目的建立合欢皮抗血管新生有效部位的HPLC指纹图谱,为合欢皮质量标准的建立提供依据。方法对合欢皮正丁醇相样品进行固相萃取,获得组成相对简单且具有较高抑制新生血管活性的组分。对该活性组分进行高效液相色谱测定,色谱柱为Innovation TM RTP Amide（250 mm×4.6 mm）,流动相：乙腈-水）,梯度洗脱,流速：1 m L/min,检测波长：210 nm,柱温：40℃,进样量为10μL;建立合欢皮有效组分指纹图谱,并对该方法的稳定性、精密度、可重复性进行测定。结果 3个共有峰分离度最好、峰面积最大,在合欢皮指纹图谱研究中可标定为指纹图谱峰。该3个色谱峰分别对应完整色谱图中的14、21、22号峰,所以将14、21、22号峰标定为指纹图谱特征峰,并对这3个特征性指纹峰进行峰面积计算。结果 14号峰的峰面积不小于25.7 m AU×min,21号峰的峰面积不小于55.89 m AU×min,22号峰的峰面积不小于23.79 m AU×min。稳定性试验结果显示3个共有峰的峰面积RSD为2.01%～2.90%,保留时间RSD为0.07%～0.35%;精密度试验显示3个共有峰的峰面积RSD为2.03%～2.40%,保留时间RSD为0.37%～0.67%;重复性试验显示3个共有峰的峰面积RSD为1.79%～2.62%,保留时间RSD为0.38%～0.76%。指标样品溶液的含量在2～20μg范围内呈现良好的线性关系。结论 HPLC指纹图谱的建立可为合欢皮抗新生血管有效部位的质量评价提供参考。
