吴琼
- 作品数:19 被引量:70H指数:6
- 供职机构:贵州医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金贵州省科学技术基金贵阳市科学技术计划项目更多>>
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- 表皮生长因子受体Ⅲ型突变体的ELISA检测试剂盒
- 本发明公开了一种表皮生长因子受体Ⅲ型突变体的ELISA检测试剂盒,其关键是应用基因工程技术获取抗EGFRvⅢ的单链抗体并与生物素抗原、亲和素‑HRP和显色液等组成试剂盒的主要组成部分。应用竞争法建立了对细胞、血清或者组织...
- 刘亭杨友辉刘香香吴琼薛维娜李勇军何彬
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- 表皮生长因子受体Ⅲ型突变体的ELISA检测试剂盒
- 本发明公开了一种表皮生长因子受体Ⅲ型突变体的ELISA检测试剂盒,其关键是应用基因工程技术获取抗EGFRvⅢ的单链抗体并与生物素抗原、亲和素‑HRP和显色液等组成试剂盒的主要组成部分。应用竞争法建立了对细胞、血清或者组织...
- 刘亭杨友辉刘香香吴琼薛维娜李勇军何彬
- 辛芍组方抗脑缺血再灌注损伤的抗氧化、抗凋亡机制研究被引量:9
- 2018年
- 该文制备了大鼠中动脉阻断(MCAO)局灶脑缺血再灌注损伤模型,来探讨辛芍组方抗脑缺血再灌注损伤作用的抗氧化和抗凋亡机制。大鼠随机分为假手术组,模型组,辛芍组方低、中、高剂量组(0.31,0.62,1.25 g·kg-1)。静脉注射给药7d后,建立大鼠局灶脑缺血再灌注损伤模型,并考察大鼠神经行为学评分、脑梗死体积比;考察血清中活性氧(ROS)含量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性、一氧化氮(NO)含量以及诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的活性;并用qRT-PCR法、免疫组化及Western blot法测定海马CA1区中Bcl-2,Bax,caspase 3 mRNA和蛋白水平的变化。结果表明,辛芍组方能够显著改善脑损伤大鼠行为学评分(P〈0.01)、有效减小脑梗死体积(P〈0.01)、提高血清中SOD和GSH-PX活性(P〈0.01)、减少ROS和MDA的产生(P〈0.01)、抑制i NOS活性(P〈0.01)、降低NO释放量(P〈0.01),上调Bcl-2的mRNA及蛋白水平(P〈0.01),下调Bax和caspase 3的mRNA及蛋白水平(P〈0.01)。结果提示,辛芍组方可能通过抗氧化和抗凋亡途径起到脑缺血再灌注损伤保护作用。
- 刘亭宋菲陆定艳董莉董莉吴琼李勇军王爱民
- 关键词:脑缺血再灌注活性氧凋亡
- 头花蓼对幽门螺杆菌生长及代谢相关基因的影响被引量:9
- 2016年
- 目的:观察苗药头花蓼对幽门螺杆菌(H.pylori)生长代谢及其相关基因的表达的影响。方法:将H.pylori菌接种于不同浓度的头花蓼培养基(头花蓼终浓度分别为64、32、16、8、4、2、1及0.5 g/L),测定无H.pylori菌生长时头花蓼的最小抑菌浓度(MIC);将H.pylori菌接种于无头花蓼培养基(对照组)和头花蓼MIC培养基(头花蓼组)培养36 h,每隔4 h采用用酶标仪检测590 nm处的吸光度值,绘制H.pylori生长曲线;用实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)检测2组H.pylori菌液生长代谢相关基因Frd A、Frd B、Hyu A及Pfr的表达水平。结果:头花蓼对H.pylori最低抑菌浓度MIC为4 g/L,头花蓼组H.pylori生长曲线位于对照组之下,Real-time PCR结果显示头花蓼作用后,头花蓼组生长代谢相关基因Frd A、Frd B、Hyu A及Pfr基因m RNA均呈减弱趋势,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:头花蓼在体外对H.pylori具有明显抑制作用,可通过影响细菌生长代谢相关基因的表达来抑制H.pylori的生长。
- 任艳君莫非张姝何芸吴琼谢小琴赵书琴
- 关键词:螺杆菌头花蓼代谢基因
- 头花蓼对H.pylori感染大鼠胃黏膜及血清IL-17和IL-23表达水平的影响被引量:3
- 2017年
- 目的:探讨苗药头花蓼(polygonum capitatum)对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染慢性胃炎大鼠胃黏膜及血清白介素(interleukin,IL)-17和IL-23表达水平的影响。方法:SD大鼠分为空白组、模型组和头花蓼组,后两组大鼠采用H.pylori标准菌灌胃SD大鼠建立H.pylori慢性胃炎大鼠模型,头花蓼组大鼠在造模成功后给予头花蓼1.72 g浸膏/(kg·d)的剂量灌胃给药2周,4周后取3组大鼠腹主动脉血及胃黏膜,HE染色观察大鼠胃黏膜病理学改变,酶联免疫法(ELISA)检测血清IL-17与IL-23含量,实时免疫荧光定量PCR(Real time-PCR,RT-PCR)检测胃黏膜IL-17 mRNA与IL-23 mRNA相对表达水平。结果:与模型组比较,头花蓼组胃黏膜炎症明显减轻,病理评分显著降低(P<0.05);与模型组比较,头花蓼组大鼠血清IL-17及胃黏膜IL-17 mRNA相对表达水平明显降低(P<0.05),血清IL-23含量明显降低(P<0.05)。结论:头花蓼可减轻H.pylori感染所致胃黏膜炎性损伤,此保护作用可能与抑制IL-17及IL-23的分泌有关。
- 简单温丽娜孙朝琴何芸吴琼莫非李永念
- 关键词:头花蓼白细胞介素
- 荭草花醇提物对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用机制研究被引量:7
- 2018年
- 研究荭草花醇提物对H9c2心肌细胞氧化损伤的保护作用机制。采用200μmol/L H_2O_2作用H9c2细胞0.5 h,建立H9c2细胞氧化损伤模型。将细胞分为正常对照组、H9c2细胞氧化损伤模型组、不同浓度荭草花醇提物(20、40、80μg/m L)预处理组。采用MTS法检测细胞存活率;生化试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放量,细胞内丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力;Western blot测定cleavedcaspase-3、Bcl-2、Bax、p-AKT和AKT的表达。与模型组比较,荭草花醇提物能明显增加心肌细胞存活率,降低LDH释放量和MDA含量,提高SOD及CAT活性,并呈剂量依赖性抑制H_2O_2诱导的氧化应激损伤。荭草花醇提物下调cleaved caspase-3和Bax的蛋白水平,上调Bcl-2的表达,减少心肌细胞凋亡;增加细胞中p-AKT的表达,且这种表达可被PI3Ks抑制剂LY294002抵消。表明荭草花醇提物可减轻H_2O_2诱导的H9c2心肌细胞氧化应激损伤,其机制可能与减少细胞凋亡,平衡氧化应激产物有关,且部分依赖于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K/Akt)通路。
- 刘亭吴琼刘香香陆定艳黄文炫李月婷李月婷
- 关键词:H9C2心肌细胞
- 灯盏细辛和赤芍配伍组方对小鼠部分肝细胞色素P450亚型活性的影响及其机制分析被引量:4
- 2018年
- 目的:探讨灯盏细辛和赤芍配伍组方(辛芍组方)对小鼠细胞色素P450酶(CYP450s)主要亚型CYP1a2,CYP2d22,CYP2e1和CYP3a11代谢活性的影响以及相关机制。方法:小鼠分为5组,分别为正常组、苯巴比妥组(70 mg·kg-1)和辛芍组方低、中、高剂量组(0.31,0.62,1.25 g·kg-1)。给药结束后,取各组小鼠肝脏制备微粒体,考察CYP1a2,CYP2d22,CYP2e1和CYP3a11的代谢活性;并提取肝组织总RNA和蛋白,实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)考察辛芍组方对CYP1a2,CYP2d22,CYP2e1,CYP3a11和孕烷X受体(PXR)mRNA及蛋白表达的影响;利用报告基因法考察辛芍组方对PXR的激活作用。结果:与正常组比较,辛芍组方可诱导CYP3a11酶活性,上调CYP3a11,PXR mRNA和蛋白水平,并具有PXR激活作用(P〈0.05,P〈0.01);与模型组比较,辛芍中、高剂量组方能抑制CYP1a2酶活性(P〈0.05),但对CYP1a2的mRNA水平和蛋白水平无明显影响;而辛芍组方对CYP2e1,CYP2d22的酶活性,mRNA水平和蛋白水平无明显影响。结论:辛芍组方具有CYP3a11活性诱导作用,该作用很可能与辛芍组方上调PXR表达并激活PXR从而促进CYP3a11表达有关;而其CYP1a2活性抑制作用机制与CYP1a2的表达调控无关,需要进一步研究。
- 刘亭刘香香陆定艳杨健吴琼王永林李勇军
- 关键词:细胞色素P450孕烷X受体
- 头花蓼对幽门螺杆菌相关性胃炎大鼠胃组织SIRT1、p53和p21的影响被引量:4
- 2018年
- 目的:观察头花蓼对幽门螺杆菌相关性胃炎(HAG)的治疗效果及对HAG胃组织中SIRT1/p53/p21信号通路的影响。方法:30只SD大鼠均分为正常对照组、模型组和药物组,正常对照组给予无菌脑心浸液肉汤灌胃,模型组和药物组大鼠给予H.pylori灌胃(1×1011CFU/L SS2000菌液1.5 m L/只)建立HAG模型,药物组HAG模型大鼠给予1.58 mg/(kg·d)头花蓼灌胃治疗,正常对照组大鼠和模型组大鼠给予等量无菌生理盐水灌胃,连续给药14 d;治疗结束4周时检测大鼠胃组织H.pylori定植量、观察各组大鼠胃黏膜组织学改变,采用Real time PCR和Western blot技术检测大鼠胃组织SIRT1、p53及p21 mRNA及蛋白表达水平。结果:正常对照组大鼠胃组织H.pylori定植量为0,模型组和药物组大鼠胃黏膜均有H.pylori定植,与模型组比较,药物组H.pylori定植量显著降低(P<0.05);正常对照组大鼠胃组织无病理形态学改变,模型组大鼠H.pylori感染后的胃黏膜腺体排列不规则,胃黏膜固有层中有较多淋巴细胞浸润,细胞浸润多呈弥漫性;药物组大鼠胃组织病理形态学改变少于模型组;与正常对照组比较,模型组病理评分显著升高,而药物组病理评分显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);H.pylori感染后,与正常对照组相比,模型组大鼠胃组织SIRT1、p53基p21 mRNA表达量增加(P<0.05);头花蓼治疗后,与模型组相比,药物组大鼠胃组织SIRT1、p53及p21 mRNA水平都明显升高(P<0.05);与正常对照组相比,模型组大鼠胃组织SIRT1、p53及p21蛋白表达均有所升高,但差异无统计学意义(P>0.05);而头花蓼治疗后,与模型组相比,SIRT1、p53和p21蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:头花蓼治疗可能是通过上调SIRT1、p53和p21基因表达来发挥作用。
- 吴琼莫非孙朝琴罗昭逊张姝张梦薇江明礼
- 关键词:头花蓼幽门螺杆菌幽门螺杆菌相关性胃炎
- 头花蓼对淋巴细胞分泌干扰素γ和白介素4的影响被引量:2
- 2016年
- 目的:研究苗药头花蓼对淋巴细胞分泌干扰素1(IFN-γ)及白介素4(IL-4)的影响。方法:制备C57BL/6小鼠脾淋巴细胞悬液,同刀豆蛋白A(ConA)及不同浓度的头花蓼(终浓度分别为:1、2、4、8、16、32、64、128、256、512mg/L)于37℃、5%CO2培养箱共培养72h,细胞活性检测试剂盒(CCK-8)检测头花蓼对体外T淋巴细胞增殖的影响,酶联免疫吸附实验(ELISA)测定细胞上清中的IFN-γ和IL-4含量,分析不同浓度的头花蓼对ConA活化的脾淋巴细胞增殖和分泌IFN-γ、IL-4的影响。结果:头花蓼浓度〉128mg/L时,明显抑制T淋巴细胞的增殖,抑制其分泌IFN-γ的水平,与空白组比较差异有统计学意义(P〈0.05);头花蓼浓度为8~128mg/L时,ConA活化的脾淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-4的水平明显高于空白对照,而T淋巴细胞的增殖无明显变化;头花蓼的浓度低于32mg/L时,ConA活化的淋巴细胞的IFN-γ分泌水平随头花蓼浓度升高而增加。结论:一定浓度的头花蓼刺激小鼠脾淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-4分泌,参与机体细胞免疫过程。
- 冯海潮孙朝琴何芸吴琼张然莫非罗昭逊
- 关键词:植物药淋巴细胞头花蓼干扰素Γ白介素4
- 荭草花提取物对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用被引量:9
- 2018年
- 目的:探究荭草花提取物对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用。方法:利用氯化钴(CoCl_2)建立缺氧复氧损伤H9c2细胞模型,实验分正常对照组、模型组及荭草花提取物不同浓度组。应用MTS检测细胞存活率;生化试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)释放量及细胞内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)水平;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blot测定cleaved Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:利用800μmol/L CoCl_2缺氧22 h,复氧2 h可建立缺氧复氧损伤心肌细胞模型。与模型组比较,荭草花提取物能显著升高心肌细胞存活率,降低LDH、CK释放量及细胞内MDA含量,提高细胞内SOD、CAT活性,并呈浓度依赖性抑制CoCl_2诱导的缺氧复氧损伤。荭草花提取物能下调促凋亡蛋白cleaved Caspase-3、Bax的表达,上调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,减少心肌细胞凋亡。结论:荭草花提取物对心肌细胞缺氧复氧损伤具有一定的保护作用,其机制可能与增强细胞清除自由基能力及抑制细胞凋亡有关。
- 刘亭吴琼刘香香陆定艳薛维娜兰燕宇李月婷
- 关键词:缺氧复氧H9C2心肌细胞