范鲁峰
- 作品数：9 被引量：8H指数：2
- 供职机构：山东大学齐鲁医院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金中国博士后科学基金宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脾切除对门静脉高压大鼠种植性肝肿瘤的影响
- 研究背景和目的 肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC,以下简称肝癌）是全球最常见的恶性肿瘤之一，其发病率在恶性肿瘤中占第五位，致死率居第三位。80-90%的肝癌由肝硬化发展而来。肝硬化仍然...
- 范鲁峰
- 关键词：脾切除术门静脉高压肝肿瘤免疫
- 文献传递
- 脾切除对门脉高压大鼠种植性肝肿瘤的影响被引量：1
- 2012年
- 目的通过建立大鼠门脉高压背景下肝肿瘤模型,观察病理性脾脏的切除对肝肿瘤发生发展的影响。方法按照四氯化碳复合、梯段用药法制备大鼠肝硬化门脉高压模型,后将Walker-256肿瘤块种植在大鼠肝脏左外叶上,随机分组的A组大鼠在种植瘤块同时切除脾脏,B组大鼠保留脾脏。10d后分别测定两组大鼠的T细胞亚群CD4、CD8及CD4/CD8;切除大鼠肝脏左外叶,测量种植肿瘤块最大直径,并用免疫组织化学染色方法检测肿瘤组织Ki-67的表达。结果门脉高压模型建成后,大鼠的血常规以及肝功能指标出现明显异常。A组大鼠的CD4值和CD4/CD8比值均高于B组大鼠(0.36±0.01vs 0.35±0.02,1.33±0.08vs 1.24±0.05;P<0.05或P<0.01),而CD8值则低于B组大鼠(0.27±0.01vs0.29±0.02,P<0.01)。A组大鼠的肝脏肿瘤直径与B组大鼠比较差异无统计学意义。A组大鼠肿瘤组织的Ki-67阳性率较B组降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论门脉高压状态下病理性脾脏的切除既有利于提高机体抗肿瘤的免疫力,又可以在一定程度上减弱肝肿瘤的侵袭能力。
- 范鲁峰杨宁汪慧邵卓赵文超陈本栋付雍杨广顺
- 关键词：脾切除术门静脉高压肝肿瘤免疫
- 脂肪间充质干细胞在功能化自组装纳米多肽水凝胶三维培养下旁分泌的研究被引量：1
- 2018年
- 目的探讨脂肪间充质干细胞（ADMSCs）在自组装纳米多肽水凝胶介导的三维培养条件下旁分泌促血管生成激素及其影响因素。方法分离、培养人ADMSCs，并合成RADAI-16、RGD、KLT 3种多肽且按体积比2∶1∶1制备RADAI-16∶KLT∶RGD多肽混合溶液，原子力显微镜（AFM）下观察多肽水凝胶形态（n＝4）。使用水凝胶对ADMSCs进行三维培养，并设置ADMSCs普通培养组（37 ℃、5%CO2细胞培养箱）和缺氧培养组（37 ℃、10%CO2、1%O2乏氧培养箱）作为对照。酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组细胞培养上清内血管内皮生长因子（VEGF）（n＝3）、肝细胞生长因子（HGF）（n＝3）浓度；Western blot检测细胞内血红素氧合酶-1（HO-1）（n＝3）的表达。结果分离培养的ADMSCs为长梭形，呈＂漩涡式＂生长。RADA16-I、RGD、KLT及自组装多肽溶液在AFM下均为纳米纤维状，直径10～20 nm，长度100～500 nm。ELISA法测得普通培养1 d、缺氧培养1 d及三维培养1 d后细胞培养上清中HGF浓度分别为（47.31±6.75）、（247.86±17.59）、（297.25±17.95） ng/L；VEGF浓度分别为（218.30±3.03）、（267.13±4.27）、（289.14±3.11） ng/L，缺氧及三维培养条件下细胞旁分泌HGF、VEGF均增高，但三维培养条件下增高更明显（P＝0.000）。Western blot结果显示三维培养组细胞内HO-1的表达量约为普通培养组2倍（P＝0.000），为缺氧培养组1.2倍（P＝0.033）。结论功能性自组装纳米多肽水凝胶介导ADMSCs的三维培养能明显促进其旁分泌作用，且缺氧是其重要影响因素之一。
- 凌建民田爱玲范鲁峰邵闻冲武涵焦阳胡三元孙念峰
- 关键词：脂肪间充质干细胞旁分泌缺氧
- 功能性自组装纳米多肽水凝胶负载脂肪间充质干细胞的研究被引量：2
- 2015年
- 目的观察功能性自组装多肽的理化性质、自组装成水凝胶特性及对细胞进行三维培养。方法合成RADA、RGD、KLT3种多肽并制备RAD／KLT!RGD多肽混合溶液，盐溶液诱发多肽溶液自组装成水凝胶。原代培养脂肪间充质干细胞并对其进行鉴定，使用水凝胶对其三维培养来观察其在水凝胶中的生长，并设置RAD／KLT水凝胶组做对比。结果多肽溶液成功自组装成水凝胶，干细胞在三维培养中迁移、分化并有成管腔的趋势，RAD／KLT／RGD水凝胶[（87．75±4．79）个细胞／视野]较对比组[（65．50±6．25）个细胞／视野]黏附生长了更多的细胞（P〈0．05）。结论RAD／KLT／RGD功能性自组装纳米多肽水凝胶是一种更为优良的组织工程框架材料。
- 刘占鳌黄文柏周冠洲范鲁峰邵闻冲胡三元孙念峰
- 关键词：水凝胶
- 不同分化肝癌细胞株中上皮细胞黏附分子、CD90及CD24的表达分析被引量：2
- 2013年
- 目的验证不同分化肝癌细胞株MHCC97L、MHCC97H和HCCLM3的恶性表型，并探索其中肿瘤干细胞表面标志分子CD90、上皮细胞黏附分子（EpCAM）及CD24的表达情况。方法Transwell侵袭小室检测三种不同分化细胞株MHCC97L、MHCC97H和HCCLM3的侵袭能力，细胞计数试剂盒8检测三种不同分化细胞株对奥沙利铂的敏感性，流式细胞仪检测肿瘤干细胞表面标志分子CD90、EpCAM、CD24在三种细胞株中的表达情况。多个样本均数比较采用方差分析。结果MHCC97L、MHCC97H和HCCLM3三种细胞穿膜细胞数存在明显差异，HCCLM3（30．57±8．95）个〉MHCC97H（21．33±4．17）个〉HCC97L（9．33±3．85）个，F=38．484，P〈0．Ol。对奥沙利铂的半数抑制浓度IC_50 HCCLM3为（36．57±6．95）umol／L，MHCC97H（26．35±3．88）μmol／L，MHCC97L（17．68±3．25）μmol／L，F=40．181，P〈O．01。CD90在MHCC97L、MHCC97H和HCCLM3细胞中的表达比例分别为0．92％±0．21％、1．98％±0．23％和2．55％±0．340／0，差异有统计学意义（F=60．481，P〈0．01）；EpCAM在三种细胞中的表达比例分别为2．11％±0．32％、3．23％±0．18％和4．38％±0．49％，表达差异也有统计学意义（F=84．800，P〈0．01）；CD24在三种细胞中的表达比例分别为0．68％土0．37％、1．22％±0．26％和1．36％±0．24％，表达差异有统计学意义（F=15．677，P〈0．01）。结论分化越低的肝癌细胞株侵袭能力越强，对化疗敏感性越差，其中的肝癌干细胞比例则越高。
- 陈本栋惠永峰张海斌范鲁峰司马辉杨广顺
- 关键词：肝细胞干细胞上皮细胞黏附分子CD90CD24
- 传代扩增后的脂肪来源间充质干细胞向内皮细胞分化的研究被引量：1
- 2014年
- 目的 观察脂肪来源的间充质干细胞（ad-MSCs）在经过传代扩增后诱导内皮细胞方向的分化能力.方法 使用胶原酶消化法分离培养原代脂肪间充质干细胞,检测其生长特性并用流式细胞术对其进行了联合免疫表型鉴定,诱导其多向分化来确定其干细胞特性.扩增后的高代次（P5）脂肪间充质干细胞被用于进行3种条件下的诱导内皮细胞方向分化（基础培养基＋血管内皮生长因子（VEGF）、内皮细胞支持液＋VEGF、仅用内皮细胞支持液）,诱导时间为12 d,之后用流式细胞术检测CD31并用免疫细胞化学法检测Ⅷ因子表达来评估分化效果.结果 我们成功地进行了脂肪间充质干细胞的原代培养,原代培养的细胞表现出了成纤维细胞样形态,在免疫表型和多向分化能力都表现出了干细胞特性.经过仅12 d的诱导内皮细胞分化后,EGM2-MV＋ VEGF组开始表达CD31和Ⅷ因子,而另外两组未发现表达.结论 传代扩增后的高代次的脂肪间充质干细胞仍有较强的内皮细胞分化能力,EGM2-MV＋ VEGF能更高效地促进其向内皮细胞分化.
- 刘占鳌黄文柏周冠洲范鲁峰邵闻冲胡三元孙念峰
- 关键词：间充质干细胞内皮细胞分化
- 基于自组装纳米多肽及脂肪间充质干细胞3D打印组织模型的研究被引量：1
- 2017年
- 目的 观察自组装纳米多肽与人脂肪间充质干细胞（Ad-MSCs）3D打印出的组织工程学模型内细胞生长状态及多向分化能力.方法 分离、培养原代Ad-MSCs,流式细胞仪鉴定,以自组装纳米多肽、Ad-MSCs混合溶液为＂生物墨汁＂,利用3D生物打印技术,打印组织工程学模型.诱导其内的Ad-MSCs成骨和成脂分化并分别与对照组进行染色比较.结果 原子力显微镜下观察到纳米多肽纤维结构直径为10-30nm,长200-500nm,具有纳米级材料特点.流式细胞仪鉴定可见分离、培养的细胞CD29（98.51%）、CD90（97.87%）、CD166（98.32%）表达阳性,不表达CD31（1.58%）、CD34（2.42%）、CD45（2.95%）和人类白细胞抗原DR基因（HLA-DR）（0.53%）,符合Ad-MSCs免疫表型.随后利用＂生物墨汁＂打印出组织工程模型,对并其内的Ad-MSCs进行诱导分化,分别对实验组和对照组进行相关染色,茜素红S染色可见成骨诱导实验组中钙结节形成,油红O染色可见成脂诱导实验组Ad-MSCs内脂滴着色,两对照组不着色.结论 以自组装纳米多肽、脂肪间充质干细胞混合溶液为＂生物墨汁＂3D打印出的组织工程学模型内Ad-MSCs生长状态良好,仍具有较强的分化能力.
- 周冠洲凌建民范鲁峰邵闻冲孙念峰
- 关键词：脂肪间充质干细胞
- 载基因磁性金纳米微粒的制备及在细胞中的表达
- 2015年
- 目的制备一种聚乙二醇（PEG）修饰的磁性金纳米微粒作为基因载体用于细胞转染。方法共沉淀法合成并修饰磁性金纳米微粒。透射电镜及纳米粒度分析仪检测磁性金纳米微粒表征。PicaGreen法测定磁性金纳米微粒质粒包封率，凝胶电泳法检测质粒的完整性与抗核酸酶解性。荧光显微镜观察载质粒磁性金纳米微粒转染人结肠癌kVo细胞后绿色荧光蛋白（GFP）表达。结果制备的磁性金纳米微粒呈圆形或类圆形，粒径为（96．45±3．87）nm，zeta电位为（39．05±1．98）mV。磁性金纳米微粒与质粒质量比为5：1时达到最大包封率为80．38％，体外释放结果显示载质粒磁性金纳米微粒在0．5h就检测到质粒释放，24h释放率为（58．10±4．83）％，磁性金纳米微粒能够完整地包封与释放质粒，且能降低所包封质粒被酶解破坏的可能。细胞转染后24h在荧光显微镜下观察到绿色荧光表达，在一定时问内随着时间延长荧光强度增加。结论制备出一种有效的磁性金纳米基因载体，成功进行细胞转染且所转染基因能在细胞内顺利表达。
- 黄文柏刘占鳌周冠洲范鲁峰邵闻冲胡三元孙念峰
- 关键词：磁性纳米材料基因载体细胞转染
