张世伟
- 作品数：4 被引量：8H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：安徽省年度重点科研项目安徽省教育厅重点科研项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 新城疫病毒调控宿主YB-1蛋白的初步研究
- 张世伟仇旭升丁铲周昌娈孙英杰谭磊宋翠萍孟春春廖瑛茅翔王桂军
- 新城疫病毒调控宿主YB-1蛋白的初步研究
- 2016年
- 为了揭示YB-1蛋白在新城疫病毒(NDV)感染中的作用,对NDV感染细胞中YB-1表达水平以及亚细胞定位的变化进行了初步探索。利用RT-PCR技术,从鸡胚成纤维细胞中扩增了鸡源YB-1蛋白基因,序列分析结果显示其与其他物种YB-1有较高的相似性,与人YB-1的核苷酸和氨基酸相似性分别为88.3%和78.9%。随后利用间接免疫荧光技术检测了感染NDV强毒株Herts/33的He La和DF-1细胞中内源性YB-1蛋白的亚细胞定位变化,用q RT-PCR方法检测了YB-1 m RNA表达水平,通过Western-blot检测了YB-1蛋白水平的时相变化。结果显示,He La细胞中YB-1主要存在于细胞质,而禽源DF-1细胞YB-1集中在细胞核内;感染NDV后,两种细胞中的YB-1蛋白均在细胞质内呈现颗粒化聚集,同时在NDV感染后期He La细胞中YB-1蛋白出现少量降解。该研究初步揭示了NDV感染过程中YB-1蛋白的迁移现象,推测与NDV的复制过程相关,其具体的作用机制以及对NDV复制的影响尚待更深入的研究。
- 张世伟仇旭升周昌娈孙英杰詹媛谭磊宋翠萍孟春春廖瑛茅翔丁铲王桂军
- 关键词：新城疫病毒YB-1蛋白降解
- 新城疫病毒调控宿主YB-1蛋白的初步研究
- YB-1蛋白是最早发现的Y-box结合蛋白之一,广泛参与细胞各种生理和生化反应,而最新的研究表明YB-1参与了很多RNA病毒的复制过程。新城疫病毒是引起鸡和多种禽类的急性高度接触性传染病的一类单股负链的RNA病毒。为了研...
- 张世伟仇旭升周昌娈孙英杰谭磊宋翠萍孟春春廖瑛茅翔丁铲王桂军
- 关键词：新城疫病毒YB-1蛋白降解
- 文献传递
- 坦布苏病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用被引量：8
- 2015年
- 为建立检测坦布苏病毒的SYBR GreenⅠ绝对荧光定量RT-PCR,针对坦布苏病毒E基因设计1对特异性引物,用PCR扩增E基因后将其连接到pMD19-T载体上构建重组质粒。重组质粒经PCR及测序鉴定后,作为阳性模板绘制了SYBR GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线,并进行特异性、敏感性和重复性试验。结果显示,经反应条件优化后,绘制的SYBR GreenⅠ绝对荧光定量RT-PCR的标准曲线的线性关系显著(r2>0.999),平均试验间变异系数为0.26%;检测敏感性可达到2×101 copies/μL。应用该方法对人工感染坦布苏病毒的鸭组织进行的检测结果显示,从36份病料组织中检出35份为阳性,检出率为97%。结果表明,成功建立了检测坦布苏病毒的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR,该方法较常规PCR更快捷、敏感、准确,适用于坦布苏病毒临床样品的检测。
- 王楠楠刘芳许漩张世伟聂睿殷冬冬刘光清王桂军
- 关键词：SYBRE基因
