袁建波
- 作品数：18 被引量：23H指数：4
- 供职机构：北京林业大学更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- PEG介导的柳枝稷叶肉细胞原生质体瞬时表达体系的建立被引量：4
- 2017年
- 为了建立以PEG介导的柳枝稷叶肉细胞原生质体瞬时表达体系,本研究以柳枝稷Alamo品种的叶片为材料,通过设计梯度实验确定柳枝稷原生质体分离的最佳条件,每组梯度实验重复3次,方案如下:1)对植物培养的时间进行优化。酶解时间固定在8h,甘露醇浓度为0.6mol/L,将培养了1,2,3和4周的黄化苗用作实验材料;2)渗透压优化。选取2周的黄化苗为实验材料,酶解时间固定在8h,甘露醇浓度分别为0.4,0.5,0.6,0.7和0.8mol/L;3)酶解时间优化。选取2周的黄化苗为实验材料,甘露醇浓度为0.6mol/L,酶解时间分别为6,7,8,9和10h。通过对比分析发现,苗龄为2周的柳枝稷黄化苗叶片在甘露醇为0.6mol/L的酶解液中,黑暗,28℃并裂解8h后分离的原生质体最为理想。接下来构建了能够在植物细胞内表达GFP-MYB103融合蛋白(GFP为绿色荧光蛋白)的重组质粒LN-OsMYB103,利用PEG介导法将质粒LN-OsMYB103转化进入柳枝稷原生质体,并且在激光共聚焦显微镜下观察到了强烈的绿色荧光蛋白信号。该结果表明,分离的原生质体可以行使正常生物学功能。综上所述,利用柳枝稷叶片建立了一套完整的柳枝稷叶肉细胞原生质体瞬时表达体系。这将为深入开展柳枝稷的功能基因组学研究奠定了基础。
- 祁泽文孙鑫博樊波张雪袁建波韩烈保
- 关键词：柳枝稷PEG原生质体
- 紫花苜蓿MsNAP基因启动子及其应用
- 本发明公开了一种紫花苜蓿<I>MsNAP</I>基因启动子及其应用，涉及生物技术领域中的豆科牧草。紫花苜蓿MsNAP基因启动子，其序列含有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；其特异性引物包括：SEQ ID NO.2和...
- 晁跃辉韩烈保袁建波郭涛
- 文献传递
- 运动场用结缕草组织培养快速繁殖的方法
- 本发明公开了一种运动场用结缕草组织培养快速繁殖的方法，属于生物技术领域。本方法包括下列步骤：①外植体选取与消毒；②改良培养基的配备；③愈伤诱导；④愈伤继代；⑤芽分化；⑥生根培养；⑦炼苗与移栽。对MS培养基进行改良，配方为...
- 韩烈保袁建波晁跃辉谢琦张娜
- 文献传递
- 结缕草ZjCCS基因的克隆与表达分析被引量：6
- 2016年
- 为了解Cu/Zn超氧化物歧化酶分子伴侣基因(CCS)在结缕草逆境胁迫过程中的表达调控机制,以结缕草(Zoysia japonica)盐胁迫条件下的转录组数据为依据,结缕草cDNA为模板,通过RT-PCR法,克隆了924bp长的结缕草ZjCCS基因的CDS序列。同源性分析显示该基因与谷子(Setaria italica)同源性最高,含有植物CCS蛋白所特有的3个保守结构域。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术研究该基因在非生物胁迫条件下在结缕草叶片中的表达情况,结果显示,在盐胁迫条件下,ZjCCS基因的表达量呈先上升后下降的趋势,4h表达量最高,相对于盐胁迫,干旱和重金属胁迫对ZjCCS基因的表达量影响不大,推测ZjCCS基因可能在结缕草响应盐胁迫过程中发挥作用。
- 樊波孙鑫博张胤冰张雪袁建波张海兰肖维阳韩烈保许立新
- 关键词：结缕草CCS非生物胁迫实时荧光定量PCR
- 一种快速获得日本结缕草组培苗的方法
- 本发明具体提供一种快速获得日本结缕草组培苗的方法，包括如下步骤：1)灭菌种子浸种3天；2)浸种后的种子吹干，以水培养至萌发出1-2mm的芽；3)萌芽后的种子接种到固体MS培养基上，培养至幼苗地上部高3cm，此时幼苗叶鞘底...
- 韩烈保谢琦袁建波张胤冰樊波
- 结缕草ZjNAC基因的克隆与表达分析被引量：3
- 2016年
- NAC类家族的基因是植物特有的转录因子,并且它在植物的生长发育中发挥着重要的作用。本研究以结缕草为研究材料,对结缕草转录组数据库利用local blast的办法克隆出1个NAC类转录因子。为深入探讨和研究NAC类转录因子在植物逆境生理上的作用奠定基础。通过与水稻的OsNACs家族成员进行进化树分析,结合蛋白分析,QRT-PCR等的方式探索其生物学功能。实验结果表明,该基因长度为1496bp,包含1个完整开放阅读框(ORF),长度为1332bp,编码449个氨基酸,该蛋白含有1个NAM结构域。与水稻的NAC类转录因子家族的系统进化树对比发现,它与OsNAC036近缘性最高,因此将该基因命名为ZjNAC036。QRT-PCR结果显示,该基因在干旱情况下表达量呈上升趋势,并且干旱处理8h的时候,差异倍数最大,达到了50倍左右,而在盐胁迫、低温胁迫下没有规律性变化。这表明ZjNAC036在干旱逆境生理上可能有重要的作用,而在高盐及寒冷的逆境生理方面可能作用不大。
- 张胤冰孙鑫博樊波韩烈保张雪袁建波许立新
- 关键词：结缕草NAC转录因子进化树
- 一种生态修复用保定苜蓿的组织培养方法
- 本发明涉及一种生态修复用保定苜蓿的组织培养方法，包括如下步骤：1)愈伤组织的诱导：将外植体接种到愈伤诱导培养基中，培养至形成愈伤组织；2)愈伤组织的分化：将所述愈伤组织接种到前期分化培养基中，至出现体胚；再将所述体胚接种...
- 袁建波晁跃辉韩烈保谢琦
- 文献传递
- 紫花苜蓿MsNAP基因启动子及其应用
- 本发明公开了一种紫花苜蓿<I>MsNAP</I>基因启动子及其应用，涉及生物技术领域中的豆科牧草。紫花苜蓿MsNAP基因启动子，其序列含有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；其特异性引物包括：SEQ ID NO.2和...
- 晁跃辉韩烈保袁建波郭涛
- 文献传递
- 运动场用结缕草组织培养快速繁殖的方法
- 本发明公开了一种运动场用结缕草组织培养快速繁殖的方法，属于生物技术领域。本方法包括下列步骤：①外植体选取与消毒；②改良培养基的配备；③愈伤诱导；④愈伤继代；⑤芽分化；⑥生根培养；⑦炼苗与移栽。对MS培养基进行改良，配方为...
- 韩烈保袁建波晁跃辉谢琦张娜
- 一种直接使用结缕草叶片制备原生质体的方法
- 本发明公开了一种直接使用结缕草叶片制备原生质体的方法，涉及制备原生质体的方法。本方法是：①在做实验的前5天时，对结缕草进行霍格兰喷施；②在做实验的前2天改用蒸馏水喷施；③在进行试验的前30分钟，喷蒸馏水，覆上保鲜膜；④剪...
- 韩烈保祁泽文尹德东晁跃辉袁建波谢琦
- 文献传递
