王丽
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
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- 瞬时受体电位锚蛋白1通道调节慢性鼻窦炎上皮细胞自噬及细胞间黏附分子表达的作用探究
- 2022年
- 目的 探究瞬时受体电位锚蛋白1(transient receptor potential ankyrin1,TRPA1)对慢性鼻窦炎(CRS)上皮细胞自噬与细胞间黏附分子(intercellular adhesion moleclar-1,ICAM-1)表达的影响。方法 通过免疫组织化学染色、实时荧光定量PCR及Western blot检测TRPA1在对照组、慢性鼻窦炎不伴鼻息肉(chronic nasal-sinusitis without nasal polyps,CRSsNP)及慢性鼻窦炎伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSwNP)患者鼻黏膜组织中的表达水平,并采用免疫组织化学染色和Western blot观察各组患者鼻黏膜组织内自噬水平;分离培养鼻黏膜上皮细胞,利用细胞角蛋白AE1进行免疫荧光染色鉴定上皮细胞;将鼻黏膜上皮细胞随机分为对照组、脂多糖(LPS)组、LPS+TRPA1抑制剂组,实时荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞TRPA1在mRNA和蛋白上的表达水平,以自噬双标腺病毒mRFP-GFP-LC3感染细胞并通过荧光显微镜观察各组细胞自噬情况,并使用透射电镜观测各组细胞自噬小体形成,实时荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞ICAM-1在mRNA和蛋白上的表达水平。结果 相较于对照组,CRSsNP与CRSwNP患者鼻黏膜上TRPA1平均光密度值升高,其mRNA相对表达量和蛋白相对表达量均上调(P<0.05),且LC3-Ⅱ平均光密度值升高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高,Beclin-1蛋白相对表达量上调而p62蛋白相对表达量下调(P<0.05),组织内自噬水平升高。成功分离到生长密集、形状为梭形或多边形以及AE1呈阳性表达的鼻黏膜上皮细胞;与LPS组比较,经过LPS与TRPA1抑制剂共处理的鼻黏膜上皮细胞TRPA1 mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均下调(P<0.05),自噬溶酶体红色荧光减弱,自噬小体也明显减少,同时,ICAM-1mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均下调(P<0.05)。结论CRS中TRPA1表达异常增加,自噬水平也升高,靶向抑制TRPA1能够抑制CRS上皮细胞自噬以及ICAM-1表达的升高。
- 王丽黄永阳张义綦彬万龙陈才盛
- 关键词：瞬时受体电位通道鼻黏膜细胞粘附分子
- 重组牛碱性成纤维细胞生长因子外用凝胶促进包皮环切术后切口愈合的疗效观察
- 2015年
- 目的:探讨重组牛碱性成纤维细胞生长因子外用凝胶对于包皮环切术后切口愈合的影响。方法:将342例拟行包皮环切术的患者随机分成两组。观察组172例,手术完成后给予重组牛碱性成纤维细胞生长因子外用凝胶均匀涂抹切口,以后每日换药时涂抹;对照组170例,不给予重组牛碱性成纤维细胞生长因子外用凝胶。观察术后两组切口平均愈合时间、切口平整率。结果:2组患者切口愈合时间和切口平整率有显著性差异(P<0.05),观察组疗效优于对照组。结论:重组牛碱性成纤维细胞生长因子外用凝胶可以加快包皮手术切口的愈合,抑制瘢痕增生,值得临床推广。
- 陶佳意却晖王丽张劲松柳琦刘辉勇
- 关键词：重组牛碱性成纤维细胞生长因子包皮环切术外用切口愈合
- 齐墩果酸通过抑制自噬调节变应性鼻炎中的Treg/Th17细胞失衡
- 2023年
- 目的 探讨齐墩果酸对变应性鼻炎(AR)中调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)/辅助性T细胞17(helper T cells17,Th17)的调节作用及潜在机制。方法 收集AR患者鼻黏膜组织及外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclear cell,PBMC)。饲养BALB/c小鼠。PBMC用于建立AR细胞模型,BALB/c小鼠用于建立AR动物模型。对于AR细胞使用150μg/ml的齐墩果酸进行治疗。对于AR小鼠使用低剂量(L)-齐墩果酸(50 mg/kg)、高剂量(H)-齐墩果酸(200 mg/kg)、自噬抑制剂3-MA(10 mg/kg)、H-齐墩果酸+自噬激活剂雷帕霉素(Rapa,1 mg/kg)分别进行治疗。qRT-PCR测人鼻黏膜组织IL-17A和Foxp3的表达以及小鼠各组鼻黏膜组织中RORγt和Foxp3的表达。流式细胞术从PBMC中分选Th17和Treg细胞,并检测PBMC中白细胞介素17A(IL-17A)细胞和叉头样转录因子3(Foxp3)细胞的比例。Western blot法检测Th17和Treg细胞中自噬相关蛋白Beclin1、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、p62的表达。酶联免疫吸附试验检测各组小鼠鼻腔灌洗液中IL-17A和IL-10的表达。结果 AR组患者鼻黏膜组织中IL-17A表达显著增加,但Foxp3的表达显著降低(P均<0.05)。齐墩果酸下调PBMC中IL-17A的表达,并上调Foxp3的表达。齐墩果酸抑制Th17细胞和Treg细胞中Beclin1、LC3-Ⅱ以及LC3-Ⅰ的表达(P均<0.05),促进p62的表达水平。齐墩果酸降低AR小鼠体内IL-17A和RORγt水平,并上调IL-10和Foxp3的水平(P均<0.05)。结论 齐墩果酸通过抑制自噬信号改善AR中Th17/Treg细胞的平衡。
- 王丽黄永阳张义綦彬万龙杜炎平陈才盛
- 关键词：齐墩果酸自噬T淋巴细胞调节性T淋巴细胞
- THBS1基因编辑BMSCs对变应性鼻炎模型小鼠鼻黏膜屏障功能及炎症反应的影响被引量：2
- 2022年
- 目的 探究血小板反应蛋白1(THBS1)基因编辑骨髓间充质干细胞(BMSCs)对变应性鼻炎(AR)小鼠的鼻黏膜屏障功能与炎症反应的影响。方法 分离培养小鼠BMSCs,流式细胞仪测定细胞表面标记物表达,茜素红染色和油红O染色检测细胞成骨与成脂分化能力,鉴定分离的结果;使用含THBS1基因的慢病毒感染BMSCs,荧光显微镜观察细胞内绿色荧光蛋白EGFP表达,并以实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞内THBS1 mRNA和蛋白表达情况,鉴定感染效果。实验分为对照组、模型组、BMSCs组、THBS1-BMSCs组,每组15只,除对照组外的其余3组小鼠均构建AR模型,对照组和模型组小鼠均尾静脉注射0.1 m L PBS,BMSCs组和THBS1-BMSCs组小鼠分别尾静脉注射0.1 m L BMSCs、0.1 m L经THBS1基因编辑的BMSCs。处理结束后,对各组小鼠流涕、挠鼻及喷嚏情况进行统计,ELISA法检测血清IFN-γ、Ig E、TNF-α、IL-4及IL-6的含量,HE染色和PAS染色观察鼻黏膜病理形态学变化,免疫荧光染色检测鼻黏膜内CK-5与β-tubulin表达情况,Western blot检测鼻黏膜内紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin的水平。结果 分离的细胞表面CD105、CD90和CD73为阳性表达,CD34和CD45为阴性表达,并具备良好的成骨与成脂分化能力,说明成功分离到BMSCs。经含THBS1基因的慢病毒感染后的BMSCs出现明显绿色荧光蛋白EGFP表达,THBS1 mRNA和蛋白相对表达均上调(P <0.05)。与对照组比较,模型组小鼠精神萎靡,伴有连续性喷嚏和挠鼻次数增加(P <0.05),血清IFN-γ含量降低,Ig E、TNF-α、IL-4、IL-6含量均升高(P <0.05),鼻黏膜结构受损,有大量嗜酸性粒细胞浸润,且杯状细胞数目也明显增加(P <0.05),CK-5与β-tubulin的荧光强度均减弱(P <0.05),Claudin-1、Occludin的蛋白相对表达均下调(P <0.05);与模型组比较,BMSCs组和THBS1-BMSCs组小鼠精神状态有所好转,喷嚏和挠鼻次数减少(P <0.05),血清IFN-γ含量升高,Ig E、TNF-α、IL-4、IL-6含量均
- 王丽黄永阳张义綦彬万龙杜炎平陈才盛
- 关键词：血小板反应蛋白1变应性鼻炎
- 齐墩果酸通过抑制自噬调节变应性鼻炎中的Treg/Th17细胞失衡
- 2024年
- 目的:探讨齐墩果酸对变应性鼻炎(AR)的作用及潜在作用机制。方法:密度梯度离心分离外周血单个核细胞(PBMCs)。实时定量PCR检测鼻黏膜中Foxp3、IL-17A、Beclin1、RORγt mRNA表达;流式细胞术检测PBMCs中Treg和Th17细胞比例;Western blot检测鼻黏膜中RORγt、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin1、P62蛋白表达。将小鼠随机分为对照组、卵清蛋白(OVA)组、低剂量(L-)齐墩果酸组、高剂量(H-)齐墩果酸组、DSGC、3-MA和H-齐墩果酸+Rapa组。HE染色和高碘酸席夫(PAS)染色观察组织学变化。ELISA检测血清学变化、IL-17A、IL-10、嗜酸性阳离子蛋白(ECP)和抗OVA特异性抗体表达。结果:AR患者存在Th17/Treg失衡和自噬激活,而齐墩果酸在体外恢复Th17/Treg平衡并抑制自噬。体内实验表明,齐墩果酸可抑制OVA诱导的过敏性鼻部症状和自噬通路激活,与3-MA的调节作用相同,而Rapa可减弱高剂量齐墩果酸的作用。此外,齐墩果酸可减少鼻腔灌洗液中不同炎症细胞浸润,防止上皮细胞损伤,改善鼻黏膜厚度及黏液分泌。齐墩果酸可调节小鼠Th17/Treg相关细胞因子表达平衡。结论:齐墩果酸是治疗AR极具潜力的药物,通过抑制自噬调节Th17/Treg平衡发挥作用。
- 王丽黄永阳张义綦彬万龙杜炎平陈才盛
- 关键词：齐墩果酸变应性鼻炎自噬TH17/TREG
