于正阳
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 小麦wzy2-1基因的克隆及功能分析被引量：2
- 2016年
- 脱水素是一类植物胚胎发育后期丰富蛋白(late embryogenesis abundant protein,LEA蛋白),属于LEA D-11家族,植物受非生物胁迫会大量表达。利用同源克隆技术,从郑引1号小麦中克隆了1个Kn型脱水素基因,命名为wzy2-1。该基因全长1740 bp,编码579个氨基酸,含有9个保守的K片段,与大麦的Dhn5基因具有较高同源性。生物信息学预测该蛋白属于高度亲水性的无序蛋白。通过该蛋白对大肠杆菌的保护作用研究表明,WZY2-1蛋白能够提高大肠杆菌对低温、高温、高盐以及高渗胁迫的耐受性。荧光实时定量PCR分析表明,wzy2-1基因受低温、盐渍、干旱诱导表达,但不受外源ABA诱导,说明wzy2-1基因属于非ABA依赖型脱水素基因。
- 强治全梁雅珺于正阳杜娅张帅朱维宁张林生
- 关键词：小麦脱水素荧光实时定量PCR原核表达
- 小麦TaDRLea3-2基因的克隆及胁迫诱导表达分析被引量：3
- 2016年
- 胚胎发育后期丰富蛋白(late embryogenesis abundant protein,LEA蛋白)是植物体中广泛存在的一类与渗透调节相关的家族蛋白,植物受非生物胁迫会大量表达。该研究采用同源克隆技术,从干旱诱导的小麦品种‘郑引1号’(Triticum aestivum L.)中获得1个新的LEA3家族基因(TaDRLea3-2),该基因全长668bp,编码区为570bp,编码189个氨基酸。生物信息学分析表明该蛋白为亲水性蛋白,二级结构以α-螺旋为主,含有9个由11个氨基酸组成的保守结构域,为典型的LEA3蛋白,存在3个磷酸化位点,无信号肽结构域及跨膜结构域,可能定位于细胞质中;实时定量PCR结果表明,TaDRLea3-2基因受干旱、高盐、低温诱导表达,同时也受外源ABA诱导,推测TaDRLea3-2为ABA依赖型LEA3基因,以不同机制参与小麦对非生物胁迫的应答过程,为深入分析小麦LEA3家族蛋白的抗逆机制奠定了基础。
- 梁雅珺于正阳强智全杜娅朱维宁张大鹏张林生
- 关键词：小麦同源克隆实时定量PCR
- 小麦脱水素wzy1-2基因的遗传转化及干旱胁迫下不同生育期表达水平被引量：1
- 2019年
- 根据同源分析,在脱水素wzy 1-2基因序列中选择298bp的cDNA序列作为干扰片段,将其插入高效植物干扰表达载体pTCK303的多克隆位点,成功构建含反向重复序列的RNA干扰表达载体。采用基因枪法轰击2512个郑引1号小麦的幼胚愈伤组织,获得再生植株26株,对其T 0代再生植株进行特异引物PCR检测,获得6株阳性植株,阳性转化率为0.24%。对脱水素wzy 1-2基因实时定量分析发现,小麦中目的基因表达量显著下降。为进一步了解该基因在小麦整个生长过程中表达模式,选取2个不同抗旱性小麦品种(陕合6号和郑引1号),分别在小麦4个不同生长时期(苗期、分蘖期、拔节期和开花期)进行干旱胁迫处理,分析脱水素wzy 1-2基因的表达规律。结果表明,随着干旱程度增加小麦WZY1-2蛋白的表达量升高;苗期小麦WZY1-2蛋白的表达量均高于其它3个生长时期。Western blot分析显示陕合6号和郑引1号的非特异性条带单一,表明小麦脱水素wzy 1-2是干旱诱导型基因。
- 田野于正阳史学英齐玉红张大鹏张林生
- 关键词：脱水素小麦干旱胁迫基因枪
- 小麦脱水素基因wzy1-2 ORF的克隆、过表达载体的构建及遗传转化
- 在众多阻碍植物正常生长发育的非生物逆境中，干旱是影响小麦产量的主要非生物胁迫之一，植物干旱胁迫机理的研究成为国际研究的热点之一。植物遭受干旱胁迫会表达一系列抗旱相关蛋白，通过其耐旱机制提高自身的适应能力。 干旱可诱导许多...
- 于正阳
- 关键词：小麦脱水素转基因烟草
- 文献传递
- 异源表达WZY2-1基因提高拟南芥植株抗旱性被引量：2
- 2018年
- 脱水素是受细胞失水相关环境诱导表达的一类蛋白家族。所有的脱水素都含有保守的K片段,这段保守序列可以形成两亲性的α-螺旋,这种结构在脱水素发挥功能中起主要作用。小麦WZY2-1基因含有9个K片段,属于K9型的脱水素,能够被低温、干旱和盐胁迫诱导表达。在本实验中,纯化了WZY2-1蛋白,通过体外LDH酶保护实验发现,WZY2-1蛋白具有保护LDH酶活性的功能。通过亚细胞定位分析发现,WZY2-1蛋白主要定位于细胞核和细胞膜。为了进一步说明WZY2-1基因的功能,获得了转WZY2-1基因的拟南芥植株,通过干旱胁迫条件下转基因植株的生理指标和表型分析,发现转WZY2-1基因的拟南芥植株具有较强的抗旱能力。因此,推测小麦WZY2-1基因在植物干旱胁迫条件下具有重要功能。
- 强治全杨文博张帅于正阳史学英王鑫朱维宁张林生
- 关键词：脱水素亚细胞定位
- 小麦干旱响应蛋白WZY2与WZY3-1的功能研究
- 充足的水分条件对植物的生长发和育极为重要。水分亏缺不仅影响植物的地理分布、限制植物生长,还会威胁粮食安全。小麦(Triticum aestivum)是重要的粮食作物,其生长过程常伴随着逆境胁迫的影响。胚胎发育晚期丰富(L...
- 于正阳
- 关键词：LEA蛋白脱水素非生物胁迫转录组测序小麦
- 文献传递
