李韬
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
- 供职机构：贵州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省社会发展科技攻关计划项目贵阳市科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程文化科学更多>>
- 稳定表达hOAT1的HEK293细胞系的建立及鉴定被引量：3
- 2018年
- 目的构建人肾脏近曲小管阴离子转运体1(human organic anion transporter 1,hOAT1)-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)质粒,获得稳定表达pEGFP-hOAT1的HEK-293细胞系。方法构建EGFP与hOAT1的融合基因表达载体pEGFP-hOAT1,并利用FuGENE 6转染试剂将其转染至HEK293细胞中,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况,经G418抗性筛选获得稳定转染细胞株。用RT-PCR法、qRT-PCR法和Western blot技术,检测稳定转染细胞及正常细胞hOAT1 mRNA和蛋白的表达情况,并进一步用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)考察稳定转染细胞的对氨基马尿酸摄取能力,以及丙磺舒对hOAT1的抑制作用。结果使用该文的方法,细胞转染率可达90%。RT-PCR、qRT-PCR、Western blot,以及对氨基马尿酸摄取、丙磺舒抑制实验结果显示,相对于正常组,转染细胞在荧光显微镜下呈绿色荧光,其hOAT1表达均呈阳性(P<0.01);稳定转染细胞的对氨基马尿酸摄取能力明显升高(P<0.05),且丙磺舒对hOAT1有明显的抑制作用(P<0.05)。结论高效快速地建立了稳定高表达hOAT1的HEK293细胞系,为核苷类膦酸类似物这类药物引起的临床剂量依赖性肾毒性的机制研究奠定了模型基础,也为体外研究hOAT1底物或抑制剂的筛选提供了一个便利的工具。
- 李静杨洋肖涛杨洋欧瑜肖涛刘亭
- 关键词：融合蛋白稳定转染HEK293细胞丙磺舒
- 阿德福韦衍生物灌胃给药后的代谢产物阿德福韦在大鼠体内的药动学研究被引量：1
- 2019年
- 目的:建立阿德福韦(PMEA)的含量测定方法,并研究阿德福韦衍生物[阿德福韦前药,阿德福韦-熊去氧胆酸-3-丙基酯,L-亮氨酸-3-丙基酯(PMEA-1c)]灌胃给药后的代谢产物PMEA在大鼠体内的药动学。方法:采用高效液相色谱-串联质谱(HPLCMS/MS)法。色谱柱为BEH C_(18),流动相为0.1%甲酸乙腈-0.1%甲酸水(梯度洗脱),流速为0.25 mL/min,柱温为30℃,进样量为1μL;检测离子对为PMEA质荷比(m/z)274.1→162.1,葛根素(内标)m/z 417.1→267.1。12只大鼠随机分为阿德福韦酯(ADV)组(阳性对照,90 mg/kg)、PMEA-1c组(160 mg/kg),每组6只,分别灌胃给予相应药物1次,于给药后0.083、0.25、0.5、0.75、1、2、4、6、8、10、12、24 h尾静脉取血测定PMEA血药浓度;利用DAS 2.0软件计算相关药动学参数。结果:PMEA检测质量浓度线性范围为6.1～440.0 ng/mL(r=0.998 5),日内、日间精密度和稳定性试验的RSD均<10%(n=3、5、6),准确度为82.16%～97.33%(RSD≤6.4%,n=5),基质效应为95.96%～106.35%(RSD≤4.9%,n=5);ADV组和PMEA-1c组大鼠血浆中PMEA的t_(1/2)分别为(1.762±0.117)、(2.548±0.174)h,AUC_(0-24) h分别为(2 170.059±146.091)、(4 704.257±176.792)μg·h/L,c_(max)分别为(613.092±9.504)、(697.295±15.275)μg/L;与ADV组比较,PMEA-1c组大鼠t_(1/2)、AUC_(0-24 h)、AUC_(0-∞)、c_(max)均显著增加(P<0.01或P<0.001)。结论:建立的方法准确可靠,本实验结果表明PMEA-1c代谢为单室模型,其可作为阿德福韦前药的潜力药物,为阿德福韦前药的继续研究奠定了基础。
- 肖涛杨洋杨洋李静李韬吴帝容李静肖红
- 关键词：阿德福韦高效液相色谱-串联质谱药动学
- 2种花色刺梨花中营养成分分析及其抗氧化活性研究被引量：1
- 2023年
- 以不同颜色的刺梨花为研究对象,对其基本营养成分进行全面分析,并对不同溶剂的刺梨花提取物开展了抗氧化活性评价的研究。结果发现:刺梨花中含有丰富的粗蛋白质、粗脂肪、总糖及膳食纤维。刺梨花中钾含量最高,其次为钙、磷、镁等。刺梨花中维生素C和总类胡萝卜素含量较高。甲醇体系对刺梨花提取物的抗氧化活性强于纯水、乙醇及乙酸乙酯等体系。
- 李韬董楠董楠高秀丽
- 关键词：刺梨花瓣抗氧化活性
- 灯盏乙素甲酯-4’-二肽衍生物的抗氧化活性与对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIE）的保护作用研究
- 目的:对设计合成的一系列灯盏乙素甲酯-4’-二肽衍生物进行生物活性研究,以探索以上衍生物是否具有较灯盏乙素(Scu)更好的抗氧化活性和新生大鼠缺氧缺血性脑病损伤保护作用,为Scu结构改造修饰的深入研究提供理论依据。方法:...
- 李韬
- 关键词：灯盏乙素
- 阿德福韦混膦酯衍生物体外代谢及稳定性研究被引量：5
- 2018年
- 采用超高效液相-飞行时间质谱仪(UPLC-QTOF-MS/MS)和超高效液相-三重四极杆质谱仪(UPLC-MS/MS)考察阿德福韦混膦酯衍生物阿德福韦单L-硫代异亮氨酸乙酯、去氧胆酸丙酯(Q3-I2)的稳定性及体外代谢产物,将Q_3-I_2和对照药阿德福韦酯与人工胃液、人工肠液、大鼠空白血浆和大鼠肝微粒体进行体外共孵育,采用UPLC-MS/MS和UPLC-QTOF-MS分别测定各孵育体系中的化合物剩余质量浓度和肝微粒体体系中的代谢产物,并通过底物消除法计算半衰期和清除率。化合物Q_3-I_2在胃肠道中稳定,延长了血浆、肝微粒体半衰期,同时能降解出活性代谢产物。在体外肝微粒体孵育体系中通过UPLC-QTOF-MS正负离子模式共检测到8种代谢产物,主要包括水解、氧化、乙酰化、葡萄糖醛酸化反应。
- 杨洋李静李静李韬肖涛
- 关键词：衍生物代谢UPLC-MS/MS
- 阳光体育与大学体育文化建设的相互促进研究
- 2016年
- 本研究通过文献资料法、归纳演绎法,并利用案例分析,逻辑分析等分析方法 ,结合大学文化探讨在阳光体育背景下的大学体育文化的构建,重点就大学体育文化的三个层面,即物质文化、制度文化、精神文化的构建进行了积极探索,并结合国内相关的优秀案例进行分析。
- 李韬
- 关键词：阳光体育体育文化
