王琦 作品数:9 被引量:17 H指数:3 供职机构: 淮海工学院 更多>> 发文基金: 国家级大学生创新创业训练计划 江苏省自然科学基金 江苏省高校自然科学研究项目 更多>> 相关领域: 农业科学 轻工技术与工程 生物学 化学工程 更多>>
两株抗菌海洋细菌对白色念珠菌的抗菌作用稳定性研究 被引量:5 2016年 为了明确海洋细菌GM-1与变异菌株GM-1-2菌株的抗菌特性,以白色念珠菌(Candidaalbicans)为指示菌,采用牛津杯法测定海洋细菌GM-1及其变异菌株GM-1-2菌株的抑菌作用及其稳定性,比较2个菌株发酵液的抑菌作用。结果表明:GM-1和GM-1-2菌株及无菌发酵液对白色念珠菌均具有明显的抑制作用,变异后的GM-1-2菌株抑菌作用下降;两个菌株的抑菌作用在不同条件下稳定性不同。GM-1菌株发酵液100℃处理2h抑菌作用无明显变化,121℃处理20min抑菌作用明显下降;GM-1-2菌株在80℃处理2h抑菌作用无明显变化,100℃处理2h抑菌作用降低,121℃处理2h抑菌作用消失;2个菌株的发酵液的抑菌作用在pH6-8条件与未处理的对照无显著差异,pH高于8或低于6的条件下处理24h抑菌作用显著下降;发酵液经紫外线、光照以及胃蛋白酶、胰蛋白酶和蛋白酶K分别处理不同时间,其抑菌作用与对照无显著差异。表明海洋细菌GM-1及其变异菌株GM-1-2无菌发酵液对白色念珠菌的抑制作用较稳定,菌株变异后抑菌作用及其对温度的稳定性有所下降。 王琦 汪晶晶 顾春霞 贾宝芝 王军强 马桂珍 暴增海 江淑娟 王淑芳关键词:海洋细菌 白色念珠菌 发酵液 抑菌作用 海洋解淀粉芽孢杆菌GM-1变异菌株的特性及其抑菌作用研究 被引量:2 2016年 为了明确海洋解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)GM-1自发突变菌株的变异与抗菌作用的关系,进一步获得优良菌种,通过形态学观察、生理生化试验及16S r DNA和gyr B基因序列分析,对变异菌株GM-1-2特性进行分析;以8种植物病菌为供试菌,采用平板对峙法和牛津杯法分别测定变异菌株GM-1-2及其发酵液的抑菌作用;采用硫酸铵沉淀法对变异菌株产生的抑菌物质进行初步分析。结果发现,变异菌株GM-1-2的菌落形态、颜色、菌体大小与原始菌株GM-1存在明显差异,但其生理生化特性、16S r DNA和gyr B序列与解淀粉芽孢杆菌的同源性等均与原始菌株相同。变异菌株GM-1-2及其发酵液对小麦根腐病菌、棉花黄萎病菌、小麦赤霉病菌、大豆菌核病菌、小麦雪腐病菌、甘蓝枯萎病菌、斑点落叶病菌、黄瓜枯萎病菌的菌丝生长均有较强的抑制作用,且抑制作用明显高于原始菌株GM-1,其中菌株的抑菌带宽度提高了0.2-9.0 mm,无菌发酵液的抑制率提高了1.1%-153.7%。变异菌株的抑菌物质主要存在于硫酸铵沉淀中,沉淀后的上清液无明显的抑菌作用。以上结果表明,变异菌株GM-1-2的抑菌活性提高,其产生的抑菌物质与原始菌株存在差异,具有潜在的开发价值。 汪晶晶 王琦 王军强 顾春霞 暴增海 马桂珍 王淑芳 贾杰关键词:RDNA 抑菌作用 海洋细菌L_1-9双抗菌株的定殖能力及其对黄瓜枯萎病的防治作用 被引量:3 2016年 采用抗生素标记法,对海洋多黏类芽孢杆菌L1-9菌株进行标记,抗性菌株L1-9Str,rif对链霉素和利福平的抗性浓度分别为160μg/m L和20μg/m L。双抗菌株L1-9Str,rif的抑菌特性及其对链霉素和利福平的抗性经多次传代仍比较稳定。盆栽试验表明,该双抗菌株能在黄瓜根部土壤及根组织、茎基部、子叶和真叶组织中定殖。菌株L1-9Str,rif在黄瓜外根际、根际和根表土壤及黄瓜组织中的定殖动态基本一致,初期黄瓜组织中L1-9Str,rif菌量较少,随着时间的延长,菌量逐渐增加,达到高峰后逐渐减少。菌株L1-9Str,rif在根表土壤中菌量最多(1.76×109 CFU/g),其次是根际土壤,外根际土壤中菌量较少;在黄瓜组织中,菌株L1-9Str,rif其在子叶中的定殖能力最强(5.63×104 CFU/g),其次是根和茎基部(0-2 cm);调查至第26 d时在根部土壤中的含菌量仍保持在稳定的水平,其中根表土壤中含菌量最高(2.41×107 CFU/g),在黄瓜组织样品中,子叶中的含菌量最高(4.15×104 CFU/g);温室防病实验结果表明,菌株L1-9和L1-9Str,rif菌株对黄瓜枯萎病具有良好的防治效果,不同时期防效均达70%以上。上述结果表明来自海洋的多黏类芽孢杆菌L1-9菌株能在黄瓜根部土壤及幼苗组织中定殖,是一株有潜力的黄瓜枯萎病生防菌株。 王军强 汪晶晶 王琦 马桂珍 暴增海 王淑芳 周向红关键词:海洋细菌 黄瓜枯萎病 定殖 抗白色念珠菌海洋解淀粉芽孢杆菌GM-1-2培养基和摇瓶发酵条件优化 GM-1-2菌株是由连云港海域海水中分离到的海洋解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) GM-1菌株变异而来,其菌株及发酵液对白色念珠菌(Canidia albicans)、小麦根腐病菌(... 汪晶晶 曹雪梅 王军强 王琦 暴增海 马桂珍氧化胁迫对粉红螺旋聚孢霉生长和产厚垣孢子的影响 被引量:2 2018年 通过改变液体发酵通气量和添加不同种类活性氧(O2-,H_2O_2,OH·),研究氧化胁迫对粉红螺旋聚孢霉67-1菌丝生长和产厚垣孢子的影响。结果表明,氧化胁迫对真菌菌丝和孢子的影响不同。低氧胁迫下,67-1菌丝生长状态发生改变,培养液装量越多,菌丝分枝越少,并且厚垣孢子产量越低。发酵过程中添加一定量的活性氧可以调控粉红螺旋聚孢霉厚垣孢子的形成。接种前添加5-6 mmol/L H_2O_2,菌株产厚垣孢子水平显著提高,浓度达到9 mmol/L时,67-1生长和产孢完全受到抑制。培养16 h后添加,67-1对H_2O_2的耐受力增强。培养基中添加甲萘醌能够抑制厚垣孢子的形成,培养16 h后添加350μmol/L甲萘醌则可以提高67-1厚垣孢子的产量。在Fe2+-H_2O_2体系中,不同添加时间高氧胁迫均能够显著促进厚垣孢子的生成(P<0.05)。 王琦 冯静红 孙占斌 孙占斌 李世东 李世东 孙漫红关键词:氧化胁迫 活性氧 厚垣孢子 海洋细菌GM-1-1菌株摇瓶发酵培养基和发酵条件优化 GM-1-1菌株是从连云港海域分离得到的一种海洋解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),其代谢产物对许多真菌性病害具有明显的抑制作用.本试验对GM-1-1菌株进行摇瓶发酵培养基和发酵条件优... 曹雪梅 汪晶晶 王军强 王琦 马桂珍 暴增海关键词:单因素试验 培养基优化 海洋细菌GM-1-1菌株摇瓶发酵培养基和发酵条件优化 被引量:4 2017年 GM-1-1菌株是从连云港海域分离到的一株对多种病原真菌具有较好抑制作用的海洋解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),为了提高该菌株发酵液的抑菌活性,以发酵液的菌体密度及对白色念珠菌(Candida albicain)的抑制作用为检测指标,采用单因素试验和正交试验对GM-1-1菌株的摇瓶发酵培养基成分及发酵条件进行优化。研究结果表明,GM-1-1菌株生长及产生抑菌物质的最佳培养基配方为:糊精20 g/L,牛肉膏15 g/L,MgSO_4 1.4 g/L,pH7.0;最佳发酵条件为:温度28℃,摇床转速220 r/min,培养时间28 h,种子液浓度10~8 cfu/mL时接种量为10%,装液量为50 mL(250 mL三角瓶)。 曹雪梅 汪晶晶 贾杰 李欢 王军强 王琦 马桂珍 暴增海关键词:解淀粉芽孢杆菌 培养基 发酵条件 海洋生防细菌在黄瓜根际土壤的定殖规律 被引量:3 2015年 为揭示土壤初始pH值、温度和有机质含量三因素对多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)L_1-9菌株在黄瓜根际土壤定殖的影响,采用室内盆栽实验,在黄瓜一叶期灌根接种生防菌L_1-9发酵液,设置土壤pH值、温度和有机质含量的不同处理,培养并定期采集黄瓜根际土壤样品,采用实时荧光定量PCR技术检测海洋生防菌L_1-9在黄瓜根际土壤定殖的数量变化.定量数据及其显著性检验结果表明:温度、初始pH值和有机质含量显著影响L_1-9菌株在黄瓜根际土壤中的定殖.土壤初始pH为6、7和8均可定殖.初始pH值为7和8的处理,在多数调查时间内无显著差异,最大为每克干土(8.52±0.18)×10~9拷贝.在存在显著性差异的时间段内,初始pH值为6时,L_1-9菌株在黄瓜根际土壤中数量在同期中最大.15-30℃培养时,最大数量为每克干土(2.13±0.31)×10^(10)拷贝.温度越高,定殖越早,但在较高温度下定殖数量下降较快.高有机质含量可以增加定殖数量,提高定殖能力,最大数量为每克干土(1.15±0.04)×10^(10)拷贝.本研究表明实时荧光定量PCR技术适用于研究土壤根际生防菌的定殖;海洋生防菌L_1-9能够在较宽温度、初始pH值和有机质含量范围内稳定定殖,较低温度、中性偏酸初始pH值和高有机质含量更有利于L_1-9菌株在黄瓜根际土壤中定殖. 王淑芳 汪晶晶 王军强 王琦 马桂珍 李世东 孙漫红 暴增海关键词:生物防治 有机质含量 多粘类芽孢杆菌 实时荧光定量PCR技术 土壤因子对海洋多粘类芽胞杆菌L_1-9在黄瓜根表土壤定殖的影响 被引量:3 2017年 本试验考察了土壤温度、有机质含量和pH对海洋生防细菌多粘类芽胞杆菌L_1-9在黄瓜根表土壤中定殖的影响。采用实时荧光定量PCR方法检测了不同时期黄瓜根表土壤中菌株L_1-9的16S r DNA拷贝数。结果表明,土壤有机质含量、土壤温度和pH对菌株L_1-9在黄瓜根表的定殖有显著影响(P<0.01)。25℃定殖数量最高,为5.79×108拷贝/g土,是15℃时的3.4倍;添加有机肥20~40 g/kg土壤,可以促进菌株L_1-9在黄瓜根际定殖;pH 7时,菌株L_1-9在黄瓜根表土壤中的定殖数量最高。本研究为海洋生防菌L_1-9防治黄瓜土传病害提供了理论依据。 王淑芳 汪晶晶 曹雪梅 李欢 王琦 王军强 马桂珍 暴增海关键词:定殖 实时荧光定量PCR