曹莹莹
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中国科学院南海海洋研究所更多>>
- 发文基金：中国科学院重点部署项目中国科学院战略性先导科技专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 南海深海新颖低温脂肪酶的克隆、表达及酶学性质鉴定被引量：2
- 2016年
- 从南海深海放线菌Pseudonocardia antitumoralis SCSIO 01299中克隆一个脂肪酶基因lipase B5。lipase B5基因片段大小为972bp,编码的蛋白质具有323个氨基酸残基并与Pseudonocardia sp.HH130629-09中假定脂肪酶有98%的同源性。以p ET28a（＋）为载体,将重组质粒转化到E.coli BL21（DE3）中,实现lipase B5高效表达,并利用Ni-NTA亲和层析纯化lipase B5。Lipase B5最适反应底物为对硝基苯酚癸酸酯（p-NPD）,最适温度为30℃,最适反应p H为7.5。Lipase B5催化p-NPD水解反应的活性达到140.14U/mg,Vmax和Km分别为109.8μmol/min、0.976mmol/L,催化橄榄油的活力为32.019 7U/mg。Lipase B5在p H7.5~8.5保持良好的p H稳定性;在10～20℃低温下保持较高的酶活力,在10~40℃内具有温度稳定性。Lipase B5对大部分金属离子有很好的耐受性,低浓度的Li^＋、Mg^2＋对该酶活性有促进作用。Lipase B5对高浓度的Na Cl有很好的耐受性,在100mmol/L的Na Cl存在下,酶活性大约保持在103%。Lipase B5对多种短链醇类有机溶剂和表面活性剂有很好的耐受性,Triton X-100、Tween-80和Tween-20对lipase B5酶有激活作用。
- 曹莹莹邓盾张云孙爱君夏方亮胡云峰
- 关键词：有机溶剂耐受性
- 一种脂肪酶LIPASE7及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种脂肪酶LIPASE7及其编码基因和应用。本发明从海洋放线菌(Pseudonocardia antitumoralis)SCSIO 01299中克隆得到一个新的脂肪酶基因——脂肪酶基因lipase7，其核苷...
- 胡云峰曹莹莹邓盾孙爱君张云
- 文献传递
- 一种脂肪酶LIPASE7及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种脂肪酶LIPASE7及其编码基因和应用。本发明从海洋放线菌(Pseudonocardia？antitumoralis)SCSIO？01299中克隆得到一个新的脂肪酶基因——脂肪酶基因lipase7，其核苷...
- 胡云峰曹莹莹邓盾孙爱君张云
- 文献传递
- 一种脂肪酶LIPASEB5及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种脂肪酶LIPASEB5及其编码基因和应用。本发明从海洋放线菌(Pseudonocardia？antitumoralis)SCSIO？01299中克隆得到脂肪酶基因lipaseB5，长度为882bp其编码的...
- 胡云峰曹莹莹邓盾孙爱君张云
- 文献传递
- 南海深海微生物酯酶EST12-7在制备(R)-2-氯丙酸乙酯中的应用研究被引量：3
- 2016年
- 利用来源南海深海的微生物酯酶EST12-7不对称水解反应拆分制备(R)-2-氯丙酸乙酯。并探寻了温度、pH、底物浓度、有机溶剂和反应时间等因素对酯酶EST12-7催化制备(R)-2-氯丙酸乙酯的影响。结果表明,深海微生物酯酶EST12-7催化制备(R)-2-氯丙酸乙酯的最佳反应条件为:13.8μg/ml酯酶EST12-7,50 mmol/L(±)-2-氯丙酸乙酯,2%正癸醇,pH8.5,30℃,0.05mol/L Tris-HCl,反应60 min。在最佳反应条件下,(±)-2-氯丙酸乙酯的转化率可达49%,所制备的(R)-2-氯丙酸乙酯的光学纯度为98%。通过对酯酶EST12-7拆分制备(R)-2-氯丙酸甲酯和(R)-2-氯丙酸乙酯进行比较,2-氯丙酸酯中的链长对酯酶EST12-7拆分反应有极大的影响。
- 曹莹莹邓盾夏方亮孙爱君张云胡云峰
- 关键词：深海微生物酯酶
