史兆龙
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：新疆医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于BAF/GM细胞株法检测生长激素生物活性研究被引量：1
- 2016年
- 目的探讨基于BAF/GM细胞株法检测生长激素(GH)生物活性的可行性,为临床检测GH生物活性提供参考方法。方法选取2011年7月—2013年12月新疆医科大学第一附属医院儿科收治的特发性身材矮小(ISS)患儿42例(ISS组),另选取同期本院预防保健科体检健康儿童52例(对照组)。建立BAF/GM细胞株,常规培养于DMEM高糖培养基。培养液洗涤后转移到含10%马血清的培养基中培养16 h。采用含10%马血清的培养基重悬细胞,调整细胞浓度为3×10~5个/ml,混匀后取100μl滴在96孔板中。稀释标准GH溶液至终浓度为0.01~1 000.00μg/L,取10μl标准GH溶液滴加到96孔板中,培养22 h。每孔加入22μl反应液,继续培养3 h,在490 nm处测定吸光度(OD)值。绘制OD值与GH生物活性当量关系的标准曲线。采用含10%马血清的培养基配制促甲状腺激素(100 m U/L)、黄体生成素(10 000 U/L)、卵泡刺激素(10 000 U/L)、催乳素(100 U/L)、成纤维细胞生长因子(1 000μg/L)、表皮生长因子(100μg/L)、人类胰岛素样生长因子1(IGF-1,10μg/L)、氢化可的松(100μg/L)、诺和灵R(1.0 U/L)、L-甲状腺素钠(643.5 nmol/L),同时每孔加标准GH溶液5μl(20μg/L)进行干扰实验。采集两组受试者空腹静脉血,采用放射免疫分析法(IRMA)测定血清GH水平;灭活血清标本,以MTS法测定490 nm处OD值,代入标准曲线计算血清GH生物学活性当量。结果 GH生物活性当量与OD值关系的标准曲线为Y=0.8520ln(X)+0.498 8,R^2=0.969 8,其中X为GH生物活性当量,Y为OD值。加入促甲状腺激素、黄体生成素、卵泡刺激素、催乳素、成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、IGF-1、氢化可的松、诺和灵R和L-甲状腺素钠后测得OD值分别与标准GH溶液比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。两组受试者GH水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。ISS组GH生物活性当量、GH生物活性低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论基于BAF/GM细胞株法是�
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- 关键词：生长激素生物活性
- Ⅲ型、Ⅳ型成骨不全患儿合并矮身材时IGF-1与IGFBP-3水平的研究
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- 肥胖对中枢性性早熟女童性激素激发试验中LH峰值的影响
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- BAF/GM细胞株法在生长激素生物测定中的应用
- 2016年
- 目的探讨BAF/GM细胞株法测定正常儿童及特发性身材矮小患儿生长激素生物活性中的应用,为特发性身材矮小的病因学研究提供一定的实验依据。方法采用BAF/GM细胞株法建立体外生物测定系统,测定正常组儿童及特发性身材矮小患儿生长激素生物活性,同时采用免疫放射分析法测定其免疫活性。通过加入胰岛素、胰岛素样生长因子等评估该检测方法的稳定性,分析其对生长激素的阻断作用。结果 (1)生长激素刺激BAF/GM细胞株的增殖呈剂量依赖性。(2)两组儿童血清生长激素生物活性和免疫活性比较差异均无统计学意义(P1=0.393,P2=0.54)。(3)游离胰岛素样生长因子在浓度>30ng/mL时刺激细胞增殖,且增殖呈剂量依赖性,其余生长因子对细胞增殖无影响。结论 BAF-GM细胞株法测定生长激素生物活性具有较好的敏感性与特异性,是分析血清样本中生长激素的生物活性水平的一种切实可行方法。
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- 关键词：生长激素免疫活性
