张婧
- 作品数：84 被引量：31H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- A型塞内卡病毒全长感染性cDNA克隆及其构建方法及应用
- 本发明提供了A型塞内卡病毒SVA/HN/11/2017兰兽研全长感染性cDNA克隆及其构建方法及应用，属于病毒技术领域。本发明在对SVA/HN/11/2017兰兽研进行全基因组测定的基础上，在其基因组cDNA序列的5’端...
- 马雪青孙普李平花卢曾军刘在新曹轶梅白兴文付元芳张婧李坤
- 文献传递
- 一种猪源IL-28B作为免疫增强剂在制备猪瘟E2亚单位疫苗中的应用
- 本发明公开了一种猪源IL‑28B作为免疫增强剂在制备猪瘟E2亚单位疫苗中的应用。CSF亚单位疫苗是CSF疫苗中的一种，主要以E2蛋白为抗原制备而成。为了增强E2蛋白的免疫原性，本发明使用IL‑28B做为免疫增强剂，制备了...
- 白兴文卢曾军袁红李坤焦云娟王涛杨宇轩李平花包慧芳孙普张婧李冬曹轶梅刘在新高洁
- 猪C型凝集素受体8A骆驼单域抗体酵母展示文库的构建被引量：1
- 2018年
- 为构建猪C型凝集素受体8A（C-type lectin domain family 8，member A，CLEC8A）的单域抗体酵母展示文库，本文首先克隆出了猪CLEC8A基因编码区序列。通过SMART软件分析，鉴定出该受体胞外区基因序列，并插入原核表达载体pET28a（＋），在大肠杆菌BL21（DE3）中成功表达出了猪CLEC8A胞外区蛋白。表达的蛋白经201佐剂乳化后免疫双峰驼，间接ELISA监测抗体滴度，于六免后15d分离骆驼外周血淋巴细胞。提取总RNA，反转录成cDNA后经巢式PCR扩增获得骆驼WfH基因。纯化的VHH片段与线性化的pCTCON2载体混合后共转入酿酒酵母感受态细胞（EBY100），经细胞内同源重组，成功制备了针对猪CLEC8A受体的骆驼单域抗体酵母展示文库。经菌落计数及测序鉴定结果表明，文库大小约为1．6×10 7，文库重组率达90％，文库多样性丰富。流式细胞术初步鉴定酵母细胞表面成功展示出抗猪CLE8A的单域抗体，为后续文库筛选奠定基础。
- 魏国燕李坤卢曾军刘在新孙普白兴文李冬陈应理包慧芳李平花付元芳张婧马雪青曹轶梅
- 关键词：流式细胞术
- 一种O型口蹄疫病毒突变株及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种O型口蹄疫病毒突变株及其制备方法和应用，属于疫苗候选株技术领域。O型口蹄疫病毒突变株以rHN病毒株作为母本病毒株，将VP3蛋白的G–H环中以下氨基酸发生突变：第173位天冬氨酸突变为天冬酰胺，第174位缬...
- 白兴文刘在新卢曾军包慧芳李平花李冬孙普付元芳陈应理曹轶梅马雪青李坤张婧陈冬冬宫晓华
- 文献传递
- 一种牛趋化因子介导的O型口蹄疫靶向性复合表位蛋白及疫苗
- 本发明提供一种牛趋化因子介导的O型口蹄疫靶向性复合表位蛋白，所述靶向性复合表位蛋白的氨基酸序列为序列表中SEQ ID No.2。本发明还提供含有上述牛趋化因子介导的O型口蹄疫靶向性复合表位蛋白的疫苗。应用本发明的疫苗免疫...
- 卢曾军曹轶梅刘在新李坤李冬魏国燕付元芳陈应理包慧芳李平花白兴文孙普马雪青张婧
- 文献传递
- 口蹄疫病毒VP2蛋白特异性单克隆工程抗体的表达与活性鉴定
- 2019年
- 为了在牛上应用单个B细胞抗体技术制备口蹄疫病毒(FMDV)特异性单克隆抗体,本研究利用生物素标记O型FMDV 146S抗原,从免疫牛外周血单个核细胞(PBMCs)中分选单个抗原特异性B细胞,通过单个B细胞抗体基因测定,获得Ig G抗体重链与轻链可变区编码序列,将可变区基因插入含有牛Ig G抗体恒定区的pcDNA3.4载体中,构建完整Ig G抗体的表达质粒。将表达质粒转染中国仓鼠卵巢悬浮细胞(CHO-S)进行抗体表达与纯化。经病毒中和试验(VNT)、间接免疫荧光试验(IFA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、Western-blot验证抗体的生物活性。结果显示,获得了4株FMDV特异性单克隆工程抗体,其中2株(A35、B57)可以中和O型FMDV;2株(A7、E32)IFA检测为阳性,其中E32可特异性结合O型和A型FMDV两种抗原,但没有病毒中和活性;ELISA结果显示,E32具有较好的亲合力;Western-blot结果显示,E32可特异性结合衣壳蛋白VP2,说明在衣壳蛋白VP2存在型间保守的抗原位点,为通用型FMDV抗原检测方法的研究提供了材料。
- 王省李坤卢曾军刘在新李冬包慧芳李平花孙普白兴文陈应理付元芳张婧马雪青曹轶梅
- 关键词：口蹄疫病毒
- 口蹄疫灭活疫苗的免疫效果及其对鉴别诊断的干扰被引量：5
- 2020年
- 灭活疫苗免疫是防控口蹄疫的重要措施,但是灭活疫苗的免疫效果及其对感染与免疫鉴别诊断的干扰一直是口蹄疫免疫无疫区建设评估需要明确的重要问题。本研究中选择了3个企业(代号A、B与C)的4组口蹄疫O型与A型二价灭活疫苗,分别免疫口蹄疫抗体阴性健康未成年牛,免疫3~4次,测定免疫前后结构蛋白和非结构蛋白抗体的应答水平。结果显示:(1)结构蛋白抗体合格率:a1组(A企业多批次疫苗)4次免疫后O型和A型均为100%;a2组(A企业同批次疫苗)一~三免O型为36.7%、98.3%与100%,A型为15%、86.7%与100%;b组(B企业疫苗)一~三免O型为18.3%、97%与100%,A型为1.7%、45%与53.3%;c组(C企业疫苗)一~三免O型为26.7%、96.7%与100%,A型为21.7%、71.7%与100%。(2)非结构蛋白3ABC抗体阳性率(两种方法复核结果):a1组一~四免分别为0.7%、1.4%、9.5%与4.8%;a2组和c组三次免疫均未检测到阳性;b组仅三免后阳性率为0.6%。3组灭活疫苗首次免疫牛的抗体合格率远不及70%,但加强免疫后抗体合格率均显著提高;非结构蛋白抗体检测结果表明有3组疫苗的抗原纯净度符合OIE的要求,但a1组灭活疫苗免疫后,仍然对感染与免疫鉴别诊断存在干扰;采用两种非结构蛋白抗体检测方法进行复核检验,可以提高感染与免疫鉴别诊断的准确性。本研究为口蹄疫免疫无疫评价方案的制定提供了科学依据。
- 孙普何伟付元芳付元芳李冬魏德陇曹轶梅曹轶梅李平花白兴文马雪青李坤包慧芳张婧刘在新刘在新
- 关键词：口蹄疫灭活疫苗免疫效果
- 口蹄疫病毒Asia1型中和性猪源单克隆抗体及其应用
- 本发明公开了口蹄疫病毒Asia1型中和性猪源单克隆抗体及其应用。本发明公开了口蹄疫病毒Asia1型中和性猪源单克隆抗体PD3，包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含3个重链互补决定区HCDR1、HCDR2、HCD...
- 李坤黄书伦卢曾军董开恒张强包慧芳曹轶梅李平花付元芳袁红孙普白兴文马雪青赵志荀张婧王健李冬
- ssc-miR-151-3p在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用
- 本发明涉及ssc‑miR‑151‑3p在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用，属于抗病毒药物技术领域。本发明提供了ssc‑miR‑151‑3p在制备调节猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的药物中的应用，所述ssc‑m...
- 张婧卢曾军孙普李凤娟曹轶梅李冬刘在新
- 一种用于美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的荧光RPA检测引物、方法及试剂盒
- 本发明公开了一种用于美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的荧光RPA检测引物、方法及试剂盒。本发明涉及了用于美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒的荧光RPA检测引物和探针组合，包含引物和探针组合反应体系的检测试剂盒及方法；该方法快速省时...
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