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小鼠骨髓间充质干细胞体外扩增和分化为神经元样细胞的实验研究被引量：2: 2016年; 目的体外分离和扩增小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),并观察不同方法诱导BMSCs向神经元样细胞分化的差异,以寻找一种效果理想的BMSCs体外诱导方法。方法取昆明小鼠双股骨骨髓,采用全骨髓贴壁法体外纯化扩增BMSCs,流式细胞术检测其表面标志物,并对其进行成脂、成骨诱导鉴定。分别用化学诱导法和共培养法诱导BMSCs分化为神经元样细胞,比较两种方法所获得的神经元样细胞的细胞形态。结果采用全骨髓贴壁法能有效分离小鼠BMSCs,随着传代次数的增加能得到逐渐纯化的BMSCs,而过多的传代次数则出现细胞生长速度缓慢、核固缩、脱离等衰老征象。流式细胞术检测结果显示P4代BMSCs阳性表达CD29和Sca-1,而阴性表达CD11b。具有成脂、成骨诱导分化的能力。共培养法诱导第5天可见神经细胞样形态且细胞突起数量较多并有分支;化学诱导法培养第7天细胞出现较长突起,形成神经样结构。结论采用全骨髓贴壁法能有效分离纯化小鼠BMSCs,通过共培养法诱导BMSCs分化为神经元样细胞效果优于化学诱导法。; 朱晓瓞余资江孙宝飞余彦李玉美罗时鹏肖朝伦贺菊芳; 关键词：小鼠骨髓间充质干细胞扩增分化神经元样细胞

神经干细胞移植治疗周围神经损伤的研究进展被引量：5: 2016年; 周围神经是由脑和脊髓发出的神经根、神经丛、神经干及神经末梢组成的混合神经,包括运动、交感及感觉3种纤维,周围神经损伤后会引起不同程度的神经感觉、运动及交感功能障碍。近年来,周围神经损伤的比率逐年增高,约占创伤患者的2.8%,50%以上的患者在治疗后,运动和感觉功能未恢复到正常。; 贺菊芳余资江; 关键词：神经干细胞周围神经神经损伤细胞移植

大鼠坐骨神经损伤手术时机选择的实验研究被引量：1: 2016年; 目的:构建大鼠坐骨神经V度损伤模型,探寻坐骨神经损伤后最佳手术缝合时机。方法:将42只成年SD大鼠随机均分为对照组、模型组、0、6、12、24及48 h缝合组,对照组仅暴露坐骨神经、模型组剪断右侧股骨段坐骨神经,0、6、12、24及48 h缝合组在剪断右侧股骨段坐骨神经后的相应时点缝合坐骨神经,各组分别于手术后第7、14、21及28天时取坐骨神经损伤段,免疫组织化学法检测血管内皮生长因子(VEGF)的表达、采用Western Blot检测VEGF蛋白表达、HE染色法观察坐骨神经轴突排列分布及髓鞘的改变、透射电镜观察突触形态结构的变化、TUNEL法检测神经细胞的凋亡,比较各组术后神经修复效果。结果:免疫组织化学结果显示,VEGF蛋白在模型组和6 h缝合组术后第7天时表达高于其他组(P<0.05);Western Blot结果显示术后第7天时6 h缝合组术后VEGF蛋白表达高于其他缝合组(P<0.05),HE染色、透射电镜及TUNEL检测结果显示,6 h缝合组与其他缝合组比较,坐骨神经形态学变异程度较小,且凋亡细胞数少。结论:坐骨神经损伤后6 h时给予缝合处理神经修复效果最好,其机制可能与VEGF表达升高有关。; 贺菊芳余资江戈果田广朱晓瓞高帆曹文鹏方丽丽; 关键词：坐骨神经血管内皮生长因子手术时机

SD大鼠胚胎神经干细胞悬浮培养与鉴定被引量：3: 2016年; 目的:研究神经干细胞(NSCs)的分离、培养及鉴定方法。方法:以孕12.5 d SD胚胎鼠端脑为组织来源,应用无血清悬浮培养技术培养、扩增NSCs;NSCs传代2次后,应用Nestin免疫荧光检测NSCs的干细胞特性,Brd U标记法检测细胞增殖能力;诱导贴壁分化后,对分化细胞进行NSE、GFAP免疫荧光鉴定;扫描电镜观察神经球及单个细胞表型。结果:培养出大量悬浮生长的NSCs球,Nestin及Brd U表达阳性;神经球诱导分化后表达NSE、GFAP,表明NSCs可分化为神经元和星形胶质细胞;HE染色可见NSCs细胞核巨大,胞质较少;扫描电镜可观察到单个NSC表面较光滑,且神经球表面的NSCs连接较疏散。结论:应用无血清培养技术体外培养扩增出的胚胎神经干细胞具有自我更新和多向分化能力,经诱导后可分化为神经元和星形胶质细胞。; 贺菊芳余资江朱晓瓞方丽丽王俊婕; 关键词：无血清多向分化

分泌VEGF165的NSCs协同鼠胎膜移植治疗大鼠坐骨神经损伤的前期研究: 目的：通过悬浮培养技术体外分离培养SD大鼠胚胎神经干细胞（Neural Stem Cells，NSCs），并转染pcDNA-EGFP与pcDNA-EGFP-VEGF165质粒;探究超低温冻存对鼠胎膜生物活性的相关指标的影...; 贺菊芳; 关键词：坐骨神经损伤手术时机

NF-κB信号通路在小鼠脑缺血再灌注细胞凋亡中的作用被引量：5: 2016年; 目的初探核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路在小鼠脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)细胞凋亡中的作用。方法通过夹闭小鼠双侧颈总动脉建立动物模型。模型组分为3 h、6 h、12 h、1 d、3 d、7 d、14 d、21 d,共8组。TTC染色确定脑缺血损伤区域,TUNEL法检测不同时间缺血区细胞凋亡数,原位杂交法和Western blotting检测NF-κB信号通路靶基因/蛋白Bcl-2和C-myc mRNA及蛋白表达。PDTC抑制NF-κB信号通路后,TUNEL法和原位杂交检测建模后1 d、7 d、14 d神经细胞凋亡数及Bcl-2和C-myc mRNA变化情况。结果各模型组海马CA3区凋亡细胞数量、Bcl-2 mRNA和C-myc mRNA阳性细胞数及二者蛋白表达量高于正常组和假手术组(P<0.05);PDTC抑制NF-κB信号通路后,各抑制组与对应时间点模型组相比,Bcl-2 mRNA阳性细胞数减少,TUNEL阳性细胞数和C-myc mRNA阳性细胞数增加(P<0.05)。结论 CIRI早期即出现有凋亡细胞数的增加,并在其后较长一段时间内细胞凋亡过程仍存在着持续性的进展;NF-κB信号通路在CIRI病程进展中对神经细胞凋亡起抑制作用,其机制可能通过Bcl-2诱导和C-myc抑制共同发挥调节作用。; 朱晓瓞余资江孙宝飞余彦李玉美罗时鹏肖朝伦贺菊芳; 关键词：脑缺血再灌注细胞凋亡 NF-ΚB信号通路 BCL-2 C-MYC 小鼠

基因工程细胞移植治疗坐骨神经损伤的研究进展被引量：2: 2015年; 坐骨神经是人体最粗大的神经，主要支配股二头肌长头、半腱肌、半膜肌和大收肌、小腿及足的全部肌肉以及除隐神经支配区以外的小腿与足的皮肤感觉。在损伤严重的情况下，远段发生的轴突坏死、髓鞘分解消失和神经鞘膜增生等，即“瓦勒变性”过程，引起股后部肌肉及小腿和足部所有肌肉全部瘫痪，导致膝关节不能屈、踝关节与足趾运动功能完全丧失，呈足下垂，且小腿后外侧和足部感觉丧失，足部出现神经营养性改变，可严重影响伤者的日常生活。; 贺菊芳余资江; 关键词：基因转染坐骨神经损伤

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贺菊芳

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