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王佳佳

作品数：1 被引量：0H指数：0
供职机构：浙江大学药学院浙江省抗肿瘤药物临床前研究重点实验室更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白质
  • 1篇蛋白质类
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光蛋白
  • 1篇转基因
  • 1篇转基因小鼠
  • 1篇小鼠
  • 1篇绿色荧光
  • 1篇绿色荧光蛋白
  • 1篇绿色荧光蛋白...
  • 1篇基因
  • 1篇核糖
  • 1篇核糖体
  • 1篇白质
  • 1篇CD69
  • 1篇EGFP
  • 1篇表达载体构建

机构

  • 1篇浙江大学
  • 1篇浙江大学医学...

作者

  • 1篇赵梦婷
  • 1篇翁勤洁
  • 1篇朱狄峰
  • 1篇汪慧英
  • 1篇胡燕
  • 1篇王佳佳
  • 1篇王静

传媒

  • 1篇浙江大学学报...

年份

  • 1篇2015
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
小鼠pLCK-CD69-IRES-EGFP表达载体构建及CD69转基因小鼠的建立
2015年
目的：构建携小鼠细胞表面活化蛋白CD69和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）在细胞内核糖体切入位点（IRES）的表达载体pLCK—CD69-IRES—EGFP，并基于此创建CD69转基因小鼠。方法：首先通过小鼠肺组织提取RNA，逆转录成为cDNA，经过PubMed搜索设计PCR引物，PCR法扩增mCD69片断，接着将该DNA片段经测序验证后接入pInsulater—LCK—IRES—EGFP质粒，构建pLCK—CD69-IRES—EGFP转基因载体；再将其转染到293T细胞中，通过荧光显微镜技术确定其在293T细胞中的表达状况；最后将载体显微注射入受精卵并移植入假孕母小鼠，出生小鼠取尾经PCR鉴定获得阳性首建鼠，并通过荧光显微镜和流式细胞术确定淋巴细胞上CD69的表达。结果：经酶切、DNA测序鉴定证实pLCK—CD69-IRES—EGFP表达载体构建成功；荧光倒置显微镜检查证实其在转染的293T细胞内的蛋白表达；小鼠取尾PCR鉴定明确CD69转基因小鼠创建成功；CD69转基因小鼠有外周血淋巴细胞的减少及静息状态下CD69的表达。结论：成功构建pLCK-CD69-IRES—EGFP表达载体及制备CD69转基因小鼠，为CD69在炎症性疾病中作用的整体模型研究奠定了基础。
王静胡燕谭笔琴王佳佳赵梦婷翁勤洁朱狄峰汪慧英
关键词：核糖体
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