王成昆
- 作品数：28 被引量：19H指数：3
- 供职机构：南华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 舌癌耐药细胞系的建立及耐药相关基因鉴定
- 目的:建立平阳霉素诱导的舌癌多药耐药细胞系,探讨舌癌多药耐药机制。方法:采用抗癌药平阳霉素(pingyangmycin,PYM,又称博莱霉素A5)低浓度递增结合大剂量间歇法体外诱导舌癌细胞系(Tca8113)一年余,通过...
- 郑国沛周敏余艳辉彭波王成昆谷依学欧阳咏梅贺智敏
- 关键词：舌癌多药耐药CDNA芯片
- 文献传递
- 过表达miR-218对胃癌MCG-803细胞增殖的影响
- 2012年
- 目的探讨miR-218对胃癌细胞MCG-803增殖的影响。方法使用脂质体将miR-218mimics转染MGC-803细胞，以无关序列（scramblemimics）作为阴性对照。采用qRT-PCR验证miR-218 nlinlics转染细胞中miR一218的表达水平；通过MTS法观察miR-218过表达对胃癌细胞MGC-803增殖和侵袭能力的影响。结果转染111iR-218mimics的MGC-803细胞中miR-218的表达量约为对照细胞的25倍：过表达miR-218的MGC-803细胞与对照细胞相比，增殖速度明显下降，差异具有显著性（P〈0．（J1）。结论miR一218能抑制胃癌细胞增殖能力，它可能在胃癌的发生和进展中发挥重要作用。
- 邓敏王成昆刘季芳
- 关键词：胃癌MIR-218细胞增殖细胞侵袭
- 一种EB病毒核酸定量检测试剂盒及方法
- 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种EB病毒核酸定量检测试剂盒及方法，所述EB病毒核酸定量检测方法，包括：将整体装置固定到桌面，将盒盖与试剂盒体分离，在提取EB病毒RNA试管依次加入RT‑PCR反应液的反应试剂、酶试...
- 张杨王成昆刘仪彤胡智中
- 文献传递
- 重组血管基膜衍生多功能肽对内皮细胞信号蛋白磷酸化水平的影响
- 2008年
- 目的:研究重组血管基膜衍生多功能肽(rVMBDMP)对人脐静脉内皮细胞(HUVE-12)信号蛋白磷酸化水平的影响。方法:体外培养HUVE-12细胞,C57/BL6小鼠皮下基质胶填塞法观察HUVE-12细胞体内管状结构形成;高通量蛋白磷酸化芯片研究rVBMDMP对HUVE-12细胞信号蛋白磷酸化水平改变。结果:C57/BL6小鼠皮下基质胶填塞法证实:rVBMDMP(1.0,10.0μmol/L)能有效抑制血管内皮生长因子激活的内皮细胞体内管状结构形成。蛋白磷酸化芯片检测结果显示:rVBM-DMP(1.0μmol/L)处理HUVE-12细胞后,死亡信号蛋白(caspase-3,death receptor 3,4,5)和整合素亚单位(integrinαv,β1,β3)磷酸化蛋白较对照组增高2倍以上,而EGFR,pEGFR,VEGFR-1和Survivin磷酸化蛋白较对照组降低50%以下。结论:rVBMDMP可能通过抑制血管内皮生长因子激活的内皮细胞生长和诱导凋亡发挥抗血管生成效应。
- 瞿家权王成昆刘丽华王娟童平珍封萍曹建国
- 关键词：血管生成抑制剂内皮细胞蛋白芯片
- 人类胃癌细胞高侵袭亚系的筛选及其生物学特性研究被引量：3
- 2009年
- 目的采用Transwell小室筛选胃癌细胞高侵袭亚系并研究其生物学特性。方法利用Transwell小室筛选高侵袭力胃癌细胞亚系，通过HE染色、Western blotting、Transwell小室模型、免疫组织化学法及生长曲线研究亚系的生物学特性。结果利用Transwell小室反复筛选10次，从MKN-28细胞中筛选出高侵袭力胃癌细胞亚系MKN-28S10。母亚两系细胞形态上无明显差异，但亚系中E—cadherin和TIMP-1蛋白表达同母系相比显著降低（P〈0．05），显微镜下细胞计数示亚系迁移至膜背面的数量（100．25±0．50／视野）较母系（61．75±2．06／视野）明显增多（P〈0．05），细胞运动能力明显增强；免疫组织化学结果显示，亚系中NM23-H1的表达明显低于母系（P〈0．05）；亚系体外生长速度快于母系。结论MKN-28S10细胞较MKN-28细胞具有更高侵袭力和更强增生能力。
- 周志姣朱建思欧翔周建国王成昆彭芳全细云周智秀
- 关键词：胃肿瘤肿瘤浸润TRANSWELL
- 人canstatin cDNA分泌型真核表达载体的表达及生物学作用研究被引量：3
- 2007年
- 目的将人canstatin cDNA分泌型真核表达载体pSecTag2B/canstatin稳定转染中国仓鼠卵巢(CHO-K1)细胞并获得稳定表达canstatin蛋白产物的细胞株。再进一步研究表达产物的生物学作用。方法将人canstatin cDNA的重组1质粒pSecTag2B/canstatin稳定转染CHO-K1细胞,应用RT-PCR、western-blotting法检测表达产物,再用多种方法进一步研究canstatin的生物学作用。结果成功的将pSecTag2B/canstatin稳定转染CHO-K1细胞并鉴定出上清液中有目的蛋白的表达。该细胞培养上清液能抑制鸡胚绒毛尿囊膜中微血管的生成,抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC-12)的生长并诱导其凋亡。结论①成功的将pSecTag2B/canstatin稳定转染CHO-K1细胞并获得能稳定表达can-statin蛋白产物的细胞株;②证实含canstatin蛋白产物的细胞培养上清液具有抑制鸡胚绒毛尿囊膜微血管生成的活性并可在体外抑制HUVEC-12的生长和诱导其凋亡。
- 胡丽朱建思王成昆
- 关键词：稳定转染脂质体
- 人胃癌细胞高转移亚系的初步筛选及母亚两系生物学特性的比较被引量：3
- 2007年
- 目的筛选高转移胃癌细胞亚系并与其母系进行生物学特性的比较。方法利用tran-swell小室筛选高转移力胃癌细胞亚系,通过HE染色比较母亚两系细胞形态改变;流式细胞仪检测母亚两系细胞周期;免疫细胞化学法检测两系细胞中MMP-9蛋白表达;transwell侵袭小室模型比较母亚两系的迁移能力。结果利用transwell小室从母系MKN-28中成功筛选出高转移力胃癌细胞亚系MKN-28S,母亚两系细胞形态上无明显差异,亚系增殖指数(PI)高于母系,且亚系中MMP-9蛋白表达同母系相比显著增高,显微镜下细胞计数示亚系迁移至膜背面的数量较母系明显增多(P<0.05),细胞运动能力明显增强。结论MKN-28S细胞较MKN-28细胞具有更强增殖能力和更高迁移力。
- 周志姣朱建思周建国王成昆彭亮彭芳
- 关键词：胃癌TRANSWELL
- CXCR4在乳腺癌组织芯片中的表达及其临床意义
- 2015年
- 目的检测趋化因子受体4(CXC chemokinereceptortype4,CXCR4)在各种乳腺癌组织及相应正常乳腺组织中的表达并分析其临床病理意义。方法组织芯片中标本收集于2010年5月—2014年9月,应用免疫组化法检测组织芯片中204例乳腺癌组织和36例正常乳腺组织CXCR4蛋白的表达,以棕色颗粒为阳性标准计算染色强度和阳性细胞占总细胞数的百分比进行半定量处理。结果 CXCR4蛋白主要表达于细胞膜和细胞浆,在相应正常乳腺组织、小叶原位癌、导管内原位癌和浸润性导管癌中的阳性表达率依次升高,分别为8.3%(3/36)、25.0%(1/4)、10.0%(5/50)、72.0%(108/150),4组间差异有统计学意义(P<0.001);在I、II和III级以上分级的乳腺癌组织中,CXCR4蛋白的阳性表达率分别为18.2%(2/11)、80.4%(78/97)、69.8%(30/43),3组间差异有统计学意义(P<0.001);CXCR4蛋白在有转移的肿瘤组织和无转移的乳腺癌组织中的阳性率分别为88.4%(61/69)和11.1%(15/135)。结论 CXCR4在部分乳腺癌组织中高表达,且与乳腺癌组织类型及乳腺癌组织侵袭转移能力密切相关。
- 张杨王成昆彭波朱欢张志杰
- 关键词：CXCR4乳腺癌组织芯片免疫组织化学法
- xCT在鼻咽癌细胞体外迁移侵袭中的作用及机制
- 2014年
- 目的 观察xCT基因对鼻咽癌细胞侵袭转移能力的影响并初步探寻其可能机制.方法 实时荧光定量PCR和Western blot检测xCT在鼻咽癌高转移性细胞5-8F与低转移性6-10B细胞中的表达差异;建立过表达xCT的6-10B细胞和敲低xCT的5-8F细胞,用划痕实验及Transwell实验观察干预xCT对细胞迁移侵袭能力的影响;用Western blot检测各组细胞中基质金属蛋白酶1（MMP1）表达的改变.结果 鼻咽癌高转移性细胞5-8F中xCT的mRNA及蛋白表达量均高于低转移性6-10B细胞;外源性过表达xCT增强6-10B细胞的迁移侵袭能力,xCT表达沉默或功能抑制能降低5-8F细胞的迁移侵袭能力;5-8F细胞中MMP1的表达明显高于6-10B细胞,且其表达水平与xCT呈正相关.结论 xCT与鼻咽癌的侵袭转移密切相关,xCT能增强NPC细胞的迁移侵袭能力;xCT可能通过上调MMP1来介导NPC细胞的增殖及侵袭转移.
- 李亚菲王成昆彭波谷依学贺智敏
- 关键词：肿瘤浸润聚合酶链反应基质金属蛋白酶1
- 电脉冲转癌抑素基因对Lewis肺癌体内生长的抑制作用
- 2014年
- 目的 构建人canstatin克隆载体及重组真核表达载体,观察电脉冲介导骨骼肌内canstatin基因导入对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤生长的影响.方法 用一步法RT-PCR钓取胚肝canstatin cDNA,克隆入真核表达载体pEGFP-N1,构建含重组质粒pEGFP-N1/canstatin;将该重组质粒通过电脉冲转入荷瘤Lewis肺癌小鼠肌肉内,应用逆转录PCR、荧光显微镜测量荧光强度、肿瘤称重、肿瘤体积测定及免疫组化的方法检测canstatin基因在体内的表达和抗肿瘤作用.结果 获得684 bp人canstatin基因,测序证明canstatin cDNA编码序列与Genbank中报道的序列一致.电脉冲介导的质粒基因导入效率较单纯质粒注射高30倍以上;转canstatin基因后导入部位的canstatin mRNA高表达,目的蛋白表达时间可持续25 d以上.EGFP/Canstatin融合蛋白在导入部位表达并分泌至循环中发挥生物学效应,起到抑制远隔部位肿瘤生长的作用.实验组肿瘤颜色苍白,毛细血管稀少,坏死多,体积小,瘤重抑制率57.7％.结论 成功构建了重组真核表达载体pEGFP-N1/canstatin,电脉冲介导的骨骼肌内基因导入法的转移效率较单纯质粒注射高且持续时间长;是一种高效安全,简便经济,可能具有一定临床应用价值的基因导入方法;电脉冲介导骨骼肌内canstatin基因导入对小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤生长具有显著的抑制作用.
- 王成昆张杨肖胜军董琳朱建思冬毕华贺智敏
- 关键词：电刺激疗法肿瘤移植基因疗法
