卢剑功
- 作品数：5 被引量：32H指数：3
- 供职机构：山西医科大学第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省卫生厅科技攻关计划项目山西省基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 海藻酸钠凝胶球复合软骨细胞体内外降解对比分析被引量：4
- 2016年
- [目的]对比分析复合软骨细胞的海藻酸钠凝胶球在体内外的降解特点。[方法]取2个月龄新西兰兔5只,酶解消化获取膝关节软骨细胞,与海藻酸钠混合制成细胞密度为5.8×106/ml的混悬液,制成体积为25μl软骨细胞-海藻酸钠凝胶球,在6孔板中进行体外培养对照;体内组取4个月龄新西兰兔36只,双侧股骨滑车行直径4 mm的全层软骨缺损,并将软骨细胞-海藻酸钠凝胶球置入缺损处并经MRI评估缺损模型。分别于1、2、4、6周,通过倒置显微镜观察体外对照海藻酸钠降解情况;通过MRI、大体显微镜和番红O染色观察体内组中海藻酸钠凝胶球体内降解过程。[结果]大体显微观察体外对照组中1周海藻酸钠凝胶球边界清楚,4周凝胶球边界模糊不清,6周藻酸钠边界消失且成糊状。体内组中Roberts MRI评价修复效果显示4周(2.25±0.500)与1周(1.00±0.817)相比差异有统计学意义(t=2.611 P=0.0401),与2周(1.25±0.500)相比差异有统计学意义(t=2.828,P=0.0300),与6周(2.75±0.500)相比差异无统计学意义(t=1.416,P=0.2070);大体观察1周时凝胶球开始液化,4周时海藻酸钠完全消失,且随着凝胶球的降解,缺损以组织修复;番红O染色示实验组修复1、2、4、6周后分别表现为无修复、部分纤维修复、大部分修复、完全纤维修复。[结论]与体外对比,复合软骨细胞的海藻酸钠凝胶球在兔膝关节内生物相容性较好,降解时间明显缩短,大约4周吸收完全,可以为临床应用提供理论依据。
- 赵昱段王平卢剑功甄俊平段志青李鹏翠卫小春
- 关键词：体外软骨细胞海藻酸钠降解
- POSTN蛋白对老年大鼠膝胫骨平台软骨细胞增殖的影响被引量：4
- 2018年
- 目的探讨POSTN蛋白对老年大鼠膝胫骨平台软骨细胞增殖的影响。方法体外分离培养20月龄SD雌性大鼠膝胫骨平台软骨细胞至第3代,分为3组:培养液注射POSTN蛋白组、注射PBS组、注射抗POSTN蛋白组,使用EDU检测软骨细胞增殖率。分别于24、48、72 h观测各组软骨细胞增殖情况,同时使用免疫组织化学技术观测软骨细胞中Notch1蛋白表达情况;20月龄SD大鼠30只,随机分为3组:注射POSTN蛋白组、注射PBS组、注射抗POSTN蛋白组。分别于1、3、5 d连续向一侧膝关节腔注射3次相关试剂,并在1 d时关节腔注射EDU,2周后处死大鼠取膝胫骨平台,观测软骨细胞增殖情况。组间比较使用单因素方差分析。结果24 h时体外培养细胞增殖率3组间差异有统计学意义(F=27.32,P=0.017),注射POSTN蛋白组[(23±8)%]和PBS组[(21±10)%]细胞增殖率较抗POSTN蛋白组[(16±5)%]高(P=0.003,P=0.011);48 h时体外培养细胞增殖率3组间差异有统计学意义(F=35.34,P<0.01),注射POSTN蛋白组细胞[(36±11)%]增殖率较其他2组[(22±6)%、(18±6)%]高(P=0.021,P<0.01);72 h体外培养细胞增殖率3组间差异有统计学意义(F=52.62,P<0.01),注射POSTN蛋白组细胞增殖率[(56±17)%]较注射PBS组[(31±8)%]、抗POSTN蛋白组[(26±7)%]高(P=0.007,P<0.01),注射PBS组较注射抗POSTN蛋白组高(P<0.01);Notch1蛋白在注射POSTN蛋白组软骨细胞表达最多,在抗POSTN蛋白组最少。大鼠膝内侧胫骨平台软骨细胞2周增殖率3组间差异有统计学意义(F=26.72,P<0.01),关节腔注射POSTN蛋白组[(36±14)%]细胞增殖率较注射PBS组[(19±7)%]、注射抗POSTN蛋白组[(10±4)%]高(P=0.003,P<0.01),注射PBS组较注射抗POSTN蛋白组细胞增殖率高(P=0.031)。结论POSTN蛋白可以促进老年大鼠膝胫骨平台软骨细胞的增殖,而抗POSTN蛋白可以减缓软骨细胞的增殖;POSTN蛋白可能通过激活Notch信号通路来促进软骨细胞的增殖。
- 王小健陈韬予韩鹏飞郭丽赵瑞鹏顾晓东卢剑功苏云星魏垒
- 关键词：软骨细胞增殖NOTCH通路
- 血清中骨关节炎生物标记物与关节软骨早期损伤关系被引量：19
- 2016年
- 目的探讨血清中6种OA相关生物标记物与关节软骨损伤的关系。方法本研究共纳入2013年6月至12月入住我院关节外科79例患者。其中男性36例，女性43例，平均年龄（42±17）岁。膝OA患者共23例，其中11例行人工膝关节表面置换，12例行关节镜下膝关节清理术；因外伤致前交叉韧带断裂行前交叉韧带重建患者28例，半月板损伤患者28例。关节软骨损伤评分依据关节镜下0uterbridge软骨损伤评分。采用ELISA试验进行检测以上患者血清中6种生物标记物：软骨寡聚基质蛋白（COMP），Ⅱ型胶原羧基端端肽（CTX—Ⅱ），MMP-3，透明质酸，Ⅲ型前胶原氨基端前肽（PⅢNP），超氧化物歧化酶（SOD）。计量资料采用；挡表示，多组间比较采用单因素方差分析，两因素间相关性分析采用Spearman相关分析。结果COMP、CTX—11、MMP-3、透明质酸、PⅢNP在血清中的浓度随着软骨损伤的程度加重有逐渐升高的趋势，尤其在Outerbridge评分4分组时[COMP（8815±2225）ng／ml；透明质酸（458±158）ng/ml；CTX-Ⅱ（1．82±0．87）ng／ml；MMP-3（54±12）n∥ml；PmNP（4．70±1．06）ng／m1]浓度最高（P〈0．05），而SOD则随着软骨损伤的程度加重而逐渐降低，在Outerbridge评分4分组SOD[（103±11）U／m1]浓度最低（P〈0．05）。COMP、CTX-Ⅱ、MMP-3、透明质酸、PⅢNP与关节软骨损伤程度均呈正相关，其中COMP的相关性最高（r=-0．721，P〈0．01）。SOD与关节软骨损伤程度呈负相关（r=-0．593，P〈0．01）。透明质酸和COMP在轻度软骨损伤患者组（Outerbridge评分1分组和Outerbridge评分2分组）明显升高（P〈0．05），且与年龄、性别、BMI、发病时间呈弱相关性。结论血清中COMP、CTX-Ⅱ、MMP-3、透明质酸、PmNP、SOD等OA相关生物标记物与软骨损伤程度有一定相关性，只有COMP和透明质酸可用于关节软骨早期损伤的诊断。
- 焦强魏垒卫小春陈崇伟张志强尹崑李鹏翠郭丽闫艳霞卢剑功
- 关键词：骨关节炎生物标记物
- 应用同位素标记相对和绝对定量蛋白质组学方法筛选骨关节炎患者关节液差异蛋白被引量：3
- 2017年
- 目的应用同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）联合液相串联质谱技术分析骨关节炎患者关节液中差异蛋白，寻找潜在的骨关节炎生物标记物。方法30例患者依据K-L评分分为对照组（K-L评分0级），早期OA患者（K-L评分Ⅱ级）、晚期OA患者（K-L评分Ⅳ级），每组10例。收集3组患者的膝关节液，经去除高丰度蛋白处理后行iTRAQ标记联合液相串联质谱技术检测，对检测结果进行Gene ontology、Pathway等分析，寻找3组之间明显差异蛋白。2组间比较采用t检验。结果本研究从关节液中共检测出1 283种蛋白，其中有268种蛋白为首次在关节液中发现。早期OA患者与对照组关节液中差异蛋白相比上调72种，下调249种；晚期OA患者与对照组关节液中差异蛋白相比上调128种，下调141种；晚期OA患者与早期OA患者关节液中差异蛋白相比上调128种，下调141种。3组之间明显差异且上调的蛋白共有8种。结论应用iTRAQ技术可以从关节液中检测出大量蛋白；通过对这些蛋白的深入分析，有助于了解OA的发病机制及发现新的OA生物标记物。
- 焦强魏垒卫小春张志强尹崑李鹏翠郭丽闫艳霞卢剑功
- 关键词：骨关节炎同位素标记蛋白质组学ITRAQ
- 关节软骨细胞周基质生物力学特性的研究新进展被引量：2
- 2015年
- 关节软骨细胞周基质(pericellular matrix,PCM)是包绕于软骨细胞周围的一层狭窄基质条带,其与所包绕的软骨细胞共同构成软骨单位,而PCM的生化和生物力学特性明显不同于细胞外基质(extracellular matrix,ECM)[1]。大量的研究已证实PCM富含Ⅵ型胶原和基底膜蛋白多糖,而且对软骨细胞的生化特性及生物力学信号的传导起到很重要的作用。经微管吸吮、原位成像技术。
- 赵昱段王平韩俊亮卢剑功郭丽李鹏翠王小虎卫小春
- 关键词：生物力学特性关节软骨软件模型原子力显微镜软骨组织微环
