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Bloom解旋酶基因RNA干扰载体对前列腺癌PC3细胞的抑制作用被引量：5: 2016年; 目的采用RNA干扰(RNAi)技术抑制前列腺癌PC3细胞系中Bloom解旋酶基因的表达,探讨Bloom解旋酶基因表达下调后对PC3细胞的抑制作用。方法使用实验室前期成功构建的两条针对于Bloom解旋酶基因的RNAi载体shRNA-1和shRNA-2转染前列腺癌PC3细胞,以未转染RNAi载体为对照组,分别在转染24、48、72h后通过MTT法检测细胞增殖情况,转染48h后通过Transwell小室法检验细胞侵袭、迁移能力,细胞划痕实验检测细胞迁移情况,Hoechst/PI双染法检测细胞凋亡情况。结果转染RNAi载体后,与未转染对照组相比,各实验时间点的转染组细胞增殖率降低(P<0.05),Transwell细胞侵袭和迁移实验中穿过室膜的细胞数与对照组比均减少(侵袭:119±24、118±30vs 227±38;迁移:122±13、121±47vs 277±32,P<0.05),划痕愈合率与划痕迁移距离均降低,48h时差异有统计学意义(P<0.05),而且细胞凋亡明显增加。结论以RNAi载体干扰Bloom解旋酶基因的表达可抑制前列腺癌PC3细胞的增殖、迁移和侵袭能力并促进其凋亡,为前列腺癌的靶向基因治疗提供了依据。; 罗霂榃许厚强刘忠伟段志强赵佳福吴萍陈福; 关键词：RNA干扰前列腺肿瘤细胞侵袭

敲减BLM解旋酶表达增强前列腺癌PC3细胞对丝裂霉素C的敏感性被引量：11: 2017年; 丝裂霉素C是一种广谱抗肿瘤抗生素,对多种癌症有抗癌作用,其作用原理可使细胞的DNA发生链间交联,引起DNA双链断裂,阻碍DNA的复制,从而抑制肿瘤细胞分裂。临床上主要用于胃癌、肠癌、肝癌及胰腺癌等消化道癌方面的治疗。本文研究丝裂霉素C对转染人BLM解旋酶基因(shRNA载体)前后前列腺癌PC3细胞活性的影响。使用前期成功构建的干扰载体转染PC3细胞,在转染48 h后加药,通过荧光定量PCR、MTT法、Transwell小室实验、细胞划痕实验、流式细胞术,分别检测加药12、24、36 h BLM基因的表达量、PC3细胞增殖能力、侵袭能力、迁移能力及凋亡情况的变化。结果显示,敲减BLM基因表达后的PC3细胞相对于正常PC3细胞其增殖能力、侵袭能力和迁移能力能显著被丝裂霉素C抑制,且丝裂霉素C能显著促进其细胞的凋亡,说明BLM基因低表达的前列腺癌细胞对丝裂霉素C更敏感。研究结果为丝裂霉素C在前列腺癌的临床治疗上奠定了理论基础。; 吴萍许厚强赵佳福刘忠伟段志强陈福谌颖莲; 关键词：丝裂霉素C 前列腺癌细胞细胞活性

甘草次酸抑制前列腺癌细胞侵袭迁移的分子机制研究: BLM解旋酶是RecQ解旋酶家族中的一个重要成员，参与DNA的复制、转录、修复和端粒的维持等细胞代谢活动，在维持染色体的稳定方面起到非常重要的作用。BLM解旋酶的缺陷将会导致Bloom综合症，患者遗传不稳定易患多种类型癌...; 陈福; 关键词：前列腺癌甘草次酸 CASPASE-3基因

甘草次酸调节BLM的转录及PC3细胞的增殖凋亡和迁移侵袭被引量：4: 2017年; [目的]探究甘草次酸(GA)影响前列腺癌(PC3)细胞BLM基因的转录以及细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡的情况。[方法]MTT法检测细胞增殖能力并筛选适宜的药物浓度,荧光定量PCR检测BLM基因的表达量,划痕法检测细胞迁移,Transwell小室检测细胞侵袭,流式细胞仪检测细胞凋亡。[结果]甘草次酸浓度在0.12 mol/L^0.36 mol/L范围时,随着浓度增大,细胞的增殖能力逐渐下降,呈现药物浓度梯度依赖性;当甘草次酸浓度为0.2 mol/L时,PC3细胞中BLM的mRNA的表达量仅有对照组的0.2倍;甘草次酸浓度在0.10 mol/L以上时,细胞的侵袭和迁移能力均显著减小;流式结果显示甘草次酸浓度在0.10 mol/L时,细胞凋亡率为45.25±0.5**,差异极显著(P<0.01)。[结论]甘草次酸浓度为0.15 mol/L以上时,能够下调PC3细胞中BLM基因的转录量(P<0.01),在0.12 mol/L^0.36 mol/L范围时,对PC3细胞的增殖、侵袭、迁移具有抑制作用,对PC3细胞凋亡具有促进作用。; 陈福许厚强段志强赵佳福吴萍谌颖莲; 关键词：甘草次酸前列腺癌细胞

甘草次酸下调Bloom综合征解旋酶的表达及PC3细胞的增殖凋亡和侵袭迁移被引量：7: 2018年; 目的在甘草次酸处理前列腺癌细胞(PC3细胞)的基础上,检测细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡及Bloom综合征(BLM)解旋酶和细胞凋亡因子Caspase-3的表达。方法通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)、Transwell小室、划痕法检和Hoechst/PI双染分别检测细胞的增殖能力、侵袭能力、迁移能力和凋亡率;实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western-blot分别检测检测BLM和Caspase-3基因的转录和蛋白表达。结果 MTT法表明,甘草次酸浓度在0.12 mol·L^(-1)以下时,对细胞的增殖能力没有影响,大于0.12 mol·L^(-1)时,随着药物浓度的增大,细胞的增殖能力逐渐下降;侵袭和划痕表明,甘草次酸浓度在0.16 mol·L^(-1)以上时,细胞的侵袭和迁移能力均显著减小;Hoechst/PI双染显示,甘草次酸浓度在0.12 mol·L^(-1)以上时,细胞发生明显的凋亡;荧光定量PCR表明,甘草次酸浓度在0.12 mol·L^(-1)以上时,随着浓度的增大,PC3细胞中的BLM基因的mRNA的表达量逐渐下降,而Caspase-3基因的表达量逐渐上升;Western blot表明,甘草次酸浓度在0.12 mol·L^(-1)时,BLM解旋酶的表达量明显降低,而Caspase-3蛋白的表达量明显升高。结论甘草次酸抑制PC3细胞的增殖、侵袭和迁移与BLM解旋酶的低表达有关,而甘草次酸促进PC3细胞发生凋亡与细胞凋亡因子Caspase-3高表达有关。; 陈福许厚强段志强赵佳福赵佳福吴萍; 关键词：甘草次酸细胞侵袭

人前列腺癌PC3细胞Bloom解旋酶基因干扰载体的构建被引量：4: 2015年; 通过RNAi技术干扰人前列腺癌PC3细胞Bloom(BLM)解旋酶基因的表达。实验前期根据BLM解旋酶基因序列设计并合成两对sh RNA,插入到CMV-cop GFP-T2A-Puro-H1-mcs载体,构建针对BLM解旋酶基因的重组干扰载体CMV-cop GFP-T2A-Puro-H1-mcs-BLM1、CMV-cop GFPT2A-Puro-H1-mcs-BLM2。经测序载体构建成功后,用脂质体将所构建的载体及阴性对照载体转染前列腺癌PC3细胞,通过荧光定量PCR和Western blot检测转染细胞的BLM解旋酶表达情况。检测结果显示,成功构建了BLM解旋酶RNAi真核表达载体;利用脂质体转染PC3细胞后,荧光定量PCR和Western blot鉴定结果表明,BLM解旋酶的表达水平显著降低,即Bloom RNAi真核表达载体在m RNA和蛋白质水平阻断了BLM解旋酶的表达。; 罗霂榃许厚强刘忠伟段志强赵佳福吴萍陈福; 关键词：前列腺癌PC3细胞

贵州从江香猪FoxO4、PRKAA1基因在不同组织中的表达分析被引量：3: 2017年; 为研究FoxO4、PRKAA1基因在从江香猪不同组织中的表达情况,本实验采用实时荧光定量PCR技术,检测FoxO4、PRKAA1基因的mRNA表达量,分析FoxO4、PRKAA1在贵州从江香猪不同组织的差异表达。结果显示,FoxO4基因mRNA在从江香猪所检测的9个组织样中均有表达,其中在脂肪组织中表达量最高,且差异极显著(p<0.01),在背最长肌组织中表达量最低;PRKAA1基因mRNA在从江香猪所检测的9个组织样中也均有表达,其中在肺组织中表达量最高,且差异极显著(p<0.01),在脂肪组织中表达量次之,在背最长肌组织中表达量最低。FoxO4、PRKAA1基因可能在肌内脂肪(IMF)沉积中发挥重要作用,为进一步研究FoxO4、PRKAA1的功能奠定基础。; 孙成娟许厚强陈伟陈祥周迪赵焕平吴萍张青青陈福; 关键词：荧光定量PCR

猪FoxO4基因cDNA部分序列的克隆及其组织表达被引量：1: 2017年; 为探究FoxO4基因序列和组织表达特征,采用RT-PCR法从猪肝脏中克隆FoxO4基因c DNA的部分序列,采用荧光定量PCR对大白猪、从江香猪2个猪品种的不同组织m RNA表达进行了相对定量分析。结果:获得猪FoxO4基因615 bp编码区序列;FoxO4基因m RNA在大白猪所检测的9个组织样中均有表达,在肺中表达量最高,在脂肪中表达量次之;FoxO4基因m RNA在从江香猪所检测的9个组织样中也均有表达,在脂肪中表达量最高,在肺中表达量次之;在2个品种中FoxO4基因在肺、肾、大肠、脂肪中m RNA表达水平差异极显著(P<0.01)。; 孙成娟许厚强陈伟周迪张青青赵焕平王园园张鸣杨洋吴萍陈福; 关键词：从江香猪大白猪克隆

一种快速获得siRNA干扰BLM解旋酶稳定细胞株的方法: 本发明公开了一种快速获得siRNA干扰BLM解旋酶稳定细胞株的方法，包括下列步骤:1)设计与合成siRNA；2)构建siRNA表达载体；3)克隆转化干扰载体；4)转染shRNA；5)利用流式细胞仪进行阳性细胞分选：将荧光...; 许厚强刘忠伟罗霂榃陈福吴萍; 文献传递

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陈福

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