张兵
- 作品数：6 被引量：6H指数：2
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院免疫研究室更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 树突状细胞吞噬PLA-AFP_(218-226)微球后诱导细胞毒性T淋巴细胞反应被引量：1
- 2006年
- 目的研究树突状细胞(DC)吞噬包被有甲胎蛋白HLA-A2限制性表位肽(AFP218-226,LLNQHACAV)的聚乳酸微球(PLA-AFP218-226)后诱导的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对肝癌细胞株HepG2和负载有AFP218-226的T2细胞株的毒性作用。方法用GM-CSF和IL-4诱导HLA-A2+的健康志愿者外周血单核细胞,LPS诱导成熟,使其分化为高纯度DC,在诱导过程中加入PLA-AFP218-226微球,用吞噬了PLA-AFP218-226微球的DC诱导自身T淋巴细胞,使其成为肝细胞癌(HCC)特异性CTL。用流氏细胞仪检测DC膜分子标志,T2细胞与AFP218-226结合实验检测HLA-A2分子与AFP218-226之间的亲合力,MTT法检测特异性CTL杀伤HepG2和T2细胞株的能力。结果AFP218-226与HLA-A2分子具有较高的亲合力,吞噬微球后的成熟DC高表达CD83、CD86、CD40等膜分子,其诱导的特异性CTL对HepG2和负载有AFP218-226的T2细胞株具有强的细胞毒作用。结论PLA-AFP218-226被DC细胞吞噬后,能够诱导HCC特异性CTL的产生,可能成为一种新型的抗肿瘤表位肽疫苗,在肝癌的防治中得到应用。
- 张兵陈玮董薇蔡美英
- 关键词：PLACTL
- 树突状细胞负载人工合成甲胎蛋白表位肽后诱导的细胞毒作用被引量：2
- 2007年
- 目的观察HLA-A2树突状细胞(dendritic cells,DCs)负载人甲胎蛋白(humanα-fetoprotein,hAFP)HLA-A2限制性九肽(FMNKFIYEI,AFP158-166)后,激活特异的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocytes,CTLs),杀伤肝癌细胞株的能力。方法用贴壁法分离HLA-A2成人外周血单核细胞,分次加入IL-4与GM-CSF共同诱导培养6d,给予单核细胞调控培养液(monocyte conditioned medium,MCM)诱导成熟2d,然后负载AFP158-166,激活特异性CTLs,用MTT法检测CTL杀伤肝细胞癌(hepa-tocellular carcinoma,HCC)细胞株HepG2和T2细胞株的能力。结果采用贴壁法、多次加入细胞因子和MCM为成熟诱导剂的培养方法可以获得足量的成熟DCs,并且在去除细胞因子后,仍能保持成熟的DCs形态;负载AFP158-166的DCs激活的CTLs对HepG2和负载AFP158-166的T2具有较强的杀伤作用。结论负载HLA-A2限制性表位肽AFP158-166的DCs对表达AFP的HLA-A2HCC有潜在的治疗作用,具有一定的临床运用前景。
- 张兵董薇朱月明蔡美英
- 关键词：树突状细胞甲胎蛋白肝细胞癌
- 脂多糖刺激树突状细胞前后TLR2、3、4基因表达的检测被引量：3
- 2005年
- 目的检测脂多糖作用于树突状细胞前后TLR2、3、4基因的表达情况。方法从外周血分离单核细胞,加入rhGMCSF及rhIL4,培养的第6天,实验组加入脂多糖刺激24h,对照组不加。分别提取细胞总RNA,行半定量RTPCR,产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。结果单核细胞经GMCSF及IL-4诱导7d后的DC表达较高水平TLR2、3、4。脂多糖刺激24h后,TLR2、3、4表达下降,TLR4几乎测不到。结论树突状细胞在受脂多糖刺激前后TLRs的表达有显著变化,推测和它的功能成熟有关。
- 董薇张兵蔡美英魏大鹏
- 关键词：基因表达脂多糖树突状细胞TLRS半定量RT-PCR
- 脂多糖通过TLRs信号途径诱导树突状细胞成熟机理初探
- 2005年
- 目的探讨脂多糖(LPS)通过TLRs信号途径进一步促进人外周血单核细胞来源树突状细胞(DC)成熟的机理。方法从外周血分离单核细胞,加入rhGM-CSF及rhIL-4,在培养的第6d,实验组加入LPS刺激24h,对照组不加。分别提取细胞总RNA,行半定量RT-PCR,产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。激光扫描共聚焦显微镜检测DC内NF-κB表达情况。结果单核细胞经GM-CSF及IL-4诱导7d后的DC表达较高水平TLR2、3、4。LPS刺激24h后,TLR2、3、4表达下降,TLR4几乎测不到。激光扫描共聚焦显微镜检测到,未刺激组DC胞浆染色阳性,胞核为阴性。LPS刺激组的细胞核染色为强阳性,胞浆染色为阳性。结论DC在受LPS刺激前后TLRs的表达有显著变化,NF-κB也从胞浆移位至核内。这标志着经LPS刺激后DC在功能上进一步成熟。为下一步研究DC的功能奠定了基础。
- 董薇张兵朱月明蔡美英魏大鹏
- 关键词：半定量RT-PCR核转录因子
- 人外周血树突状细胞的分离培养及鉴定
- 2004年
- 目的从外周血中分离单个核细胞 ,经体外诱导培养获取高纯度的树突状细胞。方法淋巴细胞分离液分离外周血的单个核细胞 ,经贴壁 2h后加入GM CSF、IL 4诱导 7天 ,观察细胞形态 ,用流式细胞仪检测其表面标志 ,采用混合淋巴细胞培养法检测其刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力。结果经诱导生成的细胞具有典型的DCs形态特征 ,高表达CD83 、CD86和MHCⅠ、Ⅱ类分子 ,在体外能诱导强烈的同种异体淋巴细胞增殖反应。结论本研究所建立的经济、简便的从外周血获取大量成熟DCs的方法 ,为DCs的进一步研究奠定了基础。
- 邓小玲张兵
- 关键词：外周血树突状细胞重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子
- DC-SIGN与病原感染
- 2004年
- DC-SIGN是相对限制地表达于树突细胞上的膜分子,能结合人类免疫缺陷病毒、猴免疫缺陷病毒和Ebola病毒等,并且介导这些病毒在体内的感染,在病毒致病中发挥重要作用;同时它还可以作为ICAM-2、ICAM-3的受体,介导树突细胞在体内的转运和免疫突触的形成;最后,它还可以作为抗原识别受体,参与抗原呈递.最近报道,无鞭毛体利什曼原虫、登革病毒、结核分枝杆菌也能结合人类树突细胞DC-SIGN或DC-SIGN转染的细胞,进一步确立了DC-SIGN在树突细胞介导免疫反应中的关键作用.
- 张兵蔡美英
- 关键词：DC-SIGN树突细胞受体病原感染鞭毛地表
