刘川川
- 作品数：17 被引量：44H指数：5
- 供职机构：青海大学医学院高原医学研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金青海省科技厅基金青海省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 红景天苷抑制低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞的表型转化
- 目的观察红景天苷对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞表型转化的抑制作用。方法将细胞分为常氧组,低氧组和低氧加药物干预组,分别用40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml的红景天苷干预细胞48h,显微镜下观察细胞形态;WB...
- 毛稼琦马兰刘川川张雨薇
- 关键词：红景天苷肺动脉平滑肌细胞表型转化
- 白藜芦醇对低氧条件下肺动脉平滑肌细胞OPN表达及细胞功能的影响被引量：2
- 2019年
- 目的探讨白藜芦醇对低氧条件下肺动脉平滑肌细胞OPN表达及细胞功能的影响。方法培养原代SD大鼠肺动脉平滑肌细胞,并分为常氧组,低氧组,低氧加白藜芦醇低剂量组(25μM)、高剂量组(100μM)。各组用qRT-PCR、western-blot法检测OPN mRNA和蛋白表达水平。用MTS法检测PASMC增殖、细胞划痕实验检测PASMC迁移情况。结果 Res可降低低氧引起的PASMC中OPN的表达,且对低氧引起的PASMC增殖和迁移有抑制作用(P<0.05)。结论 Res通过降低低氧条件下OPN的表达抑制PASMC的增殖及迁移。
- 李小静刘川川鲍金刘辉琦刘杰曹学锋王生兰
- 关键词：白藜芦醇低氧肺动脉平滑肌细胞骨桥蛋白
- 低压低氧对SD大鼠肺动脉压及肺组织骨桥蛋白表达的影响被引量：5
- 2016年
- 目的观察不同时间低压低氧刺激下SD大鼠肺动脉压及肺组织骨桥蛋白(OPN)表达的变化,探讨OPN在肺动脉高压发病机制中的作用。方法将30只SD大鼠随机分成5组:对照组(海拔2 260 m)、低压低氧(低压氧舱模拟5 000 m海拔)1天组、7天组、14天组、21天组,每组动物均测定平均肺动脉压(m PAP)和右心室肥厚指数[RV/(LV+S)];并分别采用RT-PCR法检测各组大鼠肺组织中OPN m RNA的水平,Western blot技术检测各组大鼠肺组织中OPN蛋白表达水平。结果低压低氧1天、7天、14天、21天组动物m PAP均高于对照组(P<0.05),1天、7天、14天组呈逐渐增高趋势、21天组m PAP下降,差异有显著性(P<0.05);低压低氧7天组、14天组、21天组动物呈现随低氧时间延长RV/(LV+S)逐渐增高的趋势、均高于对照组和1天组(P<0.05),但1天组、7天组和对照组间差异无显著性(P>0.05);RT-PCR法和Western blot法结果显示低压低氧1天、7天、14天、21天组动物肺组织中OPNm RNA、OPN蛋白表达水平与对照组比较均增高(P<0.05)。结论低压低氧刺激可使m PAP和RV/(LV+S)增高并促进大鼠肺组织OPN的表达增高,因此OPN可能参与高原性心脏病形成中肺动脉压的增高和右心室重塑。
- 刘杰刘川川刘辉琦吴穹曹学锋王生兰
- 关键词：低压低氧骨桥蛋白肺组织
- 红景天苷对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞表型转化的影响被引量：6
- 2022年
- 探讨红景天苷对低氧引起的大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)表型转化的影响。采用组织消化法分离大鼠肺动脉,培养PASMCs,用CCK-8(cell counting kit-8)法测定不同浓度红景天苷处理细胞48 h后的A,确定红景天苷作用的适宜浓度范围。将细胞分为常氧对照组、低氧对照组和低氧+红景天苷处理组(40、60、80μg·mL^(-1)),采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测各组细胞收缩型标志物如α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌22(SM22)、钙结合蛋白(calponin)和合成型标志物波形蛋白(vimentin)的基因表达水平;Western blot检测各组细胞表型标志物和核增殖抗原(PCNA)蛋白表达水平;EdU(5-ethynyl-2′-deoxyuridine)法检测各组细胞增殖情况;Transwell法测定各组细胞迁移情况。结果表明,与常氧对照组相比,低氧可诱导PASMCs收缩型表型标志物mRNA和蛋白表达降低,合成型标志物mRNA和蛋白升高;与低氧对照组相比,红景天苷可以下调PASMCs合成型标志物mRNA和蛋白表达,上调收缩型表型标志物mRNA和蛋白表达。与常氧对照组相比,低氧对照组增殖和迁移能力增加;与低氧对照组相比,红景天苷抑制表型转化后细胞的增殖和迁移能力降低。结果提示,红景天苷可以抑制PASMCs合成型标志物表达,促进收缩型标志物表达,从而抑制低氧引起的PASMCs表型转化;且红景天苷抑制PASMCs增殖和迁移的机制与其抑制了PASMCs的表型转化有关。
- 毛稼琦刘川川刘川川张晴晴刘红马兰
- 关键词：低氧肺动脉平滑肌细胞表型转化红景天苷
- 多房棘球蚴表面抗原EMY162的原核表达及抗体制备被引量：5
- 2017年
- 目的建立多房棘球蚴表面抗原EMY162原核表达系统及制备兔多克隆抗体。方法构建表达载体pCzn1-EMY162并转入Arctic Express菌株,用IPTG诱导、Ni柱纯化获得目的蛋白后免疫新西兰兔,以ELISA、SDS-PAGE考察纯化后抗体的效价、浓度及纯度。结果酶切鉴定和测序结果表明重组质粒pCzn1-EMY162构建成功,且EMY162在包涵体部位中表达、可溶部位微量表达。通过Ni-NTA柱亲和层析纯化获得高纯度的EMY162蛋白。免疫兔后收集血清,其ELISA结果表明,抗血清可以特异性结合目标蛋白,抗体效价大于512 K,SDS-PAGE结果表明,纯化后获得了较高纯度的多克隆抗体,可用于后续实验研究。结论成功建立EMY162原核表达系统并制备了高纯度、高效价的多克隆抗体。
- 冯琳李润乐刘川川廖瑜杨全余汤锋
- 关键词：多房棘球蚴多克隆抗体原核表达
- 噻虫啉治疗继发性泡型包虫病的实验研究被引量：1
- 2020年
- 目的通过观察不同浓度噻虫啉(Thia)对棘球蚴的杀伤作用,评价噻虫啉应用于治疗多房棘球蚴病的效果,旨在探索噻虫啉开发为抗包虫病先导化合物的潜能。方法体外实验中以不同浓度噻虫啉作用于多房棘球蚴原头节,以0.1%伊红染色评价原头节存活情况,并通过扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)观察原头节超微结构改变。体内实验将继发性感染多房棘球蚴小鼠分为3组:模型组、阿苯达唑组(ABZ, 100 mg/kg)、Thia组(20 mg/kg),以未感染小鼠作为空白对照组。经药物灌胃治疗4 w后,分离小鼠脾脏和包虫囊肿称取重量,计算脾脏指数和抑囊率,HE染色后观察囊肿形态学改变。此外,从体外(LO2和HepG2细胞)和体内(Balb/c小鼠)评价噻虫啉毒性。结果 40μg/mL噻虫啉在体外即表现出对原头节的杀伤作用,并导致原头节体表及内部结构破坏。体内药物治疗4 w后,小鼠脾脏指数较模型组增高(P<0.05),包虫囊肿重量较模型组减轻(P<0.05)。包虫囊肿病理显示Thia组未见生发层结构。噻虫啉浓度低于80μg/mL无明显细胞毒性,20 mg/kg噻虫啉无明显的体内肝肾毒性。结论噻虫啉在体内外表现出明显的抗多房棘球蚴作用,并能增强小鼠的免疫功能,具有开发为抗包虫病先导化合物的潜能。
- 刘川川刘川川格日力马兰
- 关键词：多房棘球蚴噻虫啉阿苯达唑毒性
- 用聚乙二醇沉淀法提取脐带间充质干细胞源外泌体抑制PASMCs增殖被引量：1
- 2023年
- 目的用聚乙二醇(PEG 6000)沉淀法提取人脐带间充质干细胞源外泌体(hUCMSCs-exo);观察hUCMSCs-exo对低氧诱导的PASMCs增殖的抑制作用。方法培养人脐带间充质干细胞并鉴定。低速离心提取脐带间充质干细胞培养上清液的hUCMSCs-exo。用透射电子显微镜观察hUCMSCs-exo形态,用考马斯亮蓝及BCA试剂盒检测hUCMSCs-exo蛋白质含量,用Western Blot法检测hUCMSCs-exo表面标记物CD63/Alix/TSG101蛋白的表达水平,用激光共聚焦显微镜观察PASMCs摄取hUCMSCs-exo情况,用EdU法检测hUCMSCs-exo对低氧诱导的大鼠PASMCs增殖的影响,用Western Blot法检测PASMCs核增殖抗原(PCNA)蛋白表达水平,用cck-8法测定用不同浓度hUCMSCs-exo干预低氧诱导后PASMCs的细胞吸光度值。结果通过低速离心成功分离出hUCMSCs-exo。透射电镜下的hUCMSCs-exo为圆形或椭圆形。考马斯亮蓝结果显示,hUCMSCs-exo蛋白条带表达清晰。BCA定量结果显示,PEG 6000溶液浓度为10%时提取的hUCMSCs-exo浓度最高。用激光共聚焦显微镜观察到,用PKH26标记的hUCMSCs-exo能被PASMCs内化。EdU与Western Blot结果显示,hUCMSCs-exo可以抑制PASMCs增殖,P<0.05。cck-8结果显示,hUCMSCs-exo抑制PASMCs增殖,且当hUCMSCs-exo浓度达80μg·mL^(-1)时的细胞吸光度值明显降低,P<0.05。结论PEG 6000沉淀法提取的hUCMSCs-exo可抑制低氧诱导的大鼠PASMCs增殖。
- 张雨薇牛菊红刘川川毛稼琦张晴晴刘红陈英马兰
- 关键词：沉淀法人脐带间充质干细胞外泌体肺动脉平滑肌细胞低氧性肺动脉高压
- 棘球绦虫和其它寄生性绦虫乙酰胆碱酯酶和烟碱型乙酰胆碱受体作为潜在药物靶点的研究进展被引量：8
- 2019年
- 棘球蚴病是由棘球绦虫的幼虫(棘球蚴)引起的慢性寄生虫病,主要发生于牧区人群,是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病,本病治疗主要依赖于阿苯达唑(Albendazole,ABZ)。由于ABZ较低的肠道吸收率及肝脏对药物的转化作用,使得该药的生物利用度较低。以往的研究表明乙酰胆碱酯酶(AChE)和烟碱型乙酰胆碱受体(nAChRs)在寄生虫的神经系统和离子通道中起着重要的作用,这两者都是目前新一代驱虫药物的靶点。为提高对棘球蚴胆碱能系统功能的认识,本文回顾了以往关于棘球蚴和其他寄生虫AChE和nAChR的研究,并讨论了它们作为棘球蚴病疫苗开发和药物设计的合适靶点的潜力。
- 刘川川樊海宁樊海宁格日力
- 关键词：棘球绦虫烟碱型乙酰胆碱受体乙酰胆碱酯酶药物靶点
- 低氧、高糖环境对肾脏足细胞焦亡相关机制的研究
- 2023年
- 目的探讨低氧、高糖单因素和低氧高糖复合因素对大鼠肾小球足细胞焦亡的影响。方法体外培养大鼠肾小球足细胞,随机分为对照组、高糖组、低氧组及低氧高糖组,EdU法检测各组细胞增殖情况,透射电镜观察细胞核与线粒体形态及大小的变化,Western blot法检测焦亡相关蛋白核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、消皮素D(GSDMD)及炎症因子白细胞介素-1β前体(Pro-IL-1β)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18的表达水平,分析低氧和高糖环境对大鼠肾小球足细胞焦亡的影响。结果EdU结果显示低氧和高糖抑制了大鼠肾小球足细胞的增殖能力(P<0.05)。透射电镜结果提示低氧和高糖条件促进大鼠肾小球足细胞焦亡的发生。Western blot显示低氧和高糖条件促进大鼠肾小球足细胞焦亡,使焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、GSDMD的表达增加,其中低氧高糖组焦亡蛋白的表达量增加最为显著(P<0.05)。同时也促使炎症因子Pro-IL-1β、IL-1β、IL-18的表达增加(P<0.05)。结论低氧、高糖条件可诱导大鼠肾小球足细胞发生焦亡,其中的机制之一可能是通过影响NLRP3-Caspase-1-GSDMD及其下游炎症因子而发挥作用。
- 孟智敏刘川川计亚亚朱青尹凤娇张瑞霞巴应贵
- 关键词：低氧高糖足细胞NLRP3
- 阿尔茨海默病淀粉样蛋白抗原表位的生物信息学预测
- 2017年
- 目的利用生物信息学预测阿尔茨海默病中淀粉样前体蛋白的二级结构及优势抗原表位,拟为今后基于Aβ蛋白表位疫苗的设计奠定基础。方法用Genbank获取APP及氨基酸残基片段Aβ1~42蛋白的氨基酸序列,应用生物信息学在线软件SOPMA预测上述蛋白的二级结构,并通过IEDB、SYFPEITHI、Bcepred和ABCpred软件在线预测APP及Aβ1~42的T、B细胞抗原表位。同时对上述蛋白的亲水性、柔韧性、抗原倾向性及抗原暴露表面区域性进行预测。结果 APP及Aβ1~42蛋白二级结构中α-螺旋及延伸链比例分别为46.49%、52.38%,所占比例较高,有较强的抗原性,提示存在潜在的优势抗原性表位。进一步通过不同生物信息学方法分析出APP的T细胞表位位于37~49、16~28、1~13、11~24、30~43、42~0;Aβ1~42蛋白的T细胞表位位于3~11(675~683)、1~11(673~683)、22~31(696~705)、31~39(705~713)。APP蛋白潜在的B细胞表位位于49~62、72~85、350~365、637~652;Aβ1~42蛋白的B细胞表位位于4~19(676~691)、26~39(700~713)、11~26(683~698)、26~41(698~713)。结论 APP及Aβ1~42蛋白存在潜在的优势抗原性表位,且Aβ1~42的抗原优势表位与APP优势表位不同,针对Aβ1~42设计更具有特异性的表位疫苗对APP无影响从而发挥更好的预防、治疗作用。该结论为今后基于Aβ蛋白表位疫苗的设计奠定了理论基础。
- 刘军莉汤峰刘川川崔森李占全
- 关键词：阿尔茨海默病表面抗原
