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人羊膜上皮细胞复合去表皮的真皮构建组织工程皮肤修复裸鼠皮肤缺损的实验研究被引量：4: 2017年; 目的探索由人羊膜上皮细胞（hAEC）、成纤维细胞与去表皮的真皮（DED）构建组织工程皮肤修复裸鼠全层皮肤缺损的可行性。方法采用低浓度胰蛋白酶多步消化分离法提取hAEC，并用两步酶消化法处理健康小儿包皮，获得成纤维细胞悬液，传代培养。将体外扩增培养至第3 ~ 5代的成纤维细胞和第2代hAEC分别接种在DED真皮面和基底膜面，体外器官培养构建组织工程皮肤。取3 ~ 4周龄健康雄性裸鼠20只，抽签法随机分为2组，在所有小鼠背部正中制备全层皮肤缺损模型。组织工程组用构建的组织工程全层皮肤覆盖创面；对照组创面仅覆盖凡士林油纱。分别于术后第7、14、21、28天对裸鼠全身及移植部位大体观察，比较两组间创面愈合时间及创面愈合率，并对移植部位行组织学观察。结果 hAEC具有干细胞特征，免疫荧光显示其表达结合转录因子4（OCT？4）、阶段特异性胚胎抗原4（SSEA？4）。器官培养2周后，体外构建的组织工程皮肤形成4 ~ 9层复层表皮，且表皮的组织结构形态与正常皮肤类似。移植组织工程皮肤至裸鼠创面后肉眼观察显示，在移植后第7、14、21天，组织工程组创面愈合率分别为57.49% ± 6.11%、92.80% ± 3.10%、98.83% ± 0.25%，均明显高于对照组（22.93% ± 4.26%、54.57% ± 7.94%、91.16% ± 4.79%），差异均有统计学意义（n = 10，t值分别为27.36、32.23、11.80，均P 〈 0.001），组织工程组创面愈合时间［（21.51 ± 1.51）d］明显短于对照组［（28.80 ± 1.14） d］（n = 10，t = 42.23，P 〈 0.001），且在移植后第28天移植物颜色与自体皮肤颜色接近。组织学观察显示，组织工程组上皮层次清晰，角化明显，真皮层细胞生长良好；对照组移植区上皮较薄且有部分缺损，真皮层次欠佳，且可见炎症细胞浸润。结论用hAEC、成纤维细胞复合DED构建的组织工程皮肤移植后能; 江蕾微刘志卢彬周文明李远英陆洪光; 关键词：上皮细胞真皮皮肤移植人羊膜上皮细胞

角质形成细胞无血清培养基条件下构建组织工程皮肤被引量：1: 2016年; 目的探讨在角质形成细胞无血清培养基条件下，用人成纤维细胞、角质形成细胞和黑素细胞接种于人去表皮真皮构建组织工程皮肤。方法胰酶和胶原酶消化处理健康小儿包皮，获得表皮和真皮细胞悬液。分别将角质形成细胞、黑素细胞传至第3代，成纤维细胞传至第5代，调整细胞密度为2．5×10^5／ml。制备人去表皮真皮（含部分基底膜成分），先将成纤维细胞悬液种于6孔板板底，24h后将人去表皮真皮放入6孔板，角质形成细胞、黑素细胞悬液接种于人去表皮真皮表面（成纤维细胞、角质形成细胞、黑素细胞比例为1：4：1。实验组用角质形成细胞无血清培养基培养，对照组用含10％FBS的DMEM、K-SFM、M254，3种培养液比例为1：1：1的混合培养基培养，人去表皮真皮作为空白对照。液下培养3d后，空气液面培养相结合的方式进行培养，每3天换液1次，2周后取培养的组织工程皮肤分别行HE染色，Melan-A、S-100、HMB45、CKpan、P63、K5、K6、K14、Ki67、Vimentin、Collagen Ⅳ、Laminin免疫组化染色及PAS染色并取正常皮肤做阳性对照。结果经过14d的气液培养，实验组出现完整的新生表皮结构，CKpan、P63、K5、K6、K14、Ki67、Melan—A、S-100、HMB45、Collagen Ⅳ、Laminin免疫组化染色阳性；对照组出现完整的新生表皮结构，可见角质层，CKpan、P63、K5／6、K14、Ki67、Laminin免疫组化染色阳性。结论角质形成细胞、黑素细胞及成纤维细胞与人去表皮真皮在角质形成细胞无血清培养基条件下，体外可构建组织工程皮肤。; 林建红汪宇卢彬刘志江蕾微王今朝张伟李世军陆洪光; 关键词：培养基无血清成纤维细胞黑素细胞角蛋白细胞

掌跖银屑病1例: 2016年; 银屑病是一种慢性复发性炎症性皮肤病，在我国患病率为0．123％，其皮疹既可局限出现，又可泛发于全身，如指甲、手掌、足底等，以寻常型最为常见。掌跖银屑病是一种临床少见的寻常型银屑病类型，以典型的角化性斑块、脱屑为特征，常被误诊、漏诊，国内罕有报道。现报道1例掌跖受力区出现特征性的皮损的掌跖银屑病。; 李世军张伟卢彬汪宇刘志周文明李远英陆洪光; 关键词：银屑病掌跖同形反应

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卢彬

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