刘光亮 作品数:25 被引量:12 H指数:2 供职机构: 中国农业科学院兰州兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家现代农业产业技术体系建设项目 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
一种猪肠道冠状病毒4重荧光定量PCR检测试剂盒 发明公开一种猪肠道冠状病毒4重荧光定量PCR检测试剂盒,其内包括有序列为SEQ ID No.1~SEQ ID No.8的八条六碱基随机反转录引物,及序列为SEQ ID No.9~SEQ ID No.12的四条探针引物。本... 刘光亮 陈佳宁 黄鑫文献传递 猪IgA类别转换后转录本α长、短序列 本发明公开猪IgA<Sup>+</Sup>B细胞类别转换重组的标志物‑转录本α长、短序列:IDNo.9和SEQ ID No.10,以及猪IgA<Sup>+</Sup>B细胞类别转换重组的检测方法。本发明所述的检测方法是将... 刘光亮 刘果 王彬海南省奶源和养殖环境主要肠杆菌科细菌的分布及基因分型 2023年 本研究从2021年海南省两个奶牛场采集的52份样本中分离肠杆菌科细菌,并对分离菌株进行了毒力基因、质粒型和生物被膜形成能力检测及肠杆菌科细菌基因间重复序列分子分型(ERIC-PCR)研究,以期明确牛奶及奶牛场环境中肠杆菌科细菌分布流行状况及其生物学特性。首先,采用16S rDNA PCR和ERIC-PCR对分离的肠杆菌科细菌进行鉴定和去重,结果显示52份样本中分离到肠杆菌科细菌49株,其中大肠埃希菌(Escherichia coli)32株,肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)13株,阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)3株,产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)1株;其次,采用PCR方法进行了分离菌株的毒力基因检测,结果显示,ompA的检出率最高;之后,采用CARATTOLI创建的基于PCR的质粒复制子分型,结果显示K质粒的检出率最高;采用刚果红琼脂法对分离菌株进行了生物被膜形成能力定性检测,发现49株肠杆菌科细菌中有37株指示有生物被膜形成能力;最后,通过ERIC-PCR分型进行了肠杆菌科细菌的亲缘关系和遗传多样性分析,发现49株肠杆菌科菌株可划分为17型(Ⅰ~ⅩⅦ),Ⅵ型为优势型(均为Escherichia coli),共20株。整体研究表明肠杆菌科细菌在奶源环境中广泛存在、生物特性多样,推测具有一定的致病力和耐药性,引起人类和动物疾病风险较高,提示养殖、运输中的卫生和规范操作至关重要。 郝若晨 唐敏嘉 刘光亮 刘光亮 张艳 尚若锋 尚若锋 曹宗喜关键词:肠杆菌科细菌 分子分型 生物被膜 一种猪病毒性腹泻病毒5重RT-PCR检测试剂盒 本发明公开一种“猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪札幌病毒和猪嵴病毒”的5重RT-PCR检测方法以及试剂盒。本发明的试剂盒中包括有10条特异性扩增引物,在其使用时以待检样品的总RNA,利用6碱基随机引物... 刘光亮 李宝玉 付钰广 陈佳宁 兰喜 丁光明文献传递 猪伪狂犬病毒间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量:8 2019年 为了满足我国现阶段猪伪狂犬病病毒(PRV)高频突变引发新疫情诊断的需求,本实验通过生物信息学分析比较,设计合成了针对PRV g B糖蛋白高度保守的抗原优势表位区肽段,命名为g B872。以此肽段为包被抗原,经条件优化建立了新型的PRV-g B间接ELISA抗体检测方法。该ELISA方法检测结果显示,其仅对PRV血清检测为阳性,而与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒(O型)、猪细小病毒、猪圆环病毒2型等主要猪源病毒阳性血清均无交叉反应,表明该方法具有较强的特异性;最低检测下限血清稀释度为1∶128,高于IDEXX PRV/ADV g B抗体检测试剂盒检测下限稀释度(1∶4),表明该方法敏感性高;批内、批间重复性试验结果显示,变异系数均低于10%,重复性良好。利用该方法与Bio Chek PRV-g B抗体检测试剂盒检测90份临床血清样品,对比结果分析显示,两者阳性符合率为100%,阴性符合率为97.67%,总体符合率为97.78%;同时,采用该方法与IDEXX-g I(gE)和IDEXX-g B试剂盒分别对野毒感染血清和疫苗免疫血清同时检测,该方法可以准确识别野毒阳性血清和疫苗免疫阳性血清,与IDEXX两种试剂盒的结果一致。本研究建立的间接ELISA检测方法对PRV疫苗免疫效果评价、流行病学调查及防控提供了可靠的方法。 刘旻翾 丁光明 付钰广 刘爱红 陈佳宁 李宝玉 曾巧英 刘光亮关键词:猪伪狂犬病毒 肽段 间接ELISA 一种猪博卡病毒G3型的多肽-ELISA抗体检测试剂盒 本发明公开了一种猪博卡病毒G3型的多肽‑ELISA抗体检测试剂盒,属于生物技术检测领域。本发明根据现有的猪博卡病毒G3基因群序列中VP1蛋白的氨基酸保守片段设计,再通过体外人工合成方法获得检测猪博卡病毒G3型的特异性多肽... 付钰广 弓超 张岳 李宝玉 杨彬 刘光亮3-脱氮腺苷的用途 本发明涉及如式1示的一种已知化合物3‑脱氮腺苷(3‑Deazaadenosine,3DAA)的新用途,本发明所述用途是将3‑脱氮腺苷用于扩增猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrheavirus,... 陈佳宁 王泽美 刘光亮一种猪流行性腹泻病毒感染模型及其构建方法和应用 本发明公开一种猪流行性腹泻病毒感染的动物模型及其构建方法和应用。本发明将猪流行性腹泻病毒颅内注射方式感染哺乳动物,该模型可模拟病毒在新生猪体内诱导的腹泻症状,可为下一步进行病毒毒力评价、药物的抗病毒治疗和疫苗的免疫保护效... 陈佳宁 王泽美 邵永恒 陈庆波 刘光亮猪α环形转录本αCT基因及应用 本发明公开猪α环形转录本αCT基因及应用,其序列为SEQ ID No.11。本发明所述的检测方法是将从将待检猪的淋巴组织样品中提取RNA反转录,再以所得到的cDNA为待检模板,用本发明公开的引物序列SEQ ID No.1... 刘光亮 刘果 王彬一种液体细菌的接菌装置 本实用新型一种在平皿内进行液体细菌涂布作业的接菌装置。本实用新型由:一个涂菌环,与涂菌环相固定的连杆构成,其中涂菌环用截面为圆形、直径为3至5毫米的杆制成,其中涂菌环的直径为15至20毫米,另外本实用新型的连杆上还设置有... 李宝玉 兰喜 刘光亮 殷相平 朱启运文献传递