范梦雪
- 作品数：14 被引量：61H指数：5
- 供职机构：安徽农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省教育厅重点项目安徽省教育厅重点基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇暴露对仔猪海马神经细胞神经递质、脂质过氧化及钙稳态的影响被引量：3
- 2018年
- 本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)暴露对体外培养的仔猪海马神经细胞中神经递质、脂质过氧化及钙稳态的影响,探讨DON的神经毒性作用。以不同质量浓度的DON(0、125、250、500、1 000和2 000 ng/m L)处理仔猪海马神经细胞24 h后,检测细胞中5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、乙酰胆碱(ACH)、γ-氨基丁酸(GABA)、去甲肾上腺素(NE)含量,总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量,钙离子(Ca2+)、钙调蛋白(Ca M)含量以及Ca M m RNA相对表达量。结果表明:与对照组相比,1)当DON浓度为1 000 ng/m L时,5-HT、DA、ACH含量显著升高(P<0.05),GABA含量极显著升高(P<0.01),而NE含量显著降低(P<0.05);当DON浓度为2 000 ng/m L时,5-HT、DA、ACH含量极显著升高(P<0.01)。2)当DON浓度为250 ng/m L时,SOD活性和T-AOC极显著降低(P<0.01);当DON浓度为1 000 ng/m L时,GSH-Px活性显著降低(P<0.05),NO含量极显著降低(P<0.01),而MDA含量极显著升高(P<0.01);当DON浓度为2 000 ng/m L时,CAT活性显著降低(P<0.05),GSH-Px活性极显著降低(P<0.01)。3)当DON浓度为125 ng/m L时,Ca M含量极显著升高(P<0.01);当DON浓度为250 ng/m L及以上时,Ca2+含量和Ca M m RNA相对表达量极显著升高(P<0.01)。综上,DON暴露可改变仔猪海马神经细胞神经递质的分泌及脂质过氧化,并影响钙稳态,对仔猪海马神经细胞具有一定的神经毒性作用。
- 王希春储小燕张娅菲朱雷范梦雪冯士彬李玉吴金节
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇神经递质脂质过氧化钙稳态
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对仔猪海马神经细胞的毒性作用被引量：5
- 2017年
- 为了研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对仔猪海马神经细胞的毒性作用,于体外培养仔猪海马神经细胞至对数生长期,以0、125、250、500、1 000和2 000 ng/m L不同质量浓度的DON对细胞进行染毒处理,应用倒置显微镜和透射电镜观察细胞的形态学变化;Hoechest 33258染色液对细胞核进行标记,观察细胞核的形态学变化;CCK-8试剂盒检测细胞的存活率、乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH漏出率。结果显示,与对照组相比,处理组细胞发生了明显的形态学变化,随着DON质量浓度增加,细胞密度降低、空泡化、染色质浓缩聚集、产生凋亡小体;处理组细胞的存活率明显降低,具有剂量和时间依赖性。LDH漏出率随着DON质量浓度的增加而增加,与对照组相比,当质量浓度达到500 ng/m L以上时,差异极显著(P<0.01)。试验表明,DON对仔猪海马神经细胞具有明显的毒性作用,能够诱导细胞损伤,发生凋亡。
- 范梦雪陈晓芳姜云晶朱电锋冯士彬李玉吴金节王希春
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇海马神经细胞细胞毒性凋亡
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒性的研究进展被引量：21
- 2016年
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),又名呕吐毒素(vomitoxin,VT),是由某些镰刀菌产生的一种真菌毒素,广泛存在于玉米、大麦、小麦等农产品及饲料中。DON对人类以及各种动物有着广泛的毒性效应,可引起多种细胞的凋亡,从而对机体多个系统产生毒害作用,如神经毒性、生殖毒性、免疫毒性以及"三致"作用等。从DON的理化性质、污染状况、毒性作用以及展望进行阐述,为真菌毒素毒性的进一步研究提供理论基础。
- 许伟耿芳芳范梦雪胡文娟宫佳杰林根祥李玉吴金节王希春
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇真菌毒素毒性效应
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇提取、纯化及含量检测被引量：10
- 2017年
- 本试验通过提取和纯化方法的优化,旨在获得高纯度的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)。首先将禾谷镰刀菌孢子液接种于玉米培养基,于27℃30%湿度的条件下培养25d,收集产毒培养基,制成毒素粗提液。经过层析柱2次洗脱,分段收集洗脱液,用薄层色谱法(TLC)确定含DON的洗脱液,合并洗脱液,运用多重结晶法进行纯化,获得DON的纯品,高效液相色谱法(HPLC)进行分析确认。采用该培养方法,每千克玉米培养基可产生DON 56.65 mg,纯化后可得到DON 29.5mg,纯度达到98.1%;HPLC检测条件为:Waters C18柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为乙腈-水(16∶84),流速0.8mL/min,紫外波长218nm,色谱柱柱温30℃;本方法加标回收率为86.9%~100.6%,日内相对标准偏差≤9.42%,日间相对标准偏差≤5.79%。本试验建立的DON提取与纯化方法简单,不需要任何特殊的试剂与设备,且该检测方法回收率高,准确度和精密度均能满足试验要求,为DON纯品的定量提供了技术支撑。
- 姜云晶许伟陈晓芳朱电峰耿芳芳范梦雪宫佳杰李玉冯士彬吴金节王希春
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇高效液相色谱法纯化
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对PC12细胞凋亡的影响被引量：5
- 2016年
- [目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)诱导PC12细胞凋亡及对相关基因Bcl-2、Bax、Bid mRNA和蛋白cleaved-Caspase 3、cleaved-Caspase 9表达水平的影响。[方法]用不同质量浓度的DON(0、125、250、500、1 000和2 000 ng·m L^(-1))对PC12细胞染毒24 h,采用透射电镜观察、流式细胞术、荧光定量PCR、Western-blot等方法,研究DON对PC12细胞的超微结构、凋亡率、凋亡相关基因及蛋白表达的影响。[结果]不同浓度的DON均可诱导细胞凋亡,各试验组细胞凋亡率均极显著高于对照组(P<0.01),并随着染毒剂量的增加而升高,在1 000 ng·m L^(-1)时达到峰值;与对照组相比,各试验组Bax mRNA表达水平和Bax/Bcl-2值均极显著增加(P<0.01),Bcl-2 mRNA表达水平在DON浓度超过500 ng·m L^(-1)时极显著下降(P<0.01),而Bid mRNA表达水平在DON浓度超过250 ng·m L^(-1)时极显著下降(P<0.01);Western-blot检测结果显示,各试验组cleaved-Caspase 9蛋白表达量均极显著高于对照组(P<0.01),而cleaved-Caspase 3蛋白表达量在DON浓度超过500 ng·m L^(-1)时极显著增加。[结论]DON能够诱导PC12细胞发生凋亡,凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Bid及蛋白Caspase3、Caspase9等参与了DON诱导PC12细胞凋亡的调控。
- 许伟范梦雪孟婷婷胡文娟宫佳杰陈晓芳姜云晶朱电峰冯士彬李玉吴金节王希春
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇细胞凋亡PC12细胞BCL-2BAX
- DON提取、纯化及其HPLC检测方法的建立
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)又名呕吐毒素(vomitoxin,VT),是一种主要由禾谷镰刀菌产生的次级代谢产物.DON污染非常广泛,在小麦、大麦、燕麦、玉米中含量较高,世界各地均有报道.动物...
- 许伟耿芳芳范梦雪孟婷婷胡文娟李玉吴金节王希春
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇禾谷镰刀菌高效液相色谱法纯化
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对仔猪海马神经细胞凋亡及线粒体膜电位的影响被引量：5
- 2018年
- [目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对仔猪海马神经细胞的凋亡及其信号通路的影响。[方法]体外培养仔猪海马神经细胞至对数生长期,以不同质量浓度的DON(0、125、250、500、1 000和2 000 ng·mL^(-1))进行处理,采用倒置显微镜和透射电镜观察细胞的形态学变化及线粒体结构,CCK-8试剂盒检测细胞的存活率,流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化,ELISA试剂盒检测caspase-3酶活性,荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Bcl-2和Bax mRNA的表达水平。[结果]DON可显著抑制仔猪海马神经细胞存活率并诱导细胞发生明显的形态学变化,且具有剂量和时间效应;DON可降低线粒体膜电位,增强caspase-3酶活力,并通过上调Bax mRNA和下调Bcl-2 mRNA的表达,增加Bax/Bcl-2值。[结论]DON可通过引起线粒体功能障碍,激活caspases-3并调节Bcl-2家族基因,从而诱导仔猪海马神经细胞凋亡。
- 陈晓芳张娅菲储小燕姜云晶朱电锋范梦雪冯士彬李玉吴金节王希春
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇海马神经细胞凋亡线粒体通路膜电位
- 脱氧雪腐镰刀菌烯醇对雏鸡脂质过氧化反应及脑部形态结构的影响被引量：7
- 2016年
- [目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对雏鸡脑组织形态结构、血清及脑组织中氧化与抗氧化指标的影响,探讨DON的神经毒理作用。[方法]选取120只健康的1日龄海兰蛋雏公鸡,预饲1周后,按单因素试验设计,随机分成4组,每组30只。对照组和试验组饲喂相同的全价饲料,试验组中的低剂量组、中剂量组和高剂量组按采食量分别添加0.27、1.68和12.21 mg·kg-1剂量的DON灌胃染毒,对照组灌服等量的生理盐水,试验从第8天开始,每隔7 d染毒1次,共染毒5次。试验期为36 d。试验结束时,所有雏鸡经翅下静脉采血,分离血清,用于测定过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量等指标;同时每组随机剖杀20只鸡,迅速取脑组织,一部分用于观察脑组织的病理变化及神经细胞的超微结构,另一部分用于测定氧化与抗氧化指标。[结果]与对照组相比,试验组雏鸡血清CAT、SOD和脑组织SOD、GSH-Px活性及NO含量显著降低(P<0.05),各试验组雏鸡血清MDA和高剂量组脑组织MDA含量显著升高(P<0.05),中剂量组和高剂量组血清T-AOC、GSH-Px和脑组织CAT活性及NO含量显著降低(P<0.05),高剂量组脑组织T-AOC活性显著降低(P<0.05);DON可引起试验组雏鸡脑组织产生不同程度的噬神经现象,并伴随部分神经纤维断裂;大脑皮质超微结构显示,随着染毒剂量的增加,试验组鸡脑组织神经元胞体出现不同程度的变性,且与剂量呈正相关。[结论]DON可引起雏鸡血清及脑组织脂质过氧化反应,造成脑组织不同程度损伤,即DON可对雏鸡产生一定的神经毒性。
- 耿芳芳许伟范梦雪宫佳杰胡文娟孟婷婷李玉冯士彬吴金节王希春
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇雏鸡脂质过氧化
- 复合吸附剂对AFB_1和DON联合毒性的脱毒效果被引量：2
- 2017年
- 本试验旨在通过动物体内试验,研究复合吸附剂(CA)对黄曲霉毒素B1(AFB1)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)联合毒性的脱毒效果。选取21日龄昆明系雄性小鼠60只,随机分为5组,每组3个重复,每个重复4只。各试验组小鼠饲喂相同的饲料,第Ⅰ组为对照组,每天灌服生理盐水;第Ⅱ组灌服0.5%CA;第Ⅲ组灌服200μg/kg AFB_1+500μg/kg DON;第Ⅳ组灌服200μg/kg AFB_1+500μg/kg DON+0.1%CA;第Ⅴ组灌服200μg/kg AFB_1+500μg/kg DON+0.5%CA。试验期为30d。分别于试验的第15和第30天,每个重复随机选择2只小鼠经眼球采血,测定血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、r-谷氨酰基转移酶(rGT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)、总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)含量;并取肝脏和脾脏,计算脏器相对指数。结果显示,与对照组相比,在试验15d时,第Ⅲ组小鼠肝脏、脾脏指数,血清AST活性显著升高(P<0.05),ALB含量显著降低(P<0.05),Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ组差异不显著(P>0.05);在30d时,第Ⅲ组小鼠肝脏、脾脏指数、血清AST,ALT,ALP,r-GT活性显著升高(P<0.05),第Ⅳ组小鼠脾脏指数、血清r-GT活性显著升高(P<0.05),小鼠增重量、TP、ALB含量显著降低(P<0.05),SOD活性极显著降低(P<0.01),MDA含量极显著升高(P<0.01),Ⅱ、Ⅴ组差异不显著(P>0.05)。试验表明,CA对机体无副作用,0.5%CA能有效缓解AFB1和DON对小鼠的联合毒性。
- 胡文娟宫佳杰范梦雪许伟孟婷婷李玉冯士彬吴金节王希春
- 关键词：复合吸附剂AFB1DON联合毒性脱毒
- DON暴露对雏鸡神经递质及钙调蛋白含量的影响被引量：5
- 2017年
- 【目的】通过DON暴露体内试验,根据雏鸡脑组织中神经递质含量及钙调蛋白(CAM)含量的变化,研究DON对雏鸡的神经毒性作用。【方法】选取120只健康1日龄海兰蛋鸡(公)预饲1周后,按单因素试验设计随机均分为DON低、中、高剂量组和对照组,对照组和试验组饲喂相同的全价日粮。DON低剂量组、中剂量组和高剂量组分别按采食量中含DON 0.27,1.68和12.21mg/kg的剂量灌胃,对照组灌服等量的生理盐水。试验从第8天开始,每隔7d染毒1次,共染毒5次。试验期为36d。试验结束时,每组随机屠宰20只鸡,迅速取出脑组织,检测神经递质含量和CAM含量的变化。【结果】经高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FD)检测,雏鸡脑组织中未发现5-羟色胺吲哚乙酸(5-HIAA);与对照组相比,DON高剂量组雏鸡脑组织中去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)含量显著升高(P<0.05),而多巴胺(DA)含量显著降低(P<0.05)。与对照组相比,DON中、高剂量组雏鸡神经细胞内游离钙([Ca2+]i)浓度和脑组织中CAM含量显著降低(P<0.05),不同DON剂量组CAM mRNA基因相对表达量均显著降低(P<0.05)。【结论】DON暴露可引起雏鸡神经钙稳态变化,并影响部分神经递质的分泌,对雏鸡具有一定的神经毒性作用。
- 耿芳芳范梦雪姜云晶陈晓芳朱电峰李玉冯士彬吴金节王希春
- 关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇雏鸡脑组织神经递质钙调蛋白
