王洋
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国农业大学动物医学院国家动物海绵状脑病检测实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛分枝杆菌PE_PGRS 62基因克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达
- 以牛分枝杆菌DNA为模板，体外扩增牛分枝杆菌PE-PGRS 62基因，并构建克隆载体pGEM-PE-PGRS 62.然后，构建亚克隆PMV261-PE-PGRS 62大肠杆菌一分枝杆菌穿梭质粒，经电转化方法，将PE-PG...
- 黄瑛王洋王志刚杨利峰赵德明
- 关键词：牛分枝杆菌基因克隆重组耻垢分枝杆菌
- 文献传递
- PPD阳性牛与健康牛巨噬细胞抗牛分支杆菌感染的差异研究
- 牛结核病(BTB)主要是由牛分枝杆菌(M.boyis)引起的一种慢性进行性传染病，长期以来在世界范围内对畜牧业造成严重危害。为了阐明牛结核引发的机体免疫反应特性，本研究中，我们对结核菌素(PPD)阳性牛和健康牛的单核细胞...
- 周向梅王洋林敬钧尹菲许立华黄瑛丁天健赵德明
- 关键词：牛结核病分枝杆菌巨噬细胞免疫反应
- TNF-α在IFN-γ诱导的感染牛分枝杆菌的THP-1细胞凋亡过程中的作用及相关信号通路分析
- 2010年
- 为研究IFN-γ对感染牛分枝杆菌的THP-1细胞的促凋亡作用,及TNF-α在此细胞凋亡过程中的作用和相关信号分子的变化,使用浓度为15 ng.mL-1的IFN-γ作用于不同剂量牛分枝杆菌北京株(MOI10∶1,20∶1)感染的THP-1细胞,在感染后12、24、36、48和72 h,使用流式细胞仪测定细胞凋亡百分比。结果显示,IFN-γ诱导了M.bovis北京株感染的细胞凋亡,并且凋亡呈时间相关性。随着细胞凋亡百分比的增加,牛分枝杆菌的CFU降低。在IFN-γ和M.bovis北京株(MOI10∶1)处理的巨噬细胞内加入抗TNF-α单克隆抗体,感染后36 h,细胞凋亡百分比测定结果显示,加入抗TNF-α单抗抑制了IFN-γ诱导的M.bovis感染的THP-1细胞的凋亡,与对照组相比,差异显著(P<0.05);用分光光度计检测表明Caspase-3和Caspase-8的激活是TNF-α依赖性的。在IFN-γ和M.bovis北京株(MOI10∶1)作用的THP-1细胞内分别加入JNKinhibitor I或NEMO-Binding Domain BindingPeptide,或同时加入2种抑制剂,36 h后测定细胞凋亡情况,与对照组相比,加入抑制剂后,细胞凋亡无显著差异(P>0.05),说明在本试验中,JNK通路和NF-κB凋亡通路未被激活。本研究初步阐明了TNF-α在IFN-γ诱导的感染牛分枝杆菌的细胞凋亡过程中的作用及相关信号通路。
- 张交儿王志远黄瑛王洋尹晓敏周向梅赵德明
- 关键词：牛分枝杆菌IFN-ΓTHP-1细胞细胞凋亡TNF-Α
- 结核阳性与阴性牛巨噬细胞感染牛分枝杆菌的表达谱差异分析
- 牛结核是由牛分枝杆菌感染引起的疾病,对养牛业乃至人类健康均产生很大的影响.为了研究整个转录组表达的差异,使用AgilentTM公司的牛基因表达谱芯片来研究整个过程中转录组的变化.分别探讨了结核阳性牛的巨噬细胞与结核阴性牛...
- 林敬钧王洋王进李华赵德明周向梅
- 关键词：牛结核病巨噬细胞牛分枝杆菌基因表达
- 文献传递
- 牛分枝杆菌PE_PGRS62基因克隆及在耻垢分枝杆菌中的表达被引量：2
- 2011年
- 为构建表达牛分枝杆菌(M.bovis)PE_PGRS62蛋白的重组耻垢分枝杆菌,本研究以M.bovis基因组DNA为模板PCR扩增PE_PGRS62基因,获得大小约为1 515 bp的目的片段,并克隆到大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体pMV261中,将重组pMV-PE_PGRS62穿梭表达载体电转化到耻垢分枝杆菌内,42℃热诱导重组耻垢分枝杆菌,通过SDS-PAGE和免疫印迹分析表达产物并鉴定其生物学活性。经SDS-PAGE分析,表达的PE_PGRS62蛋白分子量约为60 ku,免疫印迹结果表明,表达的PE_PGRS62蛋白与兔抗M.bovis阳性血清反应形成一条特异性蛋白条带。本实验为进一步研究M.bovis致病机理奠定了基础。
- 黄瑛王洋王志刚杨利峰赵德明
- 关键词：牛分枝杆菌克隆重组耻垢分枝杆菌
