王乐
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：首都医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 阿霉素在小鼠离体培养脑片中增强Ⅱ型腺相关病毒的转导
- 2015年
- 目的在小鼠离体培养脑片中观察Ⅱ型腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV-2)载体介导的增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的感染,并进一步研究阿霉素促进AAV-2转导的效应。方法离体培养小鼠全脑脑片,在培养基中加入携带EGFP的AAV-2(AV2.EGFP)或阿霉素与AV2.EGFP的混合物,利用荧光显微镜实时观察活细胞中EGFP的表达情况。结果 AV2.EGFP感染脑片6 d后,EGFP稳定表达,同时加入1μmol/L阿霉素可明显增强EGFP表达,阳性细胞数增加至2.8倍,该效果至少可持续6 d。并且,阿霉素与AV2.EGFP同时给药与在AV2.EGFP感染之后给药效果相似。结论阿霉素在小鼠离体培养脑片中可明显增强AAV-2的转导,该研究有望促进AAV-2介导的基因治疗在中枢神经系统疾病中的应用。
- 宫晓丽王乐王玮付夏张婷王晓民
- 关键词：阿霉素腺相关病毒
- α-突触核蛋白在小胶质细胞炎性反应和吞噬功能中的作用研究
- 2018年
- 目的本研究对比观察中枢神经系统中α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)对固有免疫细胞小胶质细胞的炎性反应和吞噬功能的影响。方法离体培养原代小胶质细胞,给予不同浓度的α-syn蛋白或阳性对照细菌脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激,利用荧光微球吞噬实验和溶酶体相关蛋白分化抗原68(clusters of differentiation 68,CD68)的荧光染色实验来观察细胞吞噬功能的改变;利用反转录实时定量聚合酶链反应(reverse transcription-quantitative real-time polymerase chain reaction,RTq PCR)实验观察肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1 beta,IL-1β)等炎性反应因子的表达,评价α-syn或LPS诱导的炎性反应水平。结果α-syn刺激24 h后,小胶质细胞吞噬荧光微球的数目明显增多、CD68表达增加,与LPS作用效果相似。但α-syn对炎性反应因子TNF-α和IL-1β转录水平的改变,以及TNF-α的释放却远低于LPS。结论α-syn可明显增强小胶质细胞的吞噬功能,但对其炎性反应水平影响较小。
- 宫晓丽刘梦茹王乐王乐张婷张婷孙英
- 关键词：Α-突触核蛋白炎性反应
- 脂多糖对肠道α-突触核蛋白表达的影响被引量：2
- 2018年
- 目的腹腔注射细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)构建炎性反应诱导的帕金森病(Parkinson's disease,PD)小鼠模型,检测PD模型小鼠的结肠中α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)的表达情况,以及结肠组织的炎性反应水平,探索炎性反应对PD早期外周结肠组织中关键致病蛋白α-syn表达的影响。方法将雄性的C57BL/6J小鼠采用数字表法随机分为0.9%(质量分数)氯化钠注射液对照组和模型组,给予小鼠单次腹腔注射5 mg/kg LPS或等体积0.9%(质量分数)氯化钠注射液,通过检测外周血中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量和小鼠体质量来评价模型建立情况;通过蛋白免疫印迹检测结肠组织α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)的表达和炎性反应小体的激活情况;通过反转录-聚合酶链反应(reverse transcriptionpolymerase chain reaction,RT-qPCR)检测结肠组织炎性反应因子TNF-α的转录水平。结果 LPS注射后急性期(3 h内),小鼠结肠α-syn蛋白表达增加,并伴随炎性反应小体NOD样受体家族蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)蛋白和TNF-αmRNA的表达增加;LPS注射后慢性期(1个月),小鼠结肠α-syn及NLRP3蛋白表达恢复正常水平,但结肠的炎性反应因子TNF-α较对照组仍明显增加。结论 LPS可以促进α-syn在结肠内的表达,并伴随着结肠组织炎性反应小体激活和炎性反应因子TNF-α的表达,一个月时α-syn和炎性反应小体NLRP3恢复至正常水平,但结肠炎性反应因子TNF-α的持续高表达,很可能是导致LPS诱导的PD模型慢性反应期α-syn蛋白再一次持续升高的原因。
- 刘梦茹宫晓丽王乐王乐张婷张婷
- 关键词：Α-突触核蛋白炎性反应肠道帕金森病
