郭磊
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 供职机构：天津科技大学生物工程学院代谢控制发酵技术国家地方联合工程实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 利用响应面法优化枯草芽孢杆菌产尿苷发酵培养基被引量：5
- 2015年
- 采用响应面法对枯草芽孢杆菌产尿苷发酵培养基进行优化,以期提高尿苷的产量。首先利用PlackettBurman实验设计筛选出影响尿苷产量的3个显著因素:酵母粉,谷氨酸钠,豆粕水解液;在此基础上利用最陡爬坡实验逼近响应值的最佳区域;最后通过中心复合实验和响应面分析确定了影响产苷主要因素的最佳浓度,分别为酵母粉25.6 g/L,谷氨酸钠25.2 g/L,豆粕水解液40.9 m L/L,此时尿苷产量的预测值为13.76 g/L。通过模型的验证实验发现,尿苷的实际产量为13.52 g/L,与模型预测值非常接近,并且比初始培养基提高了164.1%。
- 郭磊吴鹤云张成林徐庆阳徐庆阳陈宁
- 关键词：枯草芽孢杆菌尿苷响应面培养基优化
- 大肠杆菌异亮氨酸生产菌的构建
- 文章介绍了目前国内氨基酸的生产情况，指出由大肠杆菌苏氨酸高产茵改造获得异亮氨酸生产菌的可能性。现阶段已经报道的改造方法主要有：过表达由苏氨酸到异亮氨酸通路上的五种酶；促进异亮氨酸的输出；过表达相关全局调控因子。但是，尚存...
- 刘远梁媛郭磊陈宁
- 关键词：苏氨酸异亮氨酸大肠杆菌
- 关键基因的修饰对枯草芽孢杆菌尿苷合成的影响
- 2016年
- 【目的】探究磷酸核糖焦磷酸(PRPP)合成酶(prs)和氨甲酰磷酸合成酶(pyr AA/pyr AB)的点突变,以及异源5′-核苷酸酶(sdt1)的过表达,对枯草芽孢杆菌尿苷生物合成的影响。【方法】依据推断的变构位点,分别在prs基因和pyr AB基因编码序列中引入点突变;将点突变的prs基因在染色体xyl R位点整合表达,pyr AB基因则在染色体原位被修饰;sdt1基因在染色体sac B位点整合过表达。通过对重组菌摇瓶发酵液中尿苷、胞苷和尿嘧啶的分析,表征相关基因修饰对尿苷合成的影响。【结果】在PRPP合成酶中引入Asn120Ser、Leu135Ile和Glu52Gly或Val312Ala点突变,分别导致尿苷积累量提高67%和96%。进一步在氨甲酰磷酸合成酶中引入Ser948Phe、Thr977Ala和Lys993Ile点突变,导致尿苷积累量又增加了182%,达到6.97 g/L。在此基础上,过表达异源5′-核苷酸酶,导致尿苷产量增加17%,达到8.16 g/L。【结论】PRPP合成酶和氨甲酰磷酸合成酶的酶活或反馈抑制调节机制,是限制尿苷过量合成的重要因素。PRPP合成酶的Asn120Ser和Leu135Ile点突变,以及氨甲酰磷酸合成酶的Ser948Phe、Thr977Ala和Lys993Ile点突变,能够显著促进尿苷合成。PRPP合成酶附加的Glu52Gly或Val312Ala点突变,有利于尿苷合成。异源的嘧啶专一性5′-核苷酸酶的引入,也对尿苷的合成有明显的促进作用。
- 杨绍梅郭磊班睿谢希贤
- 关键词：枯草芽孢杆菌
- ARTP诱变育种技术在菌种选育中的应用
- 诱变育种在菌种选育中一直占有重要的地位,而常规的诱变育种技术存在危险、操作复杂、污染性大以及有益突变率低等特点。近几年发展起来的ARTP(Atmospheric and Room Temperature Plasma,常...
- 郭磊杨磊刘远杨书尧徐庆阳张成林谢希贤陈宁
- 关键词：微生物菌种选育诱变育种
