黄燕霞
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学理学更多>>
- 蓖麻毒素A链在麦胚无细胞系统中的表达被引量：5
- 2015年
- 本试验利用麦胚无细胞系统表达蓖麻毒素A链(RTA):通过PCR方法扩增蓖麻毒素A链基因序列并连接至pMD18-T载体。将测序正确的RTA序列克隆到Flexi表达载体,获得Flexi-RTA重组质粒。将该重组质粒加入到麦胚无细胞表达系统中进行表达。表达产物经SDS-PAGE电泳分析相对分子质量约为32 000,通过Western blot、ELISA实验鉴定为RTA。本方法表达的RTA在蓖麻毒素诊断、疫苗研发、抗癌药物研制等方面具有广阔应用前景。
- 肖世峰许娜姚林芳孙成彪刘洋黄燕霞李松岩万家余王兴龙刘文森
- 关键词：蓖麻毒素A链
- 低剂量RT对小鼠肺泡巨噬细胞TLR4信号通路的影响
- 2018年
- 取SPF级昆明小鼠进行RT雾化攻毒。攻毒后每隔一段时间通过BCA法测定小鼠支气管灌洗液BALF上清中总蛋白浓度，ELISA法测定小鼠BALF中致炎因子TNF-α、IL-6、IL-1β浓度，利用RT—PCR检测小鼠肺泡巨噬细胞TLR4及其信号通路mRNA的表达情况。结果显示：小鼠吸入1／150 LD50剂量雾化RT后，BALF上清总蛋白浓度增加，IL-1β、TNF-α浓度12h时达到最高值，IL-6浓度48h达到最高值。攻毒后12，24h时TLR4表达高于空白组，差异显著（0．01〈P〈0．05）；12h时MyD88表达高于空白组，差异极显著（P〈0．01）。12h时IRAK-1、IRAK-4、TRAF6表达高于空白组，差异显著（0．01〈P〈0．05）。结果表明：小鼠吸入1／150LD50剂量雾化RT，肺部发生炎症且肺泡组织通透性增加；低浓度蓖麻毒素攻毒后可刺激肺泡巨噬细胞TLR4及其信号转导通路下游MyD88、TRAF6、IRAK-1、IRAK-4等相关因子mRNA的表达，主要通过MyD88途径引起肺部炎症反应。
- 王燕柴绍明黄燕霞孙成彪边红许娜刘文森
- 关键词：BALF炎症
- 小鼠肺泡巨噬细胞的分离及鉴定被引量：3
- 2016年
- 目的分离小鼠肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM),并鉴定其纯度和吞噬活性。方法采用肺泡灌洗法分离小鼠AM,分别通过瑞氏-姬姆萨染色法和Diff-Quik染色法鉴定AM的纯度;将FITC标记的大肠埃希菌与AM按不同比例混合(10∶1、15∶1、20∶1)后孵育不同时间(20、25、30 min),荧光倒置显微镜下观察AM的吞噬活性。结果两种染色方法染色时,阳性细胞百分率均在94%以上,Diff-Quik染色法细胞阳性率略高于瑞氏-姬姆萨染色法,染色时间较瑞氏-姬姆萨染色法短,且背景干净无杂质。小鼠AM的吞噬率和吞噬指数随着FITC标记的细菌与AM比例的增加而增大,且随孵育时间的延长呈先升高再降低的趋势。当细菌与细胞比例为20∶1,孵育时间为25 min时,吞噬率和吞噬指数达最大,分别为(63.67±4.04)%和1.41±0.07。结论贴壁培养法可获得较高纯度的小鼠AM,Diff-Quik染色法鉴定巨噬细胞纯度优于瑞氏-姬姆萨染色法,其可代替瑞氏-姬姆萨染色法,成为一种快速、高效的鉴定巨噬细胞纯度的方法。
- 黄燕霞许娜赵红孙成彪刘洋陈华鑫万家余刘文森金宁一
- 关键词：吞噬活性
- 量子点抗体偶联研究进展
- 2015年
- 量子点(Quantum Dots,QDs)是一种半导体纳米微晶,具有光稳点性好、激发光谱宽而连续、发射光谱窄而对称、荧光寿命长等优点,被广泛应用于生物标记、传感和成像等应用中,水溶性量子点表面带有功能基团,能够与抗体发生偶联,本文着重从共价和非共价偶联两个方面来进行分析,同时对量子点的前景进行展望.
- 刘洋刘洋王思珍黄燕霞
- 关键词：量子点抗体
- 河豚毒素荧光偏振免疫分析方法的建立被引量：5
- 2016年
- 河豚毒素主要存在于河豚鱼中,是一种致命的神经毒素。将量子点标记于河豚毒素,并将其作为示踪物,获得高且稳定的荧光信号,建立荧光偏振免疫分析技术检测河豚毒素。所建立的方法检测河豚毒素检测范围为1.36~101.27μg/L,IC50值为11.76μg/L,检测限为0.67μg/L。在该方法的检测范围内标准平均回收率为（99.91±2.60）%,变异系数为2.60%。与竞争性ELISA相比较,本方法河豚毒素测定值与竞争性ELISA测定值呈线性相关,且具有简单、快速等特点,可应用于临床诊断和食品安全检测。
- 孙成彪许娜刘洋肖世峰黄燕霞韩奇李忠义万家余沈明浩刘文森
- 关键词：荧光偏振免疫分析河豚毒素量子点
