孟凡鹏
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：武警后勤学院附属医院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金天津市科委重点资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 四种表面标志物分子在大鼠骨髓源性内皮祖细胞分离鉴定中的应用
- 孟凡鹏黄佳雯韦淑萍牟心红
- 四种表面标志物分子在大鼠骨髓源性内皮祖细胞分离鉴定中的应用
- 2016年
- 【目的】研究血小板-内皮细胞黏附分子（platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1/CD31）、CD34、CD133和血管内皮生长因子受体2（vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR-2）四种表面标志物分子在大鼠骨髓源性内皮祖细（endothelial progenitor cells,EPCs）的分离鉴定中的应用。【方法】采用Ficoll密度梯度离心法分离提取骨髓单个核细胞,体外诱导培养。观察细胞形态的动态变化,流式细胞技术检测CD31、CD34、CD133和VEGFR-2四种细胞表面标志物的表达、荧光双染Dil-ac-LDL与FITC-UEA-I等方法对EPCs进行鉴定。【结果】分离培养的EPCs在3~4 d时,光学显微镜下可见部分贴壁细胞集落样生长,呈圆形或不规则形;7~10 d,贴壁的梭形细胞从细胞团边缘出芽生长;14~21d可观察到梭形细胞首尾相连成条索状结构,梭形细胞基本融合,融合后逐渐呈铺路石状。细胞培养至7 d时,Dil-ac-LDL/FITC-UEA-I双阳性细胞率大于85%,流式细胞术结果显示：EPCs四种表面分子CD31、CD34、CD133和VEGFR-2表达阳性。【结论】密度梯度离心法结合检测CD31、CD34、CD133和VEGFR-2四种表面标志物的表达等技术,可用于分离鉴定稳定增殖分化的内皮祖细胞,其生物学特征明显。
- 孟凡鹏黄佳雯韦淑萍牟心红
- 关键词：内皮祖细胞表面标志物
- 锌指基因ZFP580通过eNOS/NO信号通路促进EPCs分化的作用机制
- 2017年
- 【目的】探讨C2H2型锌指基因ZFP580调控EPCs分化的作用机制。【方法】分离、培养并鉴定大鼠骨髓源性EPCs;腺病毒转染技术获得过(低)表达ZFP580的EPCs;QPCR、Western blotting及体外血管新生实验检测ZFP580对EPCs分化及血管生成能力的影响;应用NO供体SNAP及e NOS抑制剂L-NAME探讨e NOS/NO信号通路在ZFP580调控EPCs分化过程中的作用。【结果】ZFP580过表达促进e NOS表达,同时成熟内皮细胞标志物CD31、vWF表达升高,体外血管生成能力增强,NO生物利用度及胞内cGMP含量显著升高;NO供体SNAP显著提高CD31和vWF蛋白表达水平及体外血管生成能力,而NOS抑制剂L-NAME则显著抑制ZFP580诱导的CD31和vWF蛋白表达水平及体外血管生成能力,并削弱ZFP580诱导的NO及胞内cGMP的表达。【结论】ZFP580可通过激活e NOS/NO途径诱导e NOS表达,提高NO活性及胞内cGMP含量,增加体外血管生成,促进EPCs向成熟ECs分化。
- 刘建勋温博张晶晶黄佳雯孟凡鹏韦淑萍张梅
- 关键词：内皮祖细胞内皮型一氧化氮合酶
- ZFP580对大鼠心肌缺血/再灌注后心室重塑的影响被引量：3
- 2017年
- 目的:探究锌指转录因子(ZFP580)与心肌缺血/再灌注损伤后心室重塑的关系。方法:72只SD大鼠随机分为假手术(sham)组(n=8)和心肌缺血/再灌注(I/R)组(n=64),其中I/R组分别在再灌注后的0.5 h、1 h、2h、4 h、1 d,7 d,14 d,28 d处死后取材,观察心肌组织中ZFP580的表达。培养大鼠H9C2心肌细胞,每组设3个复孔,分别在转化生长因子β1(TGF-β1)刺激0 h、8 h、16 h、24 h后观察心肌细胞肥大情况,并检测心肌细胞中β-MHC、心房利钠肽(ANP)以及ZFP580 m RNA的表达。利用慢病毒介导的基因转染获得高表达ZFP580的H9C2心肌细胞,转染72h后,检测心肌细胞中基质金属蛋白酶3(MMP-3)的表达。结果:成功建立心肌缺血/再灌注损伤模型,大鼠心肌I/R损伤后第14天,心肌组织大面积梗死,心肌细胞呈嗜酸性变。大鼠心肌组织中ZFP580及TGF-β1表达上调。TGF-β1(5 ng/ml)刺激H9C2心肌细胞后诱导心肌细胞肥大,心肌细胞肥大标志蛋白β-MHC、ANP表达上调,且心肌细胞中ZFP580m RNA表达上调(P<0.05)。高表达ZFP580的H9c2心肌细胞中MMP-3表达下调(P<0.05)。结论:锌指转录因子ZFP580可能参与了心肌缺血/再灌注后心室重塑的过程,其作用可能与参与TGF-β1诱导的心肌细胞肥大过程以及抑制心肌细胞产生MMP-3有关。
- 苗婕孟凡鹏毛士云马玉梅孟祥艳张梅
- 关键词：锌指转化生长因子
- 四种表面标志物分子在大鼠骨髓源性内皮祖细胞分离鉴定中的应用
- [目的]：研究CD31、CD34、CD133 和VEGFR-2 四种表面标志物分子在大鼠骨髓源性内皮祖细(endothelial progenitor cells,EPCs)的分离鉴定中的应用。[方法]：采用Ficoll...
- 孟凡鹏黄佳雯韦淑萍牟心红
