。
- 杨芳龙开旭方程夏利郭亚芬兰干球谢炳坤江明生
- 关键词：陆川猪肌内脂肪
- 巴马小型猪TNF-α基因的克隆与相关生物学信息分析被引量：5
- 2016年
- 本研究旨在分析巴马小型猪TNF-α(tumor necrosis factor-alpha)基因的遗传变异情况。实验采用RT-PCR和克隆的方法成功扩增TNF-α基因的编码区序列,同时对TNF-α基因和相应的蛋白序列进行生物信息学分析。结果表明,巴马小型猪TNF-α基因编码区全长为699 bp,编码232个氨基酸;与Gen Bank中已发表的猪TNF-α基因(登录号:NM_214022.1)序列进行比对,未发现核苷酸碱基突变;编码的232个氨基酸分子量为25 253.9,理论等电点为5.44,不存在信号肽,但存在跨膜螺旋结构。经过序列相似性分析,巴马小型猪的TNF-α基因与猪、人、马、牛、家犬、绵羊同源性比较结果表明其具有较强的保守性。巴马小型猪的TNF-α基因与野猪的亲缘关系一致。
- 李龙司景磊吴延军夏利龙开旭郭亚芬兰干球
- 关键词：巴马小型猪TNF-Α基因基因克隆蛋白结构预测同源性
- 过表达FOXL2基因对鸡胚性腺分化的影响
- 2020年
- 试验旨在研究FOXL2基因对鸡胚性腺分化的影响。本试验分为试验1组、试验2组和空白对照组(鸡胚数量分别为260、100、20枚),试验组通过胚盘下腔注射的方法分别将pLV-FOXL2慢病毒重组质粒、pLV空质粒注入胚胎期第2天的鸡胚,空白对照组不做处理并与试验组一起孵化至出雏,利用CHD1基因遗传性别鉴定的方法对出雏的雏鸡进行性别检测,分析其性腺解剖学、组织学结构变化,并利用免疫组化的方法检测性腺FOXL2和CYP19A1蛋白表达量。结果显示,试验1组遗传性别为公的23只,遗传性别为母的18只,表型性别为公的21只,表型性别为母的18只,其中有2只表型性别不典型,左侧性腺发生变化,朝卵巢结构转变;试验2组遗传性别为公的9只,遗传性别为母的12只,表型性别与遗传性别一致。阳性PCR检测结果显示,试验1组获得阳性个体10个,阳性率为24.4%(10/41);试验2组获得阳性个体8个,阳性率为38.1%(8/21)。性腺解剖学结果显示,阳性pLV-FOXL2雄性鸡胚左侧性腺体积明显大于右侧性腺,表现膨松状态;组织切片结果显示,雄性鸡胚性腺具有典型的卵巢皮质层和髓质层结构;阳性pLV-FOXL2雌性鸡胚性腺的发育无明显变化。免疫组化结果显示,FOXL2和CYP19A1蛋白在试验1组左右侧睾丸中的表达量与空白对照组母鸡卵巢中的表达量相似,显著高于试验2组(P<0.05)。以上结果表明,FOXL2基因可能促进鸡雄性性腺的性反转,在鸡性腺分化和发育过程中发挥着重要的作用。
- 徐文文夏利孙甜甜邓继贤杨祝良杨秀荣
- 关键词：鸡胚性腺分化
- 鸡FOXL2慢病毒载体的构建及鉴定
- 2016年
- FOXL2是影响鸡卵巢发育的重要候选基因。为了研究FOXL2基因的功能,研究构建了鸡FOXL2基因真核表达载体并在细胞水平进行初步验证。利用RT-PCR的方法扩增并克隆FOXL2基因,再将FOXL2亚克隆到慢病毒表达载体p LV-CMV-mcs-3xflag-EF1-GFP(简写为p LV),通过脂质体转染p LV-FOXL2转至DF-1细胞,36 h后荧光显微镜下观察细胞是否表达绿色荧光蛋白。结果显示,成功构建了鸡FOXL2基因过表达载体p LV-FOXL2,在荧光显微镜下可观察到DF-1细胞有绿色荧光蛋白的表达。研究结果为进一步研究FOXL2基因在鸡卵巢发育过程中的功能奠定基础。
- 夏利杨祝良邓继贤蒋和生郭亚芬杨秀荣
- 关键词：卵巢发育FOXL2过表达
- 广西巴马小型猪ANK1基因启动子克隆及其活性分析被引量：1
- 2017年
- 【目的】克隆广西巴马小型猪ANK1基因启动子,确定其活性核心区,为研究ANK1基因启动子与肉质性状的相关性及构建动物疾病模型打下基础。【方法】通过在线软件对ANK1基因启动子的转录因子结合位点进行预测,根据转录因子结合位点设计特异引物扩增不同长度的ANK1基因启动子片段,并利用双荧光素酶试剂盒检测其荧光值,以确定不同ANK1基因启动子片段的活性。【结果】发现ANK1基因启动子存在1个转录起始位点(TSS)、2个Cp G岛和多个转录因子结合位点,并以此作为ANK1基因启动子的分段依据,将其分割为P638、P791、P1113、P1163、P1648、P1694、P1796和P2074等8个不同长度的目的片段。成功克隆获得的8个ANK1基因启动子片段经KpnⅠ和HindⅢ双酶切、T4真核表达载体连接、细胞转染等方法构建8个双荧光素酶重组报告基因,双荧光素酶试剂盒检测结果显示,广西巴马小型猪ANK1基因启动子在P1796片段活性最强,与其他片段存在显著差异(P<0.05)。【结论】成功克隆获得广西巴马小型猪ANK1基因启动子的8个片段,且利用双荧光素酶试剂盒检测确定其核心启动子区域出现在P1796片段。
- 李龙司景磊夏攀洁綦文晶龙开旭夏利何剑雄吴敏兰干球
- 关键词：广西巴马小型猪启动子活性分析
- 广西南丹瑶鸡PGC-1α基因646位点多态性分析被引量：2
- 2018年
- 广西南丹瑶鸡是广西优良的地方品种，其特点是皮脂薄且肉质好，但其形成的分子机制不清楚。过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α（peroxisome proliferator-activated receptor-γ coactivator-1, PGC-1α）是影响脂肪沉积的重要候选基因。本研究以广西麻鸡作为对照，利用PCR-RFLP技术分析了广西南丹瑶鸡PGC-1α基因646位点的多态性。结果显示，广西南丹瑶鸡和广西麻鸡PGC-1α基因646位点都存在A和G两个等位基因，A等位基因频率在广西南丹瑶鸡和广西麻鸡分别为0．35和0．23。AA、AG和GG3种基因型频率在广西南丹瑶鸡中分别为0．05、0．60和0．35，在广西麻鸡分别为0．07、0．33和0．6。本研究的结果提示A等位基因可能有助于减少广西南丹瑶鸡皮下脂肪的沉积。
- 邓继贤蒋世强陈秋明杨祝良夏利黎卓炎蒋和生杨秀荣
- 关键词：南丹瑶鸡脂肪沉积
