龚艺
- 作品数：3 被引量：8H指数：1
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 蛋白结合硫酸吲哚酚对单核细胞趋化功能的影响被引量：1
- 2016年
- 目的研究蛋白结合硫酸吲哚酚(indoxyl sulfate,IS)对单核细胞趋化功能的影响及其可能机制。方法以4%人血白蛋白(human serum albumin,HSA)结合游离的IS制备蛋白结合IS,高效液相色谱法(HPLC)检测其蛋白结合率。CCK-8法检测人单核细胞(THP-1)经不同浓度的游离IS和蛋白结合IS分别作用24 h后细胞增殖能力的变化。200μmol/L游离IS和蛋白结合IS分别孵育THP-1细胞24 h后,Transwell小室法检测THP-1细胞趋化能力;ELISA法检测细胞培养上清中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)浓度;流式细胞术检测THP-1细胞上CC类趋化因子受体2(CCR2)的表达水平。结果成功制备蛋白结合IS,其蛋白结合率约为90%;蛋白结合IS和游离IS均可抑制THP-1细胞增殖,且蛋白结合IS对THP-1细胞的增殖抑制作用具有浓度依赖性(P<0.05);蛋白结合IS和游离IS均可增强THP-1细胞的趋化活性(P<0.05);蛋白结合IS和游离IS均可使THP-1细胞的MCP-1和CCR2表达上调(P<0.05)。结论蛋白结合IS同游离IS一样,可通过上调MCP-1及CCR2的表达增强单核细胞的趋化功能。
- 施正敏周宝尚陈雨龚艺袁发焕
- 关键词：单核细胞
- miR-200a对肾小管上皮细胞转分化的调控作用被引量：1
- 2016年
- 目的:探讨miR-200a对TGF-β_1诱导的肾小管上皮细胞间质转分化的影响。方法:体外培养肾小管上皮细胞(HK-2),TGF-β_1(终浓度为10 ng/m L)作用12、24、48 h,采用qPCR检测miR-200a的表达,qPCR和Western Blot检测上皮转分化相关蛋白E-cadherin和ɑ-SMA的mRNA和蛋白表达;用agomir和antagomir分别转染细胞,其中转染agomir后用TGF-β_1诱导肾小管上皮细胞,qPCR、Western Blot和细胞免疫荧光检测E-cadherin和ɑ-SMA的mRNA和蛋白表达情况。结果:在TGF-β_1诱导下miR-200a的表达随着时间逐渐降低(P<0.05),E-cadherin表达呈降低趋势(P<0.05),ɑ-SMA表达逐步上调(P<0.05);agomir使miR-200a表达明显升高(P<0.05),antagomir使miR-200a表达降低(P<0.05);与转染NC-miRNA相比,agomir在mRNA和蛋白水平上调E-cadherin的表达(P<0.05),下调ɑ-SMA的表达(P<0.05);antagomir则抑制E-cadherin的表达(P<0.05),增加ɑ-SMA的表达(P<0.05),细胞免疫荧光表达情况与蛋白水平相符。结论:miR-200a能减弱TGF-β_1诱导的肾小管上皮细胞转分化。
- 龚艺周宝尚陈华张璟
- 关键词：上皮间质转分化转化生长因子Β1
- MiR-200a抑制Wnt/β-catenin信号通路缓解肾间质纤维化被引量：6
- 2017年
- 目的:探讨miR-200a对单侧输尿管梗阻小鼠肾Wnt/β-catenin信号通路的影响,进一步探讨miR-200a对肾间质纤维化的作用。方法:应用单侧输尿管结扎(UUO)建立肾间质纤维化模型,24只6周C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组,UUO组,UUO+miR-200a组,UUO+NC组,每组6只。从模型建立第一天开始,给予UUO+miR-200a组每只小鼠尾静脉注射40 mg/kg的miR-200a,给予UUO+NC组每只小鼠尾静脉注射40mg/kg的Negative Control,连续3 d。第7天取肾组织行HE及Masson染色,RT-PCR及Western Blot检测Wnt4、β-catenin、Fibronectin、α-SMA mRNA和蛋白在肾组织中的表达。结果:与假手术组比较,UUO组中肾小管损伤,间质胶原沉积明显,Wnt4、β-catenin、Fibronectin、α-SMA mRNA及蛋白表达升高(P<0.05)。与UUO组比较,UUO+miR-200a组肾小管损伤和间质胶原沉积亦明显减轻,Wnt4、β-catenin、Fibronectin、α-SMA基因及蛋白表达降低(P<0.05)。结论:miR-200a能够抑制Wnt/β-catenin通路缓解肾间质纤维化。
- 陈华龚艺周宝尚张璟
- 关键词：WNT/Β-CATENIN信号通路肾间质纤维化
