朱磊 作品数:37 被引量:163 H指数:7 供职机构: 安徽中医药大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 安徽省自然科学基金 国家自然科学基金 安徽省高校省级自然科学研究项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
辨证运用骨蚀宁Ⅰ号、Ⅱ号对激素性股骨头坏死兔股骨头血管内皮生长因子表达的影响 被引量:7 2017年 目的探讨骨蚀宁Ⅰ号、Ⅱ号治疗激素性股骨头坏死的作用机制,为其临床应用提供理论依据。方法选取60只家兔,随机抽取6只作为正常组,其余54只用于复制激素性股骨头坏死模型,模型复制成功后随机分为模型组、阳性对照组和治疗组,每组18只。三酰甘油大于1.00mmol/L判为血瘀证。模型组灌胃生理盐水,阳性对照组灌胃健骨生丸,治疗组辨证给予骨蚀宁Ⅰ号、Ⅱ号(血瘀证用Ⅰ号,肾虚证用Ⅱ号)。于模型复制后4周、8周、12周分批处死家兔,每组6只,光镜下观察股骨头组织形态变化,采用免疫组织化学法检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平。结果治疗组和阳性对照组骨坏死比模型组减轻,空缺骨陷窝数百分比明显低于模型组(P<0.05);模型复制第4周,模型组VEGF灰度值明显低于正常组(P<0.05);阳性对照组、治疗组灰度值比模型组显著升高(P<0.05);模型复制后8周,模型组灰度值明显高于其他两组(P<0.05);模型复制后12周,阳性对照组、治疗组VEGF灰度值明显低于模型组(P<0.05),治疗组VEGF灰度值明显低于阳性对照组(P<0.05)。结论骨蚀宁Ⅰ号、Ⅱ号通过增强VEGF的表达,促进激素性股骨头坏死的血管形成和骨坏死修复。 朱磊 周正新 刘安平 陈朝晖 周导 李文华 张长春 李亮 康金平关键词:激素性股骨头坏死 血管内皮生长因子 骨痹通消颗粒对糖皮质激素致成骨细胞损伤的干预作用 2023年 目的:探讨股骨头坏死治疗验方骨痹通消颗粒干预糖皮质激素致成骨细胞损伤的作用机制。方法:体外培养小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1,对照组常规培养,模型组使用梯度浓度地塞米松(10^(-5)M、10^(-6)M、10^(-7)M)溶液诱导损伤,实验组在模型组基础上加入骨痹通消颗粒含药血清干预培养。CCK-8法检测细胞活力、MDC/PI染色法检测自噬及凋亡情况,Western-blot检测Beclin-1、Bcl-2和Bax的表达水平,RT-qPCR分析各组目的基因的表达情况。结果:与对照组相比,模型组成骨细胞活力下降明显,地塞米松诱导MC3T3-E1细胞自噬及凋亡的作用呈时间和剂量依赖性(P<0.05)。自噬标记物Beclin-1在低剂量地塞米松(10^(-7)或10^(-6) M)时增加,在高剂量(10^(5) M)时减少。与模型组相比,实验组Beclin-1、Bax mRNA表达下降(P<0.01),而Bcl-2 mRNA表达明显上调(P<0.01)。此外,实验组凋亡染色半定量分析结果显示,细胞自噬及凋亡情况均得到不同程度抑制(P<0.01)。结论:骨痹通消颗粒对地塞米松致成骨细胞损伤具有保护作用,能够有效减少糖皮质激素诱导的细胞自噬及凋亡,可能是其维持骨量,延缓股骨头坏死发生发展的作用机制之一。 朱彩玉 朱磊 顾一帆 韩士鼎 徐寰 侯文渊 周正新关键词:糖皮质激素 自噬 股骨头坏死 基于RANKL/RANK/OPG信号轴探讨骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗作用 2024年 目的观察骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗作用,并从核因子-κB受体活化因子配体/核因子-κB受体活化因子/骨保护素(RANKL/RANK/OPG)信号轴探讨其作用机制。方法采取腹腔注射脂多糖和臀肌注射醋酸泼尼松龙复制激素性股骨头缺血坏死(SONFH)动物模型,经核磁共振鉴定后,将模型复制成功的60只小鼠分成模型(MC)组、骨痹通消颗粒(GBTX)组及通络生骨胶囊(PC)组,每组20只,另设12只正常小鼠作为空白对照(NC)组。分别予以对应组灌胃相应药物12周后麻醉状态下取材,观察各组小鼠治疗前后的一般行为;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠的骨碱性磷酸酶(BALP)和I型氨基端延长肽(PINP)含量;Western blotting和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-qPCR)检测各组RANK、RANKL、OPG、磷脂酰肌醇特异性磷脂酶Cγ2(PLCγ2)、组织蛋白酶K(CTSK)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的蛋白和基因表达。结果核磁共振显示,模型复制成功后的小鼠左侧髋部呈高信号状态。与NC组比较,MC组BALP、PINP水平,以及OPG蛋白和基因相对表达量均降低(P<0.05),RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量均升高(P<0.05);与MC组比较,GBTX组和PC组BALP、PINP水平,以及OPG蛋白和基因相对表达量均升高(P<0.05),RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量均下降(P<0.05);与GBTX组比较,PC组OPG、RANK、RANKL、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量,以及PLCγ2蛋白相对表达量差异均无统计学意义(P>0.05),而PC组PLCγ2基因相对表达量较GBTX组下降(P<0.05)。结论骨痹通消颗粒可能通过上调OPG表达,抑制RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK和TRAP表达,从而改善股骨头坏死情况。 方祥 周正新 朱磊 芮仞 许茂玉 朱彩玉关键词:激素性股骨头坏死 老年非创伤性股骨头坏死组织中Rap1-PI3K/Akt信号通路表达特点及作用 被引量:4 2022年 目的探讨老年非创伤性股骨头坏死组织中Ras相关蛋白(Rap)1-磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路表达特点及作用。方法老年非创伤性股骨头坏死患者50例为非创伤性股骨头坏死组,同期老年创伤性股骨头坏死患者50例为创伤性股骨头坏死组。非创伤性股骨头坏死组取两个区域(坏死区、正常区)骨组织样本,创伤性股骨头坏死组取正常区域骨组织标本,进行苏木精-伊红(HE)和免疫组化染色,实时荧光定量PCR、Western印迹检测Rap1、血管内皮生长因子(VEGF)、PI3K、Akt mRNA和蛋白表达水平。结果HE染色显示,非创伤性股骨头坏死区域软骨细胞数量明显减少,软骨下骨小梁增厚、断裂,细胞核消失,出现软骨陷窝,周围新生毛细血管和纤维母细胞等肉芽组织长入坏死组织,出现肉芽组织增生。免疫组化染色显示,非创伤性股骨头坏死组组织坏死区域Rap1、VEGF、PI3K、Akt表达强度(■)弱于非创伤性股骨头坏死组组织正常区域(■)、创伤性股骨头坏死组组织正常区域(■)。非创伤性股骨头坏死组骨组织坏死区的Rap1、VEGF、PI3K、Akt mRNA和蛋白表达水平明显低于非创伤性股骨头坏死组骨组织正常区、创伤性股骨头坏死组骨组织正常区(P<0.05);两组骨组织正常区Rap1、VEGF、PI3K、Akt mRNA和蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论Rap1-PI3K/Akt信号通路激活受限造成血管内皮损伤,进而导致老年非创伤性股骨头坏死。 朱磊 顾一帆 康金平 韩士鼎 徐寰 周正新关键词:非创伤性股骨头坏死 血管内皮生长因子 辨证使用骨蚀宁胶囊Ⅰ号、Ⅱ号对激素性股骨头坏死家兔模型CD34、CYR61、CTGF表达影响的实验研究 被引量:6 2020年 目的:通过此研究,为骨蚀宁胶囊治疗激素性股骨头坏死提供数据依据。方法:选取60只新西兰大白兔,随机抽取6只不造模作为正常组,剩余54只造模成功后随机分为3组:骨蚀宁胶囊组(治疗组)、空白对照组(模型组)、健骨生组(阳性组),空白对照组灌胃生理盐水,阳性组灌胃健骨生丸,治疗组灌胃骨蚀宁Ⅰ号、Ⅱ号。分别于造模后第4周、8周、12周分批处死,每组6只,取股骨头标本切片,通过HE染色,观察股骨头组织形态变化,运用免疫组化法(SP二步法)观察股骨头CD34、CYR61及CTGF表达的情况。结果:模型组动物的一般状态差,骨坏死发生严重,治疗组动物一般状态较好,骨坏死发生轻,模型组空骨陷窝率明显高于治疗组,治疗组空骨陷窝率稍低于阳性组,组间比较差异有统计学意义。第4周:模型组、阳性组和治疗组的CD34、CYR61及CTGF灰度值均低于正常组,治疗组和阳性组的灰度值都低于模型组的灰度值,差异有统计学意义;第8周:治疗组和阳性组的灰度值此时仍低于模型组的灰度值,治疗组的灰度值与阳性组灰度值比较,治疗组偏低;第12周:正常组和阳性组的灰度值均高于治疗组,治疗组股骨头的CD34、CYR61及CTGF的表达高于正常组和阳性组的表达,差异有统计学意义。结论:骨蚀宁Ⅰ号、Ⅱ号均能够增强CD34、CYR61及CTGF表达,有利于坏死股骨头内血管重建与再生,使骨坏死区的血运得到改善,使骨坏死得到不同程度的修复;骨蚀宁胶囊通过改善局部血供、修复坏死骨组织,对激素性股骨头坏死起到一定的防治作用。 朱磊 周正新 刘安平 陈朝晖 周导 李文华 康金平关键词:激素性股骨头坏死 CD34 CYR61 CTGF 微RNA-29b和血管内皮生长因子在激素性股骨头坏死中的表达关系 被引量:2 2021年 目的检测激素性股骨头坏死(steroid-induced avascular necrosis of femoral head,SANFH)患者血清中微RNA-29b(microRNA-29b,miR-29b)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达情况并分析二者的相关性。方法选取2014年3月至2020年6月安徽中医药大学第一附属医院收治的100例SANFH患者纳入试验组,股骨头坏死ARCO分期Ⅰ期35例、Ⅱ期23例、Ⅲ期42例。选取同期该院75例健康体检者纳入对照组。采用定量反转录聚合酶链反应检测SANFH患者血清中miR-29b和VEGF表达情况,采用Pearson相关系数分析miR-29b与VEGF表达的相关性;采用受试者工作特征曲线(receiver operator characteristic curve,ROC曲线)分析miR-29b和VEGF表达水平对SANFH的诊断价值。结果SANFH患者血清中miR-29b表达水平显著高于对照组(P<0.05),并随病情加重而显著升高(均P<0.05);VEGF表达水平显著低于对照组(P<0.05),并随病情加重而显著降低(均P<0.05)。Pearson相关性分析发现,SANFH患者血清中miR-29b与VEGF表达呈显著负相关(P<0.05)。miR-29b联合VEGF预测SANFH发病的ROC曲线下面积为0.916,灵敏度为85.00%,特异度为86.70%。结论SANFH患者血清中miR-29b表达水平显著增加,VEGF表达水平显著降低,二者呈显著负相关,且可用于SANFH早期监测和判断病情进展。 王俊骁 李亮 朱磊 周正新关键词:血管内皮生长因子 激素性股骨头坏死 股骨头坏死患者焦虑、抑郁现状及影响因素 2023年 目的:调查成人股骨头坏死(ONFH)患者焦虑、抑郁风险状况,并分析其影响因素。方法:选取安徽中医药大学第一附属医院2016年1月~2021年5月收治的148例成人ONFH住院患者,对其焦虑和抑郁情况进行调查,并采用Logistic多元回归分析探讨患者焦虑和抑郁发生的危险因素。结果:成人ONFH住院患者单纯焦虑、单纯抑郁、焦虑和抑郁共患病例占比18.24%、19.59%、13.51%,其中焦虑、抑郁占比分别为31.76%、33.11%。女性、农村、婚姻状况、家庭月收入、ONFHⅣ期及以上、自费均是其发生焦虑的危险因素(P<0.05),农村、婚姻状况、家庭月收入、合并骨质疏松症、ONFHⅣ期及以上、自费均是其发生抑郁的危险因素(P<0.05)。结论:成人ONFH住院患者焦虑和抑郁占比高,女性、农村、婚姻状况、家庭月收入、ONFH分期等均是焦虑、抑郁发生的危险因素。 任怡雯 周正新 程溢芬 朱磊 管玉香关键词:股骨头坏死 焦虑 抑郁 中药骨痹通消颗粒通过调控Wnt/β-catenin通路治疗激素性股骨头坏死的实验研究 被引量:7 2023年 目的通过动物实验探讨中药骨痹通消颗粒通过调控Wnt/β-catenin通路治疗激素性股骨头坏死的价值。方法将造模成功的激素性股骨头坏死大白兔随机分为3组模型组、碳酸钙组与中药组,每组13只。模型组用生理盐水灌胃治疗,碳酸钙组碳酸钙D3颗粒治疗,中药组给予骨痹通消颗粒治疗。记录实验动物的变化情况与股骨头Wnt/β-catenin蛋白表达水平变化情况。结果碳酸钙组与中药组给药后6周、8周的体质量高于模型组,中药组高于碳酸钙组,对比差异都有统计学意义(P<0.05)。碳酸钙组与中药组给药后6周、8周血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量高于模型组,丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量低于模型组,对比差异有统计学意义(P<0.05),碳酸钙组与中药组对比差异也有统计学意义(P<0.05)。碳酸钙组与中药组给药后8周的股骨应变能力、最大载荷都高于模型组,中药组高于碳酸钙组,对比差异都有统计学意义(P<0.05)。碳酸钙组与中药组给药后8周的股骨Wnt、β-catenin蛋白相对表达水平高于模型组,中药组高于碳酸钙组,对比差异都有统计学意义(P<0.05)。模型组镜下见软骨细胞减少、成骨细胞减少,骨细胞固缩或消失;碳酸钙组骨小梁出现骨质紊乱、扭曲、毛糙,髓腔内脂肪细胞体积增大;中药组股骨头软骨细胞数量正常,排列规则,空骨陷窝较少。结论中药骨痹通消颗粒在激素性股骨头坏死实验动物中的应用能激活Wnt/β-catenin通路,改善股骨的生物力学状况,有利于维持正常机体氧自由基产生与清除处于平衡状态,从而发挥积极的治疗作用。 周正新 朱磊 李文华 李亮 刘涛 康金平 韩士鼎 顾一帆 徐寰关键词:激素性股骨头坏死 WNT/Β-CATENIN通路 生物力学 基于网络药理学研究“杜仲-续断”药对治疗膝关节炎的作用机制 被引量:6 2022年 目的基于网络药理学方法探讨杜仲-续断药对治疗膝关节炎的药效物质基础与潜在的分子作用机制。方法通过TCMSP数据库挖掘杜仲、续断的主要化学成分,结合SwissTargetPrediction平台筛选出药物活性成分并通过Uniprot数据库进行靶点预测;通过GeneCards、OMIM、DrugBank、TTD数据库检索膝关节炎主要作用靶点,利用String平台进行蛋白质交互作用(protein-protein interaction,PPI)分析,制作PPI网络图;再根据David数据库进行基因本体论(gene ontology,GO)分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,并通过Cytoscape3.8.0软件构建“靶点-通路”网络图。结果杜仲-续断配对调治膝关节炎的核心活性成分为β-谷甾醇、槲皮素等,重要靶点有丝裂原活化蛋白激酶1(mitogen-activated protein kinase,MAPK)抗体、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)等。杜仲-续断配对治疗膝关节炎的生物学通路主要作用于TNF信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)信号通路、MAPK信号通路等。结论杜仲-续断配对治疗膝关节炎具有多成分、多靶点、多通路的作用特点。 许茂玉 盛炎炎 方祥 周正新 李文华 朱磊关键词:网络药理学 续断 膝关节炎 骨痹通消颗粒干预激素性股骨头坏死小鼠模型的作用及机制 被引量:1 2024年 背景:研究发现,糖皮质激素可抑制甲状旁腺素1受体(parathyroid hormone typeⅠreceptor,PTH1R)/蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)信号轴中关键基因表达,干扰骨髓间充质干细胞向成骨、成血管方向分化,导致骨内血供、骨组织结构的破坏。课题组前期研究结果表明骨痹通消颗粒可诱导血管形成、抑制成骨细胞凋亡,对激素性股骨头坏死具有一定的防治作用,其机制尚未明确。目的:观察骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗效果,从PTH1R/PKA信号轴探讨其作用机制。方法:采取腹腔注射脂多糖和臀肌注射醋酸泼尼松龙建立激素性股骨头坏死模型,将造模成功的60只C57小鼠随机分成模型组、骨痹通消颗粒组和通络生骨胶囊组,每组20只,另选取12只健康小鼠作为正常对照组,分别灌胃相应药物12周后,苏木精-伊红染色观察股骨头组织形态学变化,酶联免疫吸附测定法检测血清中骨碱性磷酸酶、Ⅰ型氨基端延长肽、甲状旁腺激素、骨钙素、碱性磷酸酶水平,Western blot和RT-qPCR法检测股骨头组织中PTH1R、PKA、MEF2、SOST、GNAS的蛋白及基因表达水平。结果与结论:骨痹通消颗粒可能通过降低小鼠血清甲状旁腺激素水平,抑制PTH1R/PKA信号轴的激活,进一步上调SOST、MEF2的表达,提高骨碱性磷酸酶、Ⅰ型氨基端延长肽、骨钙素、碱性磷酸酶水平,从而改善股骨头坏死情况,与通络生骨胶囊干预效果相当,推测骨痹通消颗粒可能通过调节PTH1R/PKA信号轴发挥防治激素性股骨头坏死的作用。 方祥 周正新 朱磊 芮仞 许茂玉 朱彩玉关键词:通络生骨胶囊 激素性股骨头坏死 PKA 甲状旁腺激素