陈茜
- 作品数:9 被引量:9H指数:2
- 供职机构:重庆医科大学更多>>
- 发文基金:重庆市自然科学基金重庆市科委基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学哲学宗教农业科学更多>>
- 微RNA-194参与结直肠癌细胞上皮-间质转化及迁移和侵袭的作用机制探讨被引量:2
- 2016年
- 目的 :观察微RNA-194(micro RNA-194,mi R-194)在结直肠癌细胞侵袭和迁移过程中的作用,并探讨其参与细胞上皮-间质转化的作用机制。方法 :将携带mi R-194基因的质粒载体转染结直肠癌SW480细胞,构建稳定高表达mi R-194的细胞系mi R-194-480,并观察该细胞的形态学变化。采用MTT法、细胞划痕愈合实验和Transwell迁移及侵袭实验分别观察mi R-194-480细胞的增殖、迁移和侵袭能力;同时,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测mi R-194高表达对上皮-间质转化相关分子表达水平的影响。结果 :高表达mi R-194的结直肠癌mi R-194-480细胞系构建成功,细胞由之前的扁圆形转变为梭形,发生明显的间质性改变。mi R-194质粒转染后,mi R-194-480细胞的增殖能力并未见明显变化(P>0.05),但细胞迁移和侵袭能力却明显增强(P值均<0.001)。mi R-194高表达能够上调基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和波形蛋白(vimentin)的表达水平(P<0.05,P<0.001),而E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达明显下调(P<0.01)。结论 :mi R-194通过调节MMP-2、E-cadherin和vimentin的表达,参与结直肠癌细胞的上皮-间质转化,从而明显提高结直肠癌细胞的迁移和侵袭能力。
- 蔡洪科陈茜王继见邓甬川
- 关键词:结直肠肿瘤微RNAS肿瘤浸润上皮-间质转化
- 下调MDA-MB-231乳腺癌细胞骨硬化蛋白(SOST)可增加间接共培养的MG-63成骨细胞的成骨作用被引量:2
- 2016年
- 目的构建靶向抑制骨硬化蛋白(SOST)基因的小干扰RNA(siRNA)腺病毒,感染MDA-MB-231乳腺癌细胞并与MG-63成骨细胞共培养,检测对成骨相关分子表达的影响。方法针对SOST基因RNA序列设计带3个干扰片段的2对引物,以p B2B为模板,扩增"背靠背"排列的H1和U6启动子。两个PCR产物以Gibson DNA Assembly的方式同时连接腺病毒穿梭质粒p Ad Trace-OK,经同源重组、HEK293细胞包装获得SOST-siRNA腺病毒。感染MDA-MB-231乳腺癌细胞,实时定量PCR检测SOST mRNA的表达水平,ELISA检测SOST蛋白水平。将转染该腺病毒的MDA-MB-231细胞与MG-63成骨细胞间接共培养,实时定量PCR检测护骨因子(OPG)、骨钙蛋白(OCN)、整合素结合涎蛋白(IBSP)、核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)的表达情况。结果成功获得带3个干扰片段的腺病毒穿梭质粒,经同源重组和包装后,获得AdR-si SOST腺病毒。用该病毒感染MDA-MB-231细胞后,明显抑制SOST的表达。在乳腺癌骨转移体外模型中感染Ad-si SOST腺病毒,能导致MG-63细胞的OPG、OCN、IBSP mRNA表达上升,RANKL mRNA降低。结论在乳腺癌骨转移体外模型中感染Ad-si SOST腺病毒,能促进MG-63细胞的成骨分化,提高OPG/RANKL的比例。
- 程俊雄郭丹陈茜王婷黄佳祎
- 关键词:SOSTSIRNA腺病毒骨转移
- 高糖损害小鼠胚胎成骨前体细胞糖代谢并通过原纤毛/Hedgehog信号通路抑制成骨分化的研究被引量:1
- 2021年
- 目的研究高糖对小鼠胚胎成骨前体细胞(MC3T3-E1)增殖、成骨分化和糖代谢影响。方法 MC3T3-E1细胞予5.6 mmol/L(Con组)、25.0 mmol/L(HG组)葡萄糖浓度的α-MEM培养。CCK-8、Ki67免疫荧光检测细胞增殖,免疫荧光检测原纤毛;ELISA检测碱性磷酸酶(ALP)活力;Western blot检测ALP、骨桥蛋白(OPN)、乙酰化α-tubulin(Ac-α-tubulin)、γ-tubulin、印度/音/沙漠刺猬信号分子(IHH,SHH,DHH)、神经胶质瘤相关癌基因(Gli1/Gli2)、糖原合酶1(GYS1)、GluT4、磷酸果糖激酶(PFKM)、乙酰-CoA羧化酶α(ACACA)、糖原磷酸化酶(PYGL)、丙酮酸脱氢酶磷酸酶1(PDP1)蛋白表达;茜素红染色检测矿化结节。结果与Con组比较,HG组Ki67阳性率升高[(13.85±2.28)%vs(30.23±3.83)%,P<0.01],矿化结节形成受抑制(P<0.01),ALP酶活力降低(P<0.01),ALP、OPN、Gli2、IHH、SHH、GYS1、ACACA、PFKM、GluT4、Ac-α-tubulin、γ-tubulin蛋白表达减低(P<0.05或P<0.01),PYGL、PDP1表达升高(P<0.05或P<0.01),原纤毛Ac-α-tubulin和γ-tubulin平均荧光强度降低(P<0.05或P<0.01)。结论高糖促进MC3T3-E1细胞增殖,损害糖代谢机制,破坏原纤毛,阻断Hedgehog信号,抑制成骨分化和矿化。
- 刘杰许洁陈茜汪长东
- 关键词:高糖成骨分化糖代谢
- 基于GAMLSS构建父母身高修正的儿童身高生长曲线研究
- 目的: 本研究希望制定出依据不同父母身高群体的儿童的年龄别身高百分位曲线,使用动态、个体化的生长标准曲线图,用于评估和监测不同遗传因素条件下,儿童生长发育的状况。使具有相同遗传因素的儿童,拥有专门化的生长标准,这样得到...
- 陈茜
- 文献传递
- 慢性束缚抑郁模型小鼠的内嗅皮层神经递质功能紊乱的初步研究
- 研究背景: 抑郁症(Major depressive disorder, MDD)是一种具有高发病率和死亡率的重大精神疾病,严重危害了人类的身心健康,给社会带来了沉重的经济负担。尽管有数亿人患有重度抑郁症,表现为持续性...
- 陈茜
- 关键词:抑郁症内嗅皮层
- 文献传递
- 外源性HBx在昆明小鼠体内促进肝前体细胞上皮间质转化被引量:2
- 2017年
- 目的构建靶向作用于小鼠肝前体细胞的动物模型,研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对肝前体细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法每周2次给予昆明小鼠2 m L/L四氯化碳灌胃,4周后行经门静脉注射稳定表达HBx的肝前体细胞和稳定表达空载体的肝前体细胞同时切除部分肝脏。术后继续每周2次进行灌胃,并分别于术后3、5、7、14、21、28 d,处死小鼠取肝脏标本;实时定量PCR检测小鼠肝组织HBx的mRNA水平、免疫组织化学染色检测肝组织中外源性细胞的存活。实时荧光定量PCR检测上皮钙黏素(E-cadherin)、神经钙黏素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和细胞角蛋白18(CK18)mRNA水平,Western blot法检测E-cadherin、N-cadherin、vimentin、CK18蛋白水平。结果免疫组织化学染色结果显示,术后肝脏组织明显有外源性细胞存活.随注射时间延长,肝组织HBx的含量增加,表达区域增大;实时荧光定量PCR和Western blot结果均显示过表达HBx能够使小鼠肝组织中E-cadherin、CK18水平降低,而N-cadherin、vimentin的水平增加。结论动物模型证实HBx在肝前体细胞EMT过程中起着重要的调控作用。
- 陈茜王婷程俊雄黄佳祎
- 关键词:HBX蛋白肝前体细胞
- 乙型肝炎病毒X蛋白诱导肝前体细胞上皮-间质转化的体内研究
- 目的: 通过筛选稳定表达HBx(hepatitis B virus,HBV)基因的肝前体细胞株,进一步构建靶向作用于小鼠肝前体细胞的动物模型。体内研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对肝前体细胞上皮间质转化(Epithel...
- 陈茜
- 关键词:乙型肝炎X蛋白肝前体细胞绿色荧光蛋白
- 文献传递
- 细胞原纤毛与人类疾病被引量:1
- 2021年
- 细胞原纤毛定位于绝大多数哺乳动物细胞表面,属于非常保守的细胞器,调节细胞增殖、分化、迁移、极性、信号级联等生命活动来调控细胞生命进程和维持细胞稳态。原纤毛结构蛋白或附属蛋白编码基因突变所导致的疾病统称为"纤毛类疾病",发生在胚胎期、婴儿期甚至成人期。纤毛类疾病不仅累及单一器官,也涉及多器官多系统,表现出多变表型和重叠表型。本文主要综述原纤毛相关基因突变对骨骼、牙齿、皮肤、肝胆、肾脏、大脑、视网膜、心脏等器官的影响,揭示其致病机制,并对当前一些纤毛类疾病新型治疗方法进行探讨。
- 刘杰许洁陈茜汪长东
- 关键词:器官
- 原纤毛蛋白CCSAP在胃癌抑制成骨分化中的机制研究
- 胃癌通过转移和扩散导致多种继发性疾病的发生,而骨组织则是胃癌转移的常见部位之一。骨形成的动态平衡是由成骨细胞和破骨细胞共同维持的,一旦成骨细胞或破骨细胞功能异常,骨稳态失衡,便会引发多种骨骼疾病。原纤毛(Primary ...
- 陈茜
- 关键词:胃癌成骨分化