余秀英
- 作品数:4 被引量:1H指数:1
- 供职机构:重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- PLTP在香烟诱导HBECs合成IL-8中的作用
- 2016年
- 目的:研究磷脂转运蛋白(PLTP)对香烟诱导人支气管上皮细胞(HBECs)合成白介素8(IL-8)的影响。方法:Wistar大鼠连续3 d被动吸烟,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),苏木精-伊红(HE)染色,免疫组织化学法(IHC)检测蛋白表达;体外培养HBECs,不同浓度烟草提取物(CSE)刺激;PLTP siRNA干扰后,进行CSE刺激。MTT法检测细胞增殖,同时检测IL-8含量及PLTP表达。结果:烟熏组BALF白细胞计数以及分类计数较对照组均明显升高(P<0.01),IHC显示烟熏组PLTP和IL-8蛋白表达高于对照组;高浓度CSE(2%、4%)抑制HBECs增殖(P<0.001);不同浓度的CSE作用24 h后,IL-8mRNA及蛋白表达量增加,而PLTP蛋白表达量下降,并且IL-8蛋白分泌呈现时间依赖性;PLTP siRNA处理后,IL-8表达量明显升高(P<0.001)。结论:PLTP基因缺失促进香烟诱导HBECs合成IL-8。
- 余秀英黎友伦巫凤苹陈亚娟
- 关键词:人支气管上皮细胞白介素8
- 磷脂转运蛋白在烟草诱导RLE-6TN细胞株发生上皮间质转化中的作用
- 2016年
- 目的探讨磷脂转运蛋白(PLTP)在烟草提取物(CSE)诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞株RLE-6TN发生上皮间质转化(EMT)中的作用。方法体外培养RLE-6TN细胞株24h,分为4组,每组3孔,分别加入0%、0,25%、0.5%和1%CSE培养2d,检测E-钙黏蛋白和波形蛋白mRNA表达以及细胞和CSE共培养3d检测PLTP、EMT相关蛋白(E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白)的表达量。将siRNA.PLTP转染入RLE-6TN中,Westernblot法检测CSE对转染后PLTP和EMT相关蛋白的影响。结果不同浓度的CSE作用后,E-钙黏蛋白mRNA分别为1.01±0.05、0.74±0.05、0.65±0.03、0.30±0.08,呈浓度依赖下降;波形蛋白mRNA在1%CSE组(1.88±0.49)表达与对照组(1.01±0.20)相比增加。PLTP蛋白含量分别为0.42±0.02、0.89±0.25、1.08±0.18、1.61±0.06;E-钙黏蛋白蛋白含量分别为1.61±0.04、1.08±0.10、0.63±0.08、0.68±0.17;N-钙黏蛋白蛋白含量分别为0.60±0.15、0.57±0.26、0.88±0.30、1.94±0.54;波形蛋白蛋白含量分别为0.61±0.05、0.98±0.16、1.07±0.14、1.34±0。19。1%组与对照组比较差异有统计学意义(均P〈0.05)。siRNA.PLTP和CSE处理细胞后,E-钙黏蛋白蛋白表达量较对照组明显增加(P〈0.05),N-钙黏蛋白和波形蛋白蛋白表达量较对照组明显降低(P〈0.05),siRNA—PLTP可部分逆转CSE诱导RLE-6TN细胞发生上皮间质转化。结论PLTP能促进烟草诱导RLE-6TN发生上皮间质转化。
- 巫凤苹陈亚娟余秀英廖科李丹丹陈虹
- 关键词:上皮间质转化
- 烟草烟雾通过TGF-β1/Smad2通路诱导RLE-6TN发生上皮间质转化被引量:1
- 2016年
- 目的:探讨烟草烟雾提取物(Cigarette smoke extract,CSE)在诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞RLE-6TN发生上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用及机制。方法:以不同浓度(0.25%,0.5%及1%)CSE刺激RLE-6TN细胞株;TGF-β1受体抑制子(SB431542)预处理后,加入1%CSE共培养。实时定量PCR(RT-PCR)检测E-cadherin和Vimentin RNA表达;印迹法(Western blot)检测TGF-β1、Smad2、磷酸化的Smad2(p-Smad2)、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达量。结果:经不同浓度的CSE作用,E-cadherin无论是在RNA还是在蛋白水平表达均下调,而Vimentin表达均上调;同时,TGF-β1、p-Smad2和N-cadherin蛋白表达量增加;TGF-β1受体抑制子(SB431542)干预后,p-Smad2表达量明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达量较对照组明显增加(P<0.05),N-cadherin和Vimentin蛋白表达量较对照组明显降低(P<0.05)。结论:CSE可能通过激活TGF-β1/Smad2信号通路,参与调节E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达,从而诱导RLE-6TN发生EMT。
- 巫凤苹陈虹余秀英廖科张慧张露陈亚娟
- 关键词:上皮间质转化TGF-Β1
- PLTP在香烟诱导A549细胞合成白介素8中的作用被引量:1
- 2016年
- 目的:研究磷脂转运蛋白(Phospholipid transfer protein,PLTP)对香烟诱导人肺泡上皮A549细胞合成白介素8(Interleukin-8,IL-8)的影响。方法:体外培养人肺泡上皮A549细胞株24 h,加入不同浓度的烟草提取物(Cigarette smoking extracts,CSE)共培养24 h;1.0%CSE与A549细胞株共培养6、12、24、48 h;PLTP siRNA预处理后,加入CSE共培养24 h。3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测A549细胞增殖情况;实时定量PCR(RT-PCR)检测PLTP和IL-8 mRNA的表达量;蛋白质印迹法(Western blot)检测PLTP的表达量;酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测IL-8相对含量。结果:0.125%烟草提取物促进A549细胞增殖,0.25%、0.5%、1.0%CSE浓度对A549细胞生长无明显影响,而2.0%、4.0%CSE浓度抑制A549细胞增殖;不同浓度的(0.25%、0.5%、1.0%)CSE作用24 h后,PLTP和IL-8 mRNA及蛋白表达量增加,并且IL-8蛋白分泌呈现一定时间依赖性;PLTP siRNA处理后,IL-8表达量明显升高(P<0.001)。结论:PLTP基因缺失促进香烟诱导A549细胞合成IL-8。
- 余秀英陈亚娟巫凤苹邹琳琳陈雨晗黎友伦
- 关键词:A549IL-8